Name: 식물 뿌리를 토양 매개 미생물로 감염시키는 접종 전략 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-01T13:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 16 s
Description: 배우세요 식물 뿌리에 토양 미생물을 접종하는 세 가지 방법을. Verticillium과 Arabidopsis를 사용하여 뿌리-미생물 상호작용을 분자 및 세포 수준에서 연구하는 기술을 익히세요.

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저자들은 Tim Iven과 Jaqueline Komorek이 이러한 방법에 대한 이전 연구, 볼프강 Dröge-Laser (독일 뷔르츠부르크 대학 제약 생물학과)가이 작업에 필요한 장비와 자원을 제공했으며, Wolfgang Dröge-Laser와 Philipp Kreisz (뷔르츠부르크 대학 모두)가 원고의 비판적 교정을 위해 인정합니다. 이 연구는 "Deutsche Forschungsgemeinschaft"(DFG, DR273/15-1,2)에 의해 뒷받침되었다.

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<li>Zhou, L., Hu, Q., Johansson, A., Dixelius, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Verticillium+longisporum+and+V.+dahliae%3A+infection+and+disease+in+Brassica+napus%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Pathology%22%5BJournal%5D)">Verticillium longisporum and V. dahliae: infection and disease in Brassica napus.</a> Plant Pathology. 55 (1), 137-144 (2006).</li>
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<li>Reusche, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stabilization+of+cytokinin+levels+enhances+Arabidopsis+resistance+against+Verticillium+longisporum%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Plant-Microbe+Interactions%22%5BJournal%5D)">Stabilization of cytokinin levels enhances Arabidopsis resistance against Verticillium longisporum.</a> Molecular Plant-Microbe Interactions. 26 (8), 850-860 (2013).</li>
<li>Iven, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+activation+and+production+of+tryptophan-derived+secondary+metabolites+in+Arabidopsis+roots+contributes+to+the+defense+against+the+fungal+vascular+pathogen+Verticillium+longisporum%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Plant%22%5BJournal%5D)">Transcriptional activation and production of tryptophan-derived secondary metabolites in Arabidopsis roots contributes to the defense against the fungal vascular pathogen Verticillium longisporum.</a> Molecular Plant. 5 (6), 1389-1402 (2012).</li>
<li>Reusche, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infections+with+the+vascular+pathogens+Verticillium+longisporum+and+Verticillium+dahliae+induce+distinct+disease+symptoms+and+differentially+affect+drought+stress+tolerance+of+Arabidopsis+thaliana%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+and+Experimental+Botany%22%5BJournal%5D)">Infections with the vascular pathogens Verticillium longisporum and Verticillium dahliae induce distinct disease symptoms and differentially affect drought stress tolerance of Arabidopsis thaliana.</a> Environmental and Experimental Botany. 108, 23-37 (2014).</li>
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</ol>

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토양 매개 식물 병원균1로 인한 엄청난 수확량 손실로 인해 농업 전략 또는 작물 품종의 개선이 필요합니다. 토양 매개 질병의 발병기전에 대한 제한된 통찰력은 더 저항력이 강한 식물의 발달을 방해합니다. 근본적인 병리학 적 메커니즘을 탐구 할 필요가 있으며, 이를 위해서는 강력한 방법론 적 플랫폼이 필요합니다. 보고된 접종 절차는 뿌리-미생물 상호작용에서의 다인자 사건이 상이한 시스템(19)을 조합함으로써 잘 해부될 수 있음을 보여주었다. 위에서 설명한 프로토콜은이 분야에 익숙하지 않은 전문가와 연구자 모두에게 일상적인 워크 플로우를 제공하기위한 것입니다. 취급이 간단하고 독립적 인 복제가 가능하며 필요한 기술 장비가 표준 식물 과학 실험실에 있습니다.
초기 Verticillium 감염 사건 (접종 후 6 dpi까지의 시간)은 페트리 접시 시스템, 토양 기반 시스템의 후기 사건 (...

