Name: 흑색종 전이의 새로운 중재자 식별을 위한 강력한 발견 플랫폼 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 41 s
Description: 발견하세요 흑색종 전이 매개체를 평가하는 강력한 생체 내 워크플로우를 통해 재현성 높은 연구 방법론을 습득하세요. 이 표준화된 기술은 표적 발굴과 치료제 개발에 활용됩니다.

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우리는 NYU Langone Health의 DART(Advanced Research Technologies) 부서, 특히 Perlmutter Cancer Center Support Grant NIH/NCI 5P30CA016087에 의해 부분적으로 지원되는 실험 병리학 연구소, 게놈 기술 센터, 세포측정 및 세포 분류 실험실, 전임상 이미징 코어에 감사드립니다. 우리는 IRB 승인 프로토콜 (Universal Consent study #s16-00122 및 학제 간 흑색종 협동 그룹 연구 #10362)을 통해 얻은 환자 유래 흑색종 단기 배양 + (10-230BM 및 12-273BM)에 대한 액세스를 제공 한 NYU 학제 간 흑색종 협력 그룹 (PI : Iman Osman 박사)에게 감사드립니다. 113/6-4L 및 131/4-5B1 흑색종 세포주*를 제공해주신 Robert Kerbel 박사(토론토 대학교)와 WM 4265-2, WM 4257s-1, WM 4257-2 흑색종 단기 배양**을 제공해주신 Meenhard Herlyn 박사(Wistar Institute)에게 감사드립니다. E.H.는 NIH/NCI R01CA243446, P01CA206980, American Cancer Society-Melanoma Research Alliance Team Science Award 및 NIH Melanoma SPORE(NCI P50 CA225450; 파이 : I.O.). 그림 1은 Biorender.com 로 작성되었습니다.

