Robust Differentiation of Human iPSCs into a Pure Population of Adipocytes to Study Adipocyte-Associated Disorders

Maryam Aghadi; Manale Karam; Essam M. Abdelalim

doi:10.3791/63311

지방 세포 관련 장애를 연구하기 위해 인간 iPSC를 순수한 지방 세포 집단으로 강력하게 분화

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Developmental Biology

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Robust Differentiation of Human iPSCs into a Pure Population of Adipocytes to Study Adipocyte-Associated Disorders

지방 세포 관련 장애를 연구하기 위해 인간 iPSC를 순수한 지방 세포 집단으로 강력하게 분화

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10:31 min

February 9, 2022

DOI: 10.3791/63311-v

Maryam Aghadi^1,2, Manale Karam¹, Essam M. Abdelalim^1,2

¹Diabetes Research Center, Qatar Biomedical Research Institute (QBRI),Hamad Bin Khalifa University (HBKU), Qatar Foundation (QF), ²College of Health and Life Sciences,Hamad Bin Khalifa University (HBKU), Qatar Foundation

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 프로토콜은 유도 만능 줄기 세포(iPSC)로부터 순수한 지방세포 집단의 생성을 허용합니다. 레티노산은 iPSC를 지방세포 생성에 사용되는 중간엽 줄기세포(MSC)로 분화시키는 데 사용됩니다. 그런 다음 나일 레드 염색을 기반으로 한 분류 접근법을 사용하여 순수한 지방 세포를 얻습니다.

종래의 접근법은 시험관 내에서 중간엽 줄기세포를 얻기 위해 매우 침습적인 방법에 의존하였으나, 이러한 중간엽 줄기세포는 30%에서 60% 범위의 효율로 30%의 이질적인 풀을 생산하는 데 한계가 있었다. iPSC가 80% 합류에 도달하면 DPBS로 세포를 세척하고 EDTA가 포함된 해리 배지를 추가합니다. 섭씨 37도에서 1분 동안 세포를 배양합니다.

1분 후, 해리 시약을 흡인하고 세포를 섭씨 37도에서 추가로 1분 동안 놓습니다. 그런 다음 인큐베이터에서 플레이트를 꺼냅니다. 웰당 1밀리리터의 StemFlex 배지를 추가하고 15밀리리터의 원뿔형 튜브에 세포를 조심스럽게 수집합니다.

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