자연 토양에는 식물에 중성, 유해 또는 유익 할 수있는 놀라운 수의 미생물이 서식합니다1. 많은 식물 병원균은 토양에서 태어나 뿌리를 둘러싸고 지하 기관을 공격합니다. 이 미생물은 곰팡이, oomycetes, 박테리아, 선충류, 곤충 및 일부 바이러스 1,2와 같은 다양한 클래드에 속합니다. 환경 조건이 감염을 선호하면 감염되기 쉬운 식물이 병에 걸리고 작물 수확량이 감소합니다. 지구 온난화와 극심한 날씨와 같은 기후 변화의 영향은 토양 매개 식물 병원균의 비율을 증가시킬 것입니다3. 따라서 이러한 파괴적인 미생물과 그 미생물이 식량 및 사료 생산뿐만 아니라 자연 생태계에 미치는 영향을 연구하는 것이 점점 더 중요해질 것입니다. 또한 토양에는 뿌리와 밀접하게 상호 작용하고 식물의 성장, 발달 및 면역을 촉진하는 미생물 상호 주의자가 있습니다. 병원균에 직면했을 때, 식물은 병원 균 4,5,6,7을 억제함으로써 숙주 생존을 지원할 수있는 근권의 특정 상대를 적극적으로 모집 할 수 있습니다. 그러나 유익한 뿌리 - 미생물 상호 작용과 관련된 기계론적 세부 사항 및 경로는 종종 여전히 알려지지 않았습니다6.
따라서 뿌리 - 미생물 상호 작용에 대한 일반적인 이해를 넓히는 것이 필수적입니다. 토양 매개 미생물에 뿌리를 접종하기위한 신뢰할 수있는 방법은 모델 연구를 수행하고 그 결과를 농업 응용 분야로 옮기는 데 필요합니다. 토양에서의 유익한 상호작용은 예를 들어, 세렌디피타 인디카 (이전의 피리포르모스포라 인디카로 알려짐), 질소-고정 리조븀 spp., 또는 균류 진균과 함께 연구되는 반면, 공지된 토양 매개 식물 병원체는 랄스토니아 솔라나세아럼, 피토프토호라 spp., 푸사리움 spp., 및 Verticillium spp.1을 포함한다. 후자의 두 가지는 전 세계적으로 분포되어 혈관 질환을 일으키는 곰팡이 속입니다2. Verticillium spp. (Ascomycota)는 초본 연간, 우디 다년생 식물 및 많은 작물 식물 2,8을 포함하여 주로 dicotyledons의 수백 종의 식물을 감염시킬 수 있습니다. Verticillium의 Hyphae는 뿌리에 들어가서 자일렘 혈관을 식민지화하기 위해 중앙 실린더를 향해 세포 간 및 세포 내에서 모두 성장합니다 2,9. 이 혈관에서 곰팡이는 수명주기의 대부분을 유지합니다. 자일렘 수액은 영양이 부족하고 식물 방어 화합물을 운반하기 때문에 곰팡이는이 독특한 환경에 적응해야합니다. 이는 병원체가 그의 숙주10,11에서 생존할 수 있게 하는 콜로니화 관련 단백질의 분비에 의해 달성된다. 뿌리 혈관 조직에 도달 한 후, 곰팡이는 자일렘 혈관 내에서 단풍으로 작물 적으로 퍼질 수 있으며, 이는 숙주 9,12의 전신 식민지화로 이어진다. 이 시점에서 식물은 성장 9,10,13에 부정적인 영향을받습니다. 예를 들어, 기절과 노란 잎은 조기 노화13,14,15,16뿐만 아니라 발생합니다.
이 속의 한 구성원은 Verticillium longisporum으로, 농경학적으로 중요한 유채 유채, 콜리 플라워 및 모델 식물 애기장대 탈리아나12와 같은 황동 숙주에 매우 적합합니다. 몇몇 연구는 V. longisporum과 A. thaliana를 결합하여 토양 매개 혈관 질환과 그 결과 뿌리 방어 반응13,15,16,17에 대한 광범위한 통찰력을 얻었습니다. 간단한 감수성 검사는 V. longisporum / A. thaliana 모델 시스템을 사용하여 실현 될 수 있으며 잘 확립 된 유전 자원은 두 유기체 모두에 사용할 수 있습니다. V. longisporum과 밀접한 관련이있는 병원체는 Verticillium dahliae입니다. 두 곰팡이 종 모두 비슷한 혈관 생활 양식과 침윤 과정을 수행하지만, 뿌리에서 잎으로의 전파 효율과 A. thaliana의 유발 된 질병 증상은 다릅니다 : V. longisporum은 일반적으로 조기 노화를 유도하는 반면, V. dahliae 감염은 시들음18을 초래합니다. 최근에, 방법론적 요약은 A. thaliana를 V. longisporum 또는 V. dahliae로 감염시키기 위한 상이한 뿌리 접종 전략을 제시하여, 실험 셋업19를 계획하는 데 도움을 주었다. 현장에서 V. longisporum은 때때로 유채 유채 생산12에서 심각한 손상을 일으키는 반면, V. dahliae는 포도 나무, 감자 및 토마토8과 같은 여러 재배 종으로 구성된 매우 광범위한 숙주 범위를 가지고 있습니다. 이것은 두 병원균을 경제적으로 흥미로운 모델로 연구하게합니다.
따라서, 다음의 프로토콜은 뿌리 접종을 위한 가능한 접근법을 예시하기 위해 모델 뿌리 병원체로서 V. longisporum 및 V. dahliae 둘 다를 사용한다. 애기장대 (애기장대 탈리아나), 유채 유채 (브라시카 나푸스) 및 토마토 (솔라눔 리코 페르시쿰)가 모델 호스트로 선택되었습니다. 방법론에 대한 자세한 설명은 아래 텍스트와 함께 제공되는 비디오에서 찾을 수 있습니다. 각 접종 시스템에 대한 장점과 단점이 논의됩니다. 종합하면,이 프로토콜 수집은 뿌리 - 미생물 상호 작용의 맥락에서 특정 연구 질문에 적합한 방법을 식별하는 데 도움이 될 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>Agar (Gelrite)</td><td>Carl Roth</td><td>Nr. 0039</td><td>설명된 모든 시스템에는 잎</td></tr> <면적을 결정하기 위해 Gelrite<tr><td>Arabidopsis thaliana 야생형</td><td>NASC 스톡</td><td>Col-0 (N1092)</td><td></td></tr><tr><td>Autoclave</td><td>Systec</td><td>VE-100</td><td></td></tr><tr><td>BlattFlaeche</td><td>Datinf GmbH</td><td>BlattFlaeche</td><td>소프트웨어가</td></tr> 필요합니다<tr><td>> Brassica napus wild-type</td><td>see Floerl et al., 2008</td><td>rapid-cycling rape</td><td>genome