<ol><li>Sung, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+Cancer+Statistics+2020%3A+GLOBOCAN+Estimates+of+incidence+and+mortality+worldwide+for+36+cancers+in+185+countries%5BTitle%5D)+AND+%22CA%3A+A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN Estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 71 (3), 209-249 (2021).</li>
<li>Adler, N. R., Haydon, A., McLean, C. A., Kelly, J. W., Mar, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+pathways+in+patients+with+cutaneous+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Metastatic pathways in patients with cutaneous melanoma.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 30 (1), 13-27 (2017).</li>
<li>Platz, A., Egyhazi, S., Ringborg, U., Hansson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+cutaneous+melanoma%3B+a+review+of+NRAS+and+BRAF+mutation+frequencies+in+relation+to+histogenetic+subclass+and+body+site%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Oncology%22%5BJournal%5D)">Human cutaneous melanoma; a review of NRAS and BRAF mutation frequencies in relation to histogenetic subclass and body site.</a> Molecular Oncology. 1 (4), 395-405 (2008).</li>
<li>Alonso, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+study+in+melanoma+identifies+epithelial-mesenchymal+transition+as+a+major+determinant+of+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">A high-throughput study in melanoma identifies epithelial-mesenchymal transition as a major determinant of metastasis.</a> Cancer Research. 67 (7), 3450-3460 (2007).</li>
<li>Rowe, C. J., Khosrotehrani, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+and+biological+determinants+of+melanoma+progression%3A+Should+all+be+considered+for+clinical+management%5BTitle%5D)+AND+%22Australasian+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Clinical and biological determinants of melanoma progression: Should all be considered for clinical management.</a> Australasian Journal of Dermatology. 57 (3), 175-181 (2016).</li>
<li>Plebanek, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-metastatic+cancer+exosomes+induce+immune+surveillance+by+patrolling+monocytes+at+the+metastatic+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Pre-metastatic cancer exosomes induce immune surveillance by patrolling monocytes at the metastatic niche.</a> Nature Communications. 8 (1), 1319(2017).</li>
<li>Orgaz, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+pigment+epithelium-derived+factor+enables+migration%2C+invasion+and+metastatic+spread+of+human+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Loss of pigment epithelium-derived factor enables migration, invasion and metastatic spread of human melanoma.</a> Oncogene. 28 (47), 4147-4161 (2009).</li>
<li>Ladhani, O., Sanchez-Martinez, C., Orgaz, J. L., Jimenez, B., Volpert, O. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pigment+epithelium-derived+factor+blocks+tumor+extravasation+by+suppressing+amoeboid+morphology+and+mesenchymal+proteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Pigment epithelium-derived factor blocks tumor extravasation by suppressing amoeboid morphology and mesenchymal proteolysis.</a> Neoplasia. 13 (7), 633-642 (2011).</li>
<li>Ju, R. J., Stehbens, S. J., Haass, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+melanoma+cell-stroma+interaction+in+cell+motility%2C+invasion%2C+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Medicine+-+Dermatology%22%5BJournal%5D)">The role of melanoma cell-stroma interaction in cell motility, invasion, and metastasis.</a> Frontiers in Medicine - Dermatology. 5, 307(2018).</li>
<li>Wiley, H. E., Gonzalez, E. B., Maki, W., Wu, M. T., Hwang, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+CC+chemokine+receptor-7+and+regional+lymph+node+metastasis+of+B16+murine+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+National+Cancer+Institute%22%5BJournal%5D)">Expression of CC chemokine receptor-7 and regional lymph node metastasis of B16 murine melanoma.</a> Journal of the National Cancer Institute. 93 (21), 1638-1643 (2001).</li>
<li>Meier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+pathways+and+time+courses+in+the+orderly+progression+of+cutaneous+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Metastatic pathways and time courses in the orderly progression of cutaneous melanoma.</a> British Journal of Dermatology. 147 (1), 62-70 (2002).</li>
<li>Turner, N., Ware, O., Bosenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+metastasis%3A+melanoma+and+other+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+%26+Experimental+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Genetics of metastasis: melanoma and other cancers.</a> Clinical & Experimental Metastasis. 35 (5-6), 379-391 (2018).</li>
<li>Ubellacker, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+protects+metastasizing+melanoma+cells+from+ferroptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Lymph protects metastasizing melanoma cells from ferroptosis.</a> Nature. 585 (7823), 113-118 (2020).</li>
<li>Cukierman, E., Pankov, R., Stevens, D. R., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taking+cell-matrix+adhesions+to+the+third+dimension%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Taking cell-matrix adhesions to the third dimension.</a> Science. 294 (5547), 1708-1712 (2001).</li>
<li>Cunningham, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin-binding+protein+requirement+for+cortical+stability+and+efficient+locomotion%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Actin-binding protein requirement for cortical stability and efficient locomotion.</a> Science. 255 (5042), 325-327 (1992).</li>
<li>Unger, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+human+carcinomas%3A+physiologically+relevant+3D+models+to+improve+anti-cancer+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Modeling human carcinomas: physiologically relevant 3D models to improve anti-cancer drug development.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 79-80, 50-67 (2014).</li>
<li>Fong, E. L., Harrington, D. A., Farach-Carson, M. C., Yu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heralding+a+new+paradigm+in+3D+tumor+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Heralding a new paradigm in 3D tumor modeling.</a> Biomaterials. 108, 197-213 (2016).</li>
<li>Nakamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+mouse+melanoma+cell+lines+by+their+mortal+malignancy+using+an+experimental+metastatic+model%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Science%22%5BJournal%5D)">Characterization of mouse melanoma cell lines by their mortal malignancy using an experimental metastatic model.</a> Life Science. 70 (7), 791-798 (2002).</li>
<li>Meeth, K., Wang, J. X., Micevic, G., Damsky, W., Bosenberg, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+YUMM+lines%3A+a+series+of+congenic+mouse+melanoma+cell+lines+with+defined+genetic+alterations%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">The YUMM lines: a series of congenic mouse melanoma cell lines with defined genetic alterations.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 29 (5), 590-597 (2016).</li>
<li>Koya, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BRAF+inhibitor+vemurafenib+improves+the+antitumor+activity+of+adoptive+cell+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">BRAF inhibitor vemurafenib improves the antitumor activity of adoptive cell immunotherapy.</a> Cancer Research. 72 (16), 3928-3937 (2012).</li>
