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DOI: 10.3791/63177-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a novel CRISPR-Cas9 technique to identify maternal-effect phenotypes in early development. By utilizing multiplexing guide RNAs, researchers can rapidly uncover the roles of maternally-expressed genes in a single generation.
초기 개발은 모계 유전 제품에 의존하며 이러한 제품 중 많은 부분의 역할은 현재 알려져 있지 않습니다. 여기에서는 CRISPR-Cas9를 사용하여 단일 세대에서 모성 효과 표현형을 식별하는 프로토콜을 설명했습니다.
초기 발달 과정에서 많은 모계로 발현 된 유전자의 역할은 현재 알려져 있지 않습니다. 이 모성 CRISPR 기술은 모성 효과 유전자와 발달에서의 역할을 신속하게 식별 할 수있게합니다. 가이드 RNA를 단일 유전자로 멀티플렉싱하면 연구자가 단일 세대에서 새로운 모성 효과 표현형을 식별할 수 있습니다.
이 연구는 초기 배아 발생에 필요한 배우자에서 mRNA 전사체의 기능을 이해하는 데 도움이됩니다. 이 기술의 핵심은 한 세포 단계 초기에 배아를 미세 주입하고 대부분의 가이드 RNA가 주입된 배아에서 체세포 돌연변이를 만들 수 있는지 확인하는 것입니다. 각 유전자 특이적 올리고뉴클레오티드에 대한 가이드 RNA 주형을 만들기 위해, 상수 올리고뉴클레오티드에 분석물을 넣고 오버행을 T4 DNA 중합효소로 채운다.
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