ACaacc</td></tr><tr><td>Cefotaxime sodium</td><td>Duchefa</td><td>C0111</td><td></td></tr><tr><td>Chicanery flask 500 mL</td><td>Duran Group / neoLab</td><td>E-1090</td><td>Erlenmeyer 플라스크, 4개의 배플이 있는</td></tr><tr><td>수집 튜브 50 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62.547.254</td><td>114 x 28 mm</td></tr><tr><td>Czapek 포도당 육수 매체</td><td>Duchefa</td><td>C1714</td><td></td></tr><tr><td>디지털 카메라</td><td>Nikon</td><td>D3100 18-55 VR</td><td></td></tr><tr><td>Exsiccator (Desiccator)</td> <td>Duran Group</td><td>200 DN, 5.8 L</td><td>Seal with lid to hold chlorine</td></tr><tr><td>gas 형광 현미경</td><td>Leica</td><td>Leica TCS SP5 II</td><td></td></tr><tr><td>HCl</td><td>Carl Roth</td><td>P074.3</td><td></td></tr><tr><td>KNO3</td><td>Carl Roth</td><td>P021.1</td><td>&ge; 99 %</td></tr><tr><td>KOH</td><td>Carl Roth</td><td>6751</td><td></td></tr><tr><td>Leukopor</td><td>BSN medical GmbH</td><td>2454-00 AP</td><td>부직포 테이프 2.5 cm x 9.2</td></tr><tr><td>m MES (2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid)</td><td>Carl Roth</td><td>4256.2</td><td>Pufferan &ge; 99 %</td></tr><tr><td>MgSO4</td><td>Carl Roth</td><td>T888.1</td><td>마그네슘황산-헵타하이드레이트</td></tr><tr><td>무라시게 & Skoog medium (MS)</td><td>Duchefa</td><td>M0222</td><td>MS including vitamins</td></tr><tr><td>NaClO</td><td>Carl Roth</td><td>9062.1</td><td></td></tr><tr><td>Percival growth chambers</td><td>CLF Plant Climatics GmbH</td><td>AR-66L2</td><td></td></tr><tr><td>Petri-dishes</td><td>Sarstedt</td><td>82.1473.001</td><td>size &Oslash; xH: 92 &times; 16 mm</td></tr><tr><td>플라스틱 컵 (500 mL, 투명)</td><td>Pro-pac, 샐러드 boxx</td><td>5070</td><td>크기: 108 &times; 81 &times; 102 mm</td></tr><tr><td>주름 셀룰로오스 필터</td><td>Hartenstein</td><td>FF12</td><td>입자 보유 수준 8&ndash; 12 &뮤; m</td></tr><tr><td>poly klima 성장 챔버</td><td>poly klima GmbH</td><td>PK 520 WLED</td><td></td></tr><tr><td>감자 포도당 육수 매체</td><td>SIGMA Aldrich</td><td>P6685</td><td>미생물학</td></tr><tr><td>냄비</td><td>P & ouml; ppelmann GmbH</td><td>TO 7 D 또는 TO 9,5 D</td><td>&Oslash; 7 cm resp. &Oslash; 9.5</td></tr> <tr><td>cmPromMYB51::YFP</td><td>see Poncini et al., 2017</td><td>MYB51 리포터 라인</td><td>YFP (즉, 3xmVenus with NLS)</td></tr><tr><td>반응 튜브 2 mL</td><td>Sarstedt</td><td>72.695.400</td><td>PCR 성능 테스트</td></tr><tr><td>로터리 (오비탈) 쉐이커</td><td>Edmund B&uuml; hler</td><td>SM 30 C control</td><td></td></tr><tr><td>Sand (버드 샌드)</td><td>Pet Bistro, M&uuml; ller Holding</td><td>786157</td><td></td></tr><tr><td>Soil</td><td>Einheitserde spezial</td><td>SP Pikier (SP ED 63 P)</td><td></td></tr><tr><td>Solanum lycopersicum wild-type</td><td>see Chavarro-Carrero et al., 2021</td><td>유형: Moneymaker</td><td></td></tr><tr><td>Thoma 세포 계수 챔버</td><td>Marienfeld</td><td>642710</td><td>깊이 0.020mm; 0.0025mm2</td></tr><tr><td>초순수(Milli-Q 정제수)</td><td>MERK</td><td>IQ 7003/7005</td><td>정제 후 얻은 물</td></tr><tr><td>Verticillium dahliae</td><td>see Reusche et al., 2014</td><td>isolate JR2</td><td></td></tr><tr><td>Verticillium longisporum</td><td>Zeise and von Tiedemann, 2002</td><td>strain Vl43</td><td></td></tr></tbody></table>