<li>Jenkins, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+murine+BRaf%28V600E%29+melanoma+cell+lines+with+sensitivity+to+PLX4032%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Multiple murine BRaf(V600E) melanoma cell lines with sensitivity to PLX4032.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 27 (3), 495-501 (2014).</li>
<li>Tuncer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SMAD+signaling+promotes+melanoma+metastasis+independently+of+phenotype+switching%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">SMAD signaling promotes melanoma metastasis independently of phenotype switching.</a> The Journal of Clinical Investigation. 129 (7), 2702-2716 (2019).</li>
<li>Schwartz, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incipient+Melanoma+Brain+Metastases+Instigate+Astrogliosis+and+Neuroinflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Incipient Melanoma Brain Metastases Instigate Astrogliosis and Neuroinflammation.</a> Cancer Research. 76 (15), 4359-4371 (2016).</li>
<li>Perez-Guijarro, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodel+preclinical+platform+predicts+clinical+response+of+melanoma+to+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Multimodel preclinical platform predicts clinical response of melanoma to immunotherapy.</a> Nature Medicine. 26 (5), 781-791 (2020).</li>
<li>Krepler, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Comprehensive+Patient-Derived+Xenograft+Collection+Representing+the+Heterogeneity+of+Melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">A Comprehensive Patient-Derived Xenograft Collection Representing the Heterogeneity of Melanoma.</a> Cell Reports. 21 (7), 1953-1967 (2017).</li>
<li>Agrawal, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systems+biology+approach+identifies+FUT8+as+a+driver+of+melanoma+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A systems biology approach identifies FUT8 as a driver of melanoma metastasis.</a> Cell. 31 (6), 804-819 (2017).</li>
<li>Hanniford, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+silencing+of+CDR1as+drives+IGF2BP3-mediated+melanoma+invasion+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Epigenetic silencing of CDR1as drives IGF2BP3-mediated melanoma invasion and metastasis.</a> Cancer Cell. 37 (1), 55-70 (2020).</li>
<li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PRMT5+control+of+cGAS%2FSTING+and+NLRC5+pathways+defines+melanoma+response+to+antitumor+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">PRMT5 control of cGAS/STING and NLRC5 pathways defines melanoma response to antitumor immunity.</a> Science Translational Medicine. 12 (551), (2020).</li>
<li>de Miera, E. V., Friedman, E. B., Greenwald, H. S., Perle, M. A., Osman, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+five+new+melanoma+low+passage+cell+lines+representing+the+clinical+and+genetic+profile+of+their+tumors+of+origin%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Development of five new melanoma low passage cell lines representing the clinical and genetic profile of their tumors of origin.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 25 (3), 395-397 (2012).</li>
<li>Morsi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+a+clinically+relevant+mouse+model+of+melanoma+brain+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of a clinically relevant mouse model of melanoma brain metastasis.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 26 (5), 743-745 (2013).</li>
<li>Huynh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+in+vivo+microRNA+targeting+of+liver+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Efficient in vivo microRNA targeting of liver metastasis.</a> Oncogene. 30 (12), 1481-1488 (2011).</li>
<li>Zou, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+variables+that+affect+human+hepatocyte+AAV+transduction+in+liver+chimeric+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy+Methods+and+Clinical+Development%22%5BJournal%5D)">Experimental variables that affect human hepatocyte AAV transduction in liver chimeric mice.</a> Molecular Therapy Methods and Clinical Development. 18, 189-198 (2020).</li>
<li>Kleffman, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melanoma-secreted+Amyloid+Beta+Suppresses+Neuroinflammation+and+Promotes+Brain+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Melanoma-secreted Amyloid Beta Suppresses Neuroinflammation and Promotes Brain Metastasis.</a> bioRxiv. , 854885(2019).</li>
<li>Curtis, A., Calabro, K., Galarneau, J. R., Bigio, I. J., Krucker, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+variations+of+skin+pigmentation+in+C57BL%2F6+mice+affect+optical+bioluminescence+quantitation%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Temporal variations of skin pigmentation in C57BL/6 mice affect optical bioluminescence quantitation.</a> Molecular Imaging and Biology. 13 (6), 1114-1123 (2011).</li>
<li>Sil, P., Wong, S. W., Martinez, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+than+skin+deep%3A+autophagy+is+vital+for+skin+barrier+function%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">More than skin deep: autophagy is vital for skin barrier function.</a> Frontiers in Immunology. 9, 1376(2018).</li>
<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+CRISPR+screen+in+a+mouse+model+of+tumor+growth+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Genome-wide CRISPR screen in a mouse model of tumor growth and metastasis.</a> Cell. 160 (6), 1246-1260 (2015).</li>
<li>Hart, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+CRISPR+screens+reveal+fitness+genes+and+genotype-specific+cancer+liabilities%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">High-resolution CRISPR screens reveal fitness genes and genotype-specific cancer liabilities.</a> Cell. 163 (6), 1515-1526 (2015).</li>
<li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+essential+genes+in+the+human+genome%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of essential genes in the human genome.</a> Science. 350 (6264), 1096-1101 (2015).</li>
<li>Edgar, R., Domrachev, M., Lash, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+Expression+Omnibus%3A+NCBI+gene+expression+and+hybridization+array+data+repository%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Research%22%5BJournal%5D)">Gene Expression Omnibus: NCBI gene expression and hybridization array data repository.</a> Nucleic Acids Research. 30 (1), 207-210 (2002).</li>
<li>Lappalainen, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+European+Genome-phenome+Archive+of+human+data+consented+for+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Genetics%22%5BJournal%5D)">The European Genome-phenome Archive of human data consented for biomedical research.</a> Nature Genetics. 47 (7), 692-695 (2015).</li>
<li>Cerami, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cBio+cancer+genomics+portal%3A+an+open+platform+for+exploring+multidimensional+cancer+genomics+data%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">The cBio cancer genomics portal: an open platform for exploring multidimensional cancer genomics data.</a> Cancer Discovery. 2 (5), 401-404 (2012).</li>
<li>Grossman, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+a+shared+vision+for+cancer+genomic+data%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Toward a shared vision for cancer genomic data.</a> New England Journal of Medicine. 375 (12), 1109-1112 (2016).</li>
</ol>

저자는 선언 할 이해 상충이 없습니다.

이 기술 보고서의 목적은 흑색종 전이의 잠재적 인 행위자에 대한 조사를위한 표준화 된 상하 워크 플로우를 제공하는 것입니다. 생체 내 실험은 비용이 많이 들고 시간이 많이 소요될 수 있으므로 효율성을 극대화하고 획득한 정보의 가치를 높이기 위한 전략이 가장 중요합니다.
동일한 실험 내에서 결과를 교차 검증하기 위해 보완적인 접근법을 사용하는 것이 필수적입니다. 예를 들어, NuMA 면역조직화학 염색과 BLI 둘 다 포괄적이지 않기 때문에 전이성 부담을 정량화하는 상보적인 방법이다. BLI는 생체 내에서 종양 진행을 추적하는 매우 중요하고 비침습적인 방법이지만, 이러한 데이터는 본질적으로 낮은 분해능을 가지고 있습니다. NuMA 염색은 고정 된 장기에서 전이성 부담의 세심한 분석을 가능하게합니다. 그러나 전체 조직 두께를 통한 포괄적 인 절편은 비실용적입니다. 따라서 각 기관의 샘플 만 염색 할 수 있습니다. 실제로, 저자의 경험에서, BLI 결과가...

전이성 흑색종과 관련된 높은 사망률과 전 세계적으로 흑색종의 발생률 증가와 결합 1 (2025 년까지 약 7.86 % 증가)은 새로운 치료 접근법을 요구합니다. 표적 발견의 발전은 매우 복잡한 과정인 재현 가능한 전이 모델에 달려 있습니다. 전이성 캐스케이드의 단계를 통틀어, 흑색종 세포는 면역계 회피 및 먼 조직의 식민지화를 달성하기 위해 무수한 장벽을 극복해야 한다2. 흑색종 세포의 탄력성과 적응성은 높은 유전 적 돌연변이 부담 3과 신경 볏 기원을 포함한 다양한 요인에서 발생하며, 이는 중요한 표현형 가소성 3,4,5를 부여합니다. 각 단계에서, 전사 프로그램은 전이된 흑색종 세포가 면역계(6), 세포외 환경(7,8), 및 이들이 접촉하는 물리적 장벽(9)의 세포 구조를 포함하는 미세환경과의 누화로부터의 단서에 기초하여 한 상태에서 다른 상태로 전환하도록 허용한다. 예를 들어, 흑색종 세포는 중요한 면역프라이밍 종양-분비 인자6의 발현을 하향조절함으로써 면역 감시를 탈출한다.
연구는 흑색종 세포가 전이를 위해 먼 "표적"기관을 프라이밍하기 위해 케모카인과 사이토카인을 분비하는 "전이성 틈새 시장"을 기술합니다10. 이러한 발견은 전이성 흑색종 세포의 장기 기증과 먼 조직에 접근하기 위해 취하는 해부학 적 경로에 대한 중요한 질문을 제기합니다. 혈관 내 후, 흑색종 세포는 림프학(림프성 확산) 및 혈관(hematogenous spread)2,11을 통해 전이되는 것으로 알려져 있다. 대부분의 환자들이 국소화된 질환을 앓고 있는 반면, 소수의 사례들은 먼 전이성 질환과 림프 전파(음성 림프절 침범)11를 나타내지 않으며, 이는 흑색종에 대한 대안적인 전이성 경로의 존재를 시사한다.
그들이 전이성 부위를 식민지화할 때, 흑색종 세포는 후성유전학적 및 대사적 적응을 겪는다12,13. 새로운 구획에 접근하고 침범하기 위해, 흑색종 세포는 프로테아제 14 및 세포골격 변형11,15를 이용하여, 이들이 그들의 새로운 위치로 횡단하고 성장할 수 있게 한다. 흑색종 세포를 표적화하는 어려움은 그러한 적응의 복잡성과 수에 상주한다; 따라서 이 분야는 가능한 한 많은 단계와 적응을 실험적으로 재현하기 위해 노력해야 한다. 오가노이드 및 3D 배양물(16,17)과 같은 시험관내 분석에서의 수많은 진보에도 불구하고, 이들 모델은 단지 생체내 전이성 캐스케이드를 불완전하게 재분석한다.
뮤린 모델은 재현성, 기술적 타당성 및 인간 질병의 시뮬레이션 사이의 균형을 유지함으로써 가치를 보여주었습니다. 혈관내, 직교적 및 이종국적으로 이식된 흑색종 세포는 환자 유래 이종이식편 또는 단기 배양물로부터 면역-손상 또는 인간화 마우스로 전이성 흑색종에서 표적 발견의 중추를 나타낸다. 그러나 이러한 시스템은 종종 전이에 대한 중요한 생물학적 제약 조건, 즉 면역 체계가 부족합니다. 이 제약을 가진 합성 흑색종 전이 모델은 현장에서 상대적으로 부족합니다. 이들 시스템은, B16-F10 18, YUMM 패밀리 세포주19, SM1 20, D4M3 21, RIM322 또는 보다 최근에, RMS 23 및M1 (Mel114433),M3 (HCmel1274), M4 (B2905)24 흑색종 세포주를 포함하는 면역적격 마우스에서 개발되어, 흑색종 진행에서 숙주 면역 반응의 복잡한 역할의 조사를 용이하게 한다.
여기서, 흑색종 전이 표적 식별을 위한 파이프라인이 제시된다. 흑색종 환자 코호트에서 점점 더 큰 'omics'데이터 세트가 생성됨에 따라, 우리는 가장 임상 적 약속을 지키고있는 연구가 빅 데이터 통합에서 비롯된 연구이며 세심한 기능 및 기계론적 심문25,26,27,28로 이어진다고 가정합니다. 마우스 모델을 사용하여 전이성 과정에서 잠재적 표적을 연구함으로써, 생체내 특이적 사건 및 조직 상호작용을 설명할 수 있고, 따라서 임상 번역의 확률을 증가시킬 수 있다. 전이성 부담을 정량화하는 여러 가지 방법이 요약되어 주어진 실험 결과에 대한 보완적인 데이터를 제공합니다. 다양한 기관에서 종양으로부터 단리하기 위한 프로토콜이 단일 세포 또는 벌크 RNA 시퀀싱에 선행할 수 있는 전이성 세포에서 유전자 발현의 편향되지 않은 특성화를 돕기 위해 기술된다.