식물 뿌리를 토양 매개 미생물로 감염시키는 접종 전략

Inoculation Strategies to Infect Plant Roots with Soil-Borne Microorganisms

근권은 식물 뿌리가 끊임없이 도전받는 매우 복잡한 미생물 공동체를 가지고 있습니다. 뿌리는 다양한 미생물과 밀접한 접촉을하지만, 토양 매개 상호 작용에 대한 연구는 여전히 지상 기관에서 수행 된 연구 뒤에 있습니다. 모델 뿌리 병원균으로 모델 식물을 감염시키기 위한 일부 접종 전략이 문헌에 기술되어 있지만, 포괄적인 방법론적 개요를 얻는 것은 여전히 어렵다. 이 문제를 해결하기 위해, 뿌리-미생물 상호작용의 생물학에 대한 통찰을 얻기 위해 적용될 수 있는 세 가지 상이한 뿌리 접종 시스템이 정확하게 기술된다. 예를 들어, Verticillium 종 (즉, V. longisporum 및 V. dahliae)은 뿌리 침입 모델 병원균으로 사용되었습니다. 그러나, 상기 방법은 병원성 및 유익한 미생물 둘 다의 다른 뿌리 식민지화에 쉽게 적응될 수 있다. 식물 자일렘을 식민지화함으로써, Verticillium spp.와 같은 혈관 토양 매개 진균은 독특한 생활 방식을 나타낸다. 뿌리 침범 후, 그들은 자일렘 혈관을 통해 작물 적으로 퍼지고, 싹에 도달하고, 질병 증상을 유발합니다. 세 가지 대표적인 식물 종들이 모델 숙주로 선택되었다: 애기장대 탈리아나, 경제적으로 중요한 오일시드 유채(브라시카 나푸스), 토마토(솔라눔 리코페르시쿰). 단계별 프로토콜이 제공됩니다. 병원성 분석, 마커 유전자의 전사 분석 및 리포터 구축물에 의한 독립적 확인의 대표적인 결과가 제시된다. 또한, 각 접종 시스템의 장점과 단점이 철저히 논의됩니다. 이러한 입증 된 프로토콜은 뿌리 - 미생물 상호 작용에 대한 연구 질문에 대한 접근 방식을 제공하는 데 도움이 될 수 있습니다. 식물이 토양의 미생물에 어떻게 대처하는지 아는 것은 농업을 개선하기위한 새로운 전략을 개발하는 데 중요합니다.