<table><tbody><tr><td>#15 스케이프 블레이드&nbsp;</td><td>WPI</td><td>500242</td><td>수술 절차</td></tr><tr><td>#3 Scapel 핸들</td><td>WPI</td><td>500236</td><td>수술 절차용</td></tr><tr><td>1 mL 투베르큘린 주사기, 슬립 팁&nbsp;</td><td>BD</td><td>309626</td><td>주입</td></tr><tr><td>10 mL 주사기, 슬립 팁&nbsp;</td><td>BD</td><td>301029</td><td>관류</td></tr><tr><td>10% 포르말린 나트륨 버퍼</td><td>EK 산업</td><td>4499-20L</td><td>관류/조직 고정제</td></tr><tr><td>15 mL 원뿔</td>형 <td>코닝용&nbsp;</td><td>430052</td><td>세포 배양</td></tr><tr><td>15 mL 원뿔형 폴리 프로필렌 원심 분리기 튜브</td><td>Falcon</td><td>352196</td><td>세포 배양</td></tr><tr><td>200 증거 에탄올</td><td>Deacon Labs</td><td>04-355-223</td><td>조직학</td></tr><tr><td>22G &ndash; 22mm 바늘</td><td>BD</td><td>305156</td><td>관류</td></tr><tr><td>4-0 Vicryl 봉합</td>사 <td>Ethicon</td><td>J464G</td><td>봉합사</td></tr><tr><td>4 % Carson의 인산염 완충 파라포름알데히드&nbsp;</td><td>EMS</td><td>15733-10</td><td>관류/조직 고정제</td></tr><tr><td>40&micro를 위해; m</td><td>Corning</td><td>431750</td><td>조직 처리</td></tr><tr><td>5-0 흡수성 봉합사&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>6542000</td><td>클로저</td></tr><tr><td>50 mL 원추형&nbsp;</td><td>코닝&nbsp;</td><td>430828</td><td>세포 배양</td></tr><tr><td>50mL 원뿔형 폴리프로필렌 원심분리기 튜브</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td>세포 배양</td></tr><tr><td>7-0 실크 봉합사&nbsp;</td><td>FST</td><td>18020-70</td><td>합자</td></tr><tr><td>70&마이크로; m</td><td>Corning</td><td>431751</td><td>조직 처리</td></tr><tr><td>페이드 방지 마운팅 미디어&nbsp; &nbsp;</td><td>Vector Labs</td><td>H-1000-10</td><td>면역형광</td></tr><tr><td>추정기 적용 펜치, 10cm&nbsp;</td><td>WPI</td><td>14189</td><td>미세수술 절차용</td></tr><tr><td>Avance</td><td>Bruker</td><td>3 HD</td><td>NMR 콘솔&nbsp;</td></tr><tr><td>바이오스펙 7030&nbsp;</td><td>Bruker</td><td>7030</td><td>마이크로 MRI</td></tr><tr><td>BSA</td><td>Bioreg</td><td>A941</td><td>NuMA 염색</td></tr><tr><td>Castroviejo 봉합 펑크, 직선 팁 5.5mm 타이링 플랫폼, 11cm&nbsp;</td><td>WPI</td><td>WP5025501</td><td>미세수술 절차를 위한</td></tr><tr><td>Coplin Staining Jar</td><td>Bel-Art&nbsp;</td><td>F44208-1000</td><td>조직학</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9542-1MG</td><td>면역 형광</td></tr><tr><td>dCas9-KRAB</td><td>Addgene</td><td>110820</td><td>유전자 조작</td></tr><tr><td>DNase I</td><td>NEB</td><td>M0303L</td><td>조직 처리</td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Corning</td><td>21-030-CM</td><td>조직 처리</td></tr><tr><td>매우 날카로운 코팅되지 않은 단일 가장자리 블레이드</td><td>GEM</td><td>62-0167</td><td>조직 처리</td></tr><tr><td>세포외 매트릭스 기질&nbsp;</td><td>코닝</td><td>354234</td><td>성장 요인 감소를 고려합니다(대안으로&nbsp;</td></tr><tr><td>FBS</td><td>Cytiva</td><td>SH30910.03</td><td>세포 배양</td></tr><tr><td>피지 이미지 J</td><td>피지 이미지 J</td><td>소프트웨어</td><td>면역형광</td></tr><tr><td>염소 항토끼 HRP 결합 멀티머&nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td>A16104</td><td>NuMA 염색</td></tr><tr><td>염소 세럼</td><td>Gibco</td><td>PCN5000</td><td>면역형광</td></tr><tr><td>HBSS</td><td>Corning</td><td>21-020-CV</td><td>조직 처리</td></tr><tr><td>Hematoxylin&nbsp;</td><td>리처드-앨런 사이언티픽&nbsp;</td><td>7231</td><td>조직학</td></tr><tr><td>일루미나 III&nbsp;</td><td>PerkinElmer</td><td>CLS136334</td><td>BLI 기기</td></tr><tr><td>인슐린 주사기 28G - 8mm 바늘</td><td>BD</td><td>329424</td><td>주사</td></tr><tr><td>인슐린 주사기 31G - 6mm 바늘&nbsp;</td><td>BD</td><td>326730</td><td>주입</td></tr><tr><td>홍채 집게, 10.2cm, 전체 곡선, 톱니 모양의</td><td>WPI</td><td>504478</td><td>관류 및 수술 절차</td></tr><tr><td>Isoflurane USP</td><td>Covetrus</td><td>11695067772</td><td>Anesthesia</td></tr><tr><td>Jewelers # 7 집게 티타늄 11cm 0.07 x 0.01 mm 팁</td><td></td><td>WPI WP6570</td><td>미세 수술 절차</td></tr><tr><td>Ketamine HCl 100mg / mL</td><td>Mylan Ind.</td><td>1049007</td><td>마취</td></tr><tr><td>lentiCRISPRv2</td><td>Addgene</td><td>98290</td><td>유전자 조작</td></tr><tr><td>Lycopersicon Esculentum (토마토) Lectin, DyLight 649</td><td>Invitrogen</td><td>L32472</td><td>혈관 내피 세포 마커</td></tr><tr><td>MEM 비 필수 아미노산 X 100</td><td>Corning</td><td>25-025-CI</td><td>세포 배양</td></tr><tr><td>Metzenbaum 가위</td><td>WPI</td><td>503269</td><td>외과 용 절차</td></tr><tr><td>Microinjection Unit</td><td>KOPF</td><td>5000</td><td>심장 내 주사</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Fisher</td><td>S25877&nbsp;</td><td>NuMA 염색</td></tr><tr><td>바늘 30G x 25mm</td><td>BD</td><td>305128</td><td>심장 주사</td></tr><tr><td>바늘 33G x 15mm</td><td>Hamilton</td><td>7747-01</td><td>경동맥 주사</td></tr><tr><td>바늘 홀더, Castroviejo, 14cm, 잠금 장치 포함, 1.2mm 톱니 턱</td><td>WPI</td><td>14137-G</td><td>미세 수술 절차</td></tr><tr><td>NOD. Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ 마우스</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>005557</td><td>Murine model</td></tr><tr><td>NU/J 마우스</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>002019</td><td>Murine 모델</td></tr><tr><td>핵 유사분열 장치 단백질 다클론 토끼 반인간&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>97585</td><td>NuMA 염색</td></tr><tr><td>페니실린-스트렙토마이신 10000U/mL</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td>세포 배양</td></tr><tr><td>Percoll</td><td>GE</td><td>0891-01</td><td>밀도 분리 용액&nbsp;</td></tr><tr><td>PI Classic Surgical Gloves</td><td>Cardinal Health</td><td>2D72PT75X</td><td>Surgery</td></tr><tr><td>pLKO Tet-On</td><td>Addgene</td><td>21915</td><td>유전자 조작</td></tr><tr><td>포비돈-요오드 10% 용액</td><td>Medline</td><td>MDS093943</td><td>Surgery</td></tr><tr><td>Proparacaine 방울 0.5%</td><td>Akorn Pharma</td><td>AX0501</td><td>안과 국소 마취제</td></tr><tr><td>Puralube Petrolatum Opthalmic Ointment</td><td>Dechra</td><td>83592</td><td>마취</td></tr><tr><td>면도날 더블 엣지 블레이드&nbsp;</td><td>EMS</td><td>72000</td><td>면도 및 진동 브레인 슬라이싱&nbsp;</td></tr><tr><td>Reflex 9mm EZ 클립&nbsp;</td><td>브레인트리</td><td>EZC-&nbsp; KIT</td><td>상처 클로저</td></tr><tr><td>RPMI 1640&nbsp;</td><td>Corning</td><td>10-040-CM</td><td>세포 배양</td></tr><tr><td>가위, 스프링 10.5cm Str, 8mm 블레이드</td><td>WPI</td><td>501235</td><td>미세 수술 절차용</td></tr><tr><td>반자동 진동 블레이드 마이크로톰</td><td>Leica</td><td>VT1200</td><td>Brain Slice 면역형광</td></tr><tr><td>단일 채널 마취 기화기 시스템</td><td>Kent Scientific</td><td>VetFlo-1210S&nbsp;</td><td>마취</td></tr><tr><td>Smartbox 탁상용 챔버 시스템 및 배기 블로워</td><td>EZ 시스템</td><td>TT4000</td><td>CO2 안락사</td></tr><tr><td>멸균 창포 일회용 드레이프</td><td></td><td>Medline NON21002</td><td>수술</td></tr><tr><td>스테임 비강화 오로라 수술 가운 세트인 슬리브</td><td>Medline</td><td>DYNJP2715</td><td>수술</td></tr><tr><td>T25 플라스크</td><td>코닝&nbsp;</td><td>430639</td><td>세포 배양</td></tr><tr><td>Tris</td><td>Corning</td><td>46-031-CM</td><td>NuMA 염색</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100-500ML</td><td>면역 형광</td></tr><tr><td>Troutman 묶는 집게, 10cm, 곡선 G 패턴, 묶는 플랫폼이있는 0.52mm 팁</td><td>WPI</td><td>WP505210</td><td>미세 수술 절차 용</td></tr><tr><td>용기 클립 10G 압력 5x 0.8mm 턱, 5 / pkg</td><td>WPI</td><td>15911</td><td>용 미세 수술 절차</td></tr><tr><td>Visiopharm</td><td>Visiopharm</td><td>Visiopharm</td><td>NuMA 염색 정량 소프트웨어</td></tr><tr><td>Xylasine 100mg/mL</td><td>Akorn Pharma</td><td>59399-111-50</td><td>마취</td></tr><tr><td>Xylene</td><td>Fisher</td><td>X3P-1GAL</td><td>조직학</td></tr></tbody></table>