프로토콜에 따라, 식물을 재배하고 V. longisporum (균주 Vl4325) 또는 V. dahliae (JR218 단리물)로 접종하였다. 다양한 시나리오는 효과를 입증하고 주어진 프로토콜의 일부 기능을 강조하기 위해 설계되었습니다. 대표적인 결과가 표시됩니다.
항균성 인돌글루코시놀레이트(IG) 생합성에 관여하는 유전자의 발현 유도는 버티실륨 감염 17,19,26의 평가를 위한 신뢰할 수 있는 지표이다. 아라비돕시스에서, MYB51 (MYB 도메인 단백질 51; AT1G18570)은 IG 생합성에 필요한 유전자의 활성화에 관여하는 전사인자<sup ...

이 프로토콜은 식물 뿌리에 토양 매개 미생물을 접종하는 전략에 대한 자세한 요약을 제공합니다. 진균 Verticillium longisporum 및 Verticillium dahliae에 대해 예시된 세 가지 상이한 뿌리 감염 시스템이 기술된다. 잠재적 응용 분야와 가능한 다운스트림 분석이 강조되고 각 시스템에 대한 장단점이 논의됩니다.

The rhizosphere harbors a highly complex microbial community in which plant roots are constantly challenged. Roots are in close contact with a wide ...

무수한 미생물이 식물 뿌리를 식민지화하지만, 이러한 상호 작용은 지하에서 일어날 때 분석하기가 어렵습니다. 이를 용이하게하기 위해이 프로토콜 수집은 식물 뿌리에 토양 매개 미생물을 접종하는 전략에 대한 개요를 제공합니다. 뿌리 접종은 뿌리 미생물 상호작용을 연구하기 위한 기초이며, 다음의 기술을 사용함으로써, 상호작용은 분자적, 세포학적 또는 조직학적 수준에서 연구될 수 있다.우리는 뿌리 침입 미생물로 verticillium을 사용하는 세 가지 접종 시스템과 모델 식물 인 애기장대에 대해 설명합니다. 그러나, 상기 방법을 토마토 또는 유채 유채와 같은 다른 식물, 및 다른 뿌리 미생물, 예를 들어 유익한 세렌디피타로의 이송이 가능하다. PDB에서 균사체를 배양하고 다공 및 Czapek 덱스트로스 배양액을 유도하여 버티실륨 접종물을 미리 준비한다.그런 다음 오토클레이브 된 매체를 페트리 접시에 붓는 것으로 시작하십시오. 매체를 경화 한 후 페트리 접시를 멸균 비닐 봉지에 다시 포장하고 섭씨 4 ~ 10도의 냉장고에 밤새 거꾸로 보관하십시오. 메스로 고형화된 배지의 상부 삼분의 일에 있는 감염 채널을 절단하고 제거한다.절단하는 동안 한천 매체 아래에 액체나 공기가 들어가지 않도록 하십시오. 다음으로, 멸균 피펫 팁을 사용하여 절단 상면에 50 ~ 100 표면 멸균 애기장대 종자를 분배하십시오. 절단 된 한천 표면이 Petri 접시 벽과 접촉하는 각도에 씨앗을 넣어 뿌리가 그들 사이에서 자랄 수 있도록하십시오.페트리 접시를 닫고 통기성 접착 테이프로 밀봉하여 가스 교환을 허용합니다. 페트리 접시를 이틀간 섭씨 네 도에서 어둠 속에 보관하여 계층화하여 동기화되고 효율적인 발아를 보장합니다. 그런 다음 플레이트를 랙에 수직으로 놓고 긴 하루 조건 하에서 성장 챔버에서 식물을 자랍니다.뿌리가 감염 채널에 도달하면 9 일에서 11 일 후에 플레이트를 수평으로 놓고 엽니 다. 그런 다음 갓 수확 한 Verticillium conidia의 500 마이크로 리터를 감염 채널에 직접 넣으십시오. 포자 대신 모의 용액 500 마이크로 리터를 첨가하여 제어 플레이트를 준비하십시오.대조군 및 포자 접종된 플레이트 둘 다를 액체가 흡수될 때까지 수평으로 인큐베이션한다. 그런 다음 뚜껑을 닫고 통기성 접착 테이프로 플레이트를 밀봉하십시오. 뿌리와 토양 매개 곰팡이를 어둡게하기 위해 검은 종이 상자로 뿌리 부분을 덮으십시오.플레이트를 성장