흑색종 전이의 새로운 중재자 식별을 위한 강력한 발견 플랫폼

A Robust Discovery Platform for the Identification of Novel Mediators of Melanoma Metastasis

전이는 복잡한 과정으로, 세포가 시험관내 분석에 의해서만 불완전하게 모델링되는 장벽을 극복해야 합니다. 강력하고 재현 가능한 생체 내 모델과 흑색종 전이에서 새로운 선수를 식별하기위한 표준화 된 방법을 사용하여 체계적인 워크 플로우가 수립되었습니다. 이 접근법은 특정 실험 단계에서 데이터 추론을 허용하여 전이에서 유전자의 역할을 정확하게 특성화합니다. 모델은 마우스에 심장내, 피내 또는 피하 주사를 통해 유전자 변형 흑색종 세포를 도입한 다음, 일련의 생체내 영상으로 모니터링함으로써 확립된다. 일단 미리 확립된 종점에 도달하면, 원발성 종양 및/또는 전이-보유 장기가 다양한 분석을 위해 수확되고 처리된다. 종양 세포를 분류하고 단일 세포 RNA 시퀀싱을 포함한 여러 'omics'플랫폼 중 하나를 실시할 수 있습니다. 장기는 전이의 전반적인 부담을 정량화하고 특정 해부학 적 위치를지도화하기 위해 이미징 및 면역 조직 병리학 적 분석을 거칩니다. 생착, 모니터링, 조직 수확, 처리 및 분석을 위한 표준화된 프로토콜을 포함하는 이 최적화된 파이프라인은 환자 유도, 단기 배양 및 다양한 고형암 유형의 확립된 인간 및 뮤린 세포주에 채택될 수 있다.

다음 그림은 흑색종 전이의 새로운 동인을 식별하기 위해 설명 된 워크 플로가 어떻게 적용되었는지 보여줍니다. 도 2 는 생체내 흑색종 전이에서 푸코실트랜스퍼라제 FUT8을 침묵시키는 효과가 연구되었던 공개된 연구의 결과를 요약한 것이다(26). 간략하게, 인간 환자 글리코믹 데이터(렉틴 어레이에 의해 얻어짐) 및 전사 프로파일링의 분석은 1차 흑색종에서 전이성 흑색종으로의 진행과 관련된 알파-1,6-푸코스의 증가된 수준을 밝혀냈으며, 상응하는 푸코실트랜스퍼라제(FUT8)의 증가와 일치한다.
FUT8 shRNA 또는 상응하는 비표적화 대조군(shNTC)을 운반하는 렌티바이러스로 형질도입된 113/6-4L 흑색종 세포를 상기 기술된 바와 같이 면역결핍 마우스(NSG)에 초음파 유도 심장 내 주사에 의해 도입하였다(섹션 2.9). 마우스를 생체내 BLI에 의...

이 기사는 흑색종 전이의 새로운 후보 매개체와 그 작용 메커니즘을 테스트하는 데 사용되는 기술의 워크 플로우에 대해 설명합니다.

Metastasis is a complex process, requiring cells to overcome barriers that are only incompletely modeled by in vitro assays. A systematic workflow was ...

이 프로토콜은 흑색종 전이의 후보 조절자의 생체 내 효과를 평가하는 데 사용할 수있는 연속 워크 플로 내의 일련의 기술뿐만 아니라 다른 고형 악성 종양의 전이를 설명합니다. 우리의 체계적인 워크 플로우의 가장 큰 장점은 강력하고 표준화 된 생체 내 모델 및 기술로 인해 데이터의 재현성이 증가한다는 것입니다. 이 파이프라인은 생체 내 환경에서 Omics 데이터 또는 시험관내 분석으로부터 추론된 후보물질을 시험함으로써 표적 발견 및 치료 개발을 위한 경로를 제공한다.이 프로토콜에 제시된 기술과 관련된 학습 곡선은 제공된 자료를 사용하고 단계를 연습 할 때 자세한 설명을 수행함으로써 단축됩니다. 이 절차를 시연하는 데 도움이되는 것은 전임상 이미징 코어의 연구 과학자 인 Orlando Aristizabal과 내 실험실의 강사 인 Ran Moubarak입니다. 피내 주사의 경우, 무균 상태를 유지하면서 생물 안전 캐비닛 안에 여덟 ~ 10 주령의 마우스를 마취시키고 면도하십시오.그런 다음 바늘 찌르기의 궤적에 대해 피부를 뒤로 잡고 수축시키고 6 밀리미터 길이의 31 게이지 인슐린 주사기 바늘을 사용하여 베벨이 위쪽을 향하게하여 급성 각도로 피부를 부드럽게 뚫습니다. 돔 모양의 바퀴가 관찰 될 때까지 종양 세포 현탁액 30 마이크로 리터를 천천히 주입하십시오. 종양 성장, 체중 감소 및 전반적인 건강 상태의 진행을 모니터링합니다.이러한 모니터링 세션 중에 캘리퍼로 측정하고 종양의 길이와 너비 치수를 사용하여 부피를 계산하십시오. 심장 내 주사의 경우, 마취 된 마우스를 초음파 기계의 가열 된 플랫폼으로 옮깁니다. 그런 다음 저자 극성 테이프를 사용하여 마우스를 코 원뿔에 고정시킵니다.직선 면도날 또는 메스 블레이드로 흉부를 면도하고 30도 각도로 기울어 10 % 포비돈 요오드로 절차 영역 주위의 피부를 닦으십시오. 그 후, 마우스 좌측의 흉부 중앙에 초음파 프로브를 위치시켜 배향된 수평 창을 캡처하여 좌심실의 단면도를 얻었다. 프로브의 긴 축을 위쪽으로 향하게 하여 프로브를 50도 각도로 고정하고 가열된 플랫폼을 20도 각도로 고정한 다음 프로브와 지지 프레임을 제자리에 고정합니다.안전 캐비닛 내부에서 작업하는 동안 30 게이지 한 인치 바늘이있는 투베르쿨린 한 밀리리터 주사기에 세포 현탁액을 그립니다. 주사기에 존재하는 기포를 제거하십시오. 스테레오택틱 인젝터에 주사기를 잠급니다.그런 다음 초음파 지침에 따라 흉부를

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Research

연구

JoVE Journal

Cancer Research

암 연구

이 문서는 인간의 암 세포 라인의 전이성 잠재력을 결정하는 데 사용되는 실험적인 전이 분석의 절차를 설명합니다.

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이 비디오는 대장암 환자 유래 이종이식편(PDX)의 자연 전이 마우스 모델을 확립하기 위한 프로토콜을 설명합니다. 이러한 이종이식 모델은 인간 암종의 특징을 부분적으로 모방하고 침입 및 전이를 포함한 인간 악성 종양의 중요한 측면을 이해합니다.

자발적 전이 마우스 모델: 정소적으로 주입된 대장암 세포의 전이 가능성을 연구하는 플랫폼

이 비디오에서는 마우스 모델의 꼬리 정맥을 통해 흑색종 세포를 정맥 주사합니다. 흑색종 세포는 순환계를 통해 더 멀리 이동하면서 멀리 떨어진 미세환경에 적응하고 폐와 같은 장기에 전이를 일으킵니다.

실험적 전이성 흑색종 마우스 모델: 폐 내 흑색종 세포의 전이 가능성을 연구하기 위한 플랫폼

이 프로토콜은 난소 절치와 나팔관 암 세포를 공동 배양하여 검체 준비 기술을 설명합니다. 이러한 샘플은 이미징 질량 분광법(IMS)을 사용하여 시각화하여 종양 발생으로 이어지는 세포와 조직 간의 소분자 교환을 감지합니다.

이미징 질량 분석 분석을 위한 난소암 커뮤니케이션 모델링: 전이성 난소 종양 발달에서 소분자 화학 전달자를 식별하는 방법

전이는 암의 독성에 지대한 영향을 미치며 사망의 약 90%를 차지합니다.  우리는 이 임상 현상에 대한 치료제의 효능을 결정하는 데 유용한 마우스의 전이성 흑색종 모델에 대한 프로토콜을 보고합니다.

동계 쥐 흑색 종 세포의 주입은 폐에서 그들의 전이성 잠재력을 확인하는 방법

여기, 우리이 두 아키텍처는 3D organotypic 흑색 종 회전 타원 체 피부 모델을 생성 하는 프로토콜을 제시 하 고 다세포 복잡 한 기관/종양에 vivo에 의 하지만 같은 시간에 수용 체계적인 실험 내정간섭입니다.

3D Organotypic 흑색 종 회전 타원 체 피부 모델

우리는 암 환자에서 플라즈마 샘플에 예측에 관한 (miRNAs) 순환의 식 수준을 평가 하는 프로토콜을 제시. 특히, 우리는 순환 미르 추출 및 반전 녹음 방송에 대 한 상용 키트를 사용 합니다. 마지막으로, 우리는 실시간으로 미리 발견된 프로브 사용자 지정 접시를 사용 하 여 24 선택한 miRNAs의 패널 분석.

전이성 대 장 암 환자에서 순환 예측에 관한 사용자 정의 패널의 검출

면역 요법 및 단일 세포 게놈 프로파일링 시대에 암 생물학은 적절한 시공간 맥락에서 종양-면역 인터페이스를 조사하기 위한 새로운 시험관 내 및 전산 도구를 필요로 합니다. 우리는 2D 및 3D 설정에서 종양 면역 미세유체 공동 배양을 활용하기 위한 프로토콜을 설명하며, 세포 기능의 동적 다중 매개변수 모니터링과 호환됩니다.

in vitro 종양 미세환경에서 면역 반응을 해부하기 위한 미세유체 공동 배양 모델

이것은 암 전이의 억제제 또는 드라이버를 위해 검열하는 효과적인 방법입니다. 발현 라이브러리로 변환된 세포는 전이성 콜로니를 형성하기 위해 닭 초리오알란토아막 혈관에 주입됩니다. 감소 또는 증가 된 침략을 갖는 식민지는 절제, 확장, 자신의 표현형을 확인하기 위해 재주입, 마지막으로, 높은 처리량 시퀀싱을 사용하여 분석.

신속하고 정량적인 병아리 Chorioallantoic 멤브레인 모델을 사용하여 전이성 레귤레이터의 발견

흑색 종은 다른 장기로 빠르게 퍼지는 매우 공격적인 질병입니다. 이 프로토콜은 전이성 흑색종의 Braf/Pten 마우스 모델에서 사타구니 림프절의 부피를 모니터링하기 위해 3D 렌더링과 결합된 초고주파 초음파 이미징의 적용을 설명합니다.

흑색종의 Braf/Pten 유전자 조작 마우스 모델에서 초고주파 초음파 이미징에 의한 림프절 부피 분석

여기에서는 신선한 흑색종 조직에서 분리된 세포 현탁액을 배양하여 흑색종 환자 유래 오가노이드를 생성하는 프로토콜을 제시합니다. 이러한 오가노이드는 in vitro 에서 환자 특이적 종양을 충실하게 재현하여 종양 면역억제 메커니즘, 약물 스크리닝, 약물 내성 메커니즘 및 암 감시 접근법을 탐구하기 위한 혁신적인 접근 방식을 제공합니다.

흑색종 환자 유래 오가노이드 모델을 통한 치료 기회 발굴

발견하세요 흑색종 전이 매개체를 평가하는 강력한 생체 내 워크플로우를 통해 재현성 높은 연구 방법론을 습득하세요. 이 표준화된 기술은 표적 발굴과 치료제 개발에 활용됩니다.

흑색종 전이의 새로운 중재자 식별을 위한 강력한 발견 플랫폼

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