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Research

연구

JoVE Journal

Environment

환경

균일한 발아를 보장하기 위해 어둡고 무균 상태에서 미리 발아된 벼 묘목부터 시작하십시오.이 묘목을 테스트 박테리아가 사전 접종된 영양이 풍부한 반고체 배지가 들어 있는 플라스크로 옮깁니다.식물이 자라면서 뿌리는 주화성 화합물을 주변 매체로 방출합니다.이 화합물은 박테리아 증식을 자극하여 뿌리 표면에 접착, 증식 및 콜로니 형성을 유도합니다.뿌리가 발달함에 따라 박테리아는 자연적인 구멍과 세포간 공간을 통해 식물로 들어갑니다.일단 내부로 들어가면 박테리아는 식물의 뿌리와 싹 내에 내생 군집을 형성합니다.시간이 지남에 따라 이러한 콜로니는 식물 조직과 안정적인 관계를 형성하고 항균 화합물을 생산하기 시작합니다.다음으로, 묘목을 자연 환경 조건을 모방한 온실로 옮깁니다.식물이 자라면서 내생균이 생산하는 항균 화합물이 생물학적 방제제 역할을 하여 환경의 유해한 미생물로부터 묘목을 보호합니다.

벼에서 유익한 박테리아의 뿌리 매개 내생 집락화

출처: Yi, Y., et al. 식물-미생물 상호작용: 감자 뿌리 삼출물에 대한 Bacillus mycoides의 전사 반응. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 식물-미생물 상호 작용을 연구하기 위한 Bacillus mycoides 배양의 준비 및 처리를 보여줍니다. 이는 스톡 배양을 줄무늬로 만들고 액체 배지에서 배양하는 것부터 교반 하에 박테리아를 식물 뿌리 삼출물에 노출시키는 단계에 대해 간략하게 설명합니다. 이 과정은 삼출물에 의해 유도된 유전자 발현 변화의 후속 분석을 위해 박테리아 세포를 수확하고 급속 냉동하는 것으로 마무리됩니다.

시험관 내 식물-미생물 상호 작용을 모방하기 위해 식물 뿌리 삼출물을 사용한 박테리아 처리

출처: 루피안, J. S., et.al. 식물 조직 내 슈도모나스 시링기 유전자 발현의 단세포 분석. J. Vis. 경험 (2022)이 영상은 아라비도시스 식물 잎에 박테리아 병원체를 주입하는 진공 침투 방법을 시연합니다. 이 방법은 준비된 박테리아 현탁액과 진공 펄스를 사용하여 기공을 균일하게 통과시켜 잎 감염을 통제합니다.

진공 침투를 통한 애 기장대 잎에 박테리아 병원체를 접종하기

이 프로토콜은 곰팡이 entomopathogen을 소개하는 두 접종 방법을...

Endophytes로 곰팡이 Entomopathogens 구축 : Endophytic 생물학적 방제 향해

생체영양 병원체 우스틸라고 수교를 이용한 옥수수 및 테오신테 식물을 접종하는 바늘 주입 방법의 사용이 설명된다.  상기 바늘 주입 접종 방법은 병원체가 아프레소리아 형성을 통해 식물에 유입되는 식물 잎 사이에 곰팡이 병원균의 통제된 전달을 용이하게 한다. 이 방법은 매우 효율적이며, 미국 maydis와재현 가능한 접종을 가능하게 합니다.

옥수수와 테오신테 라인에 우스틸라고 성 실증의 병원성을 평가하기위한 신속하고 효율적인 방법

표준 실험실 접시에서 만든 개별 멸균 소우주의 질소 고정 박테리아 Sinorhizobium meliloti과의 공생에 개자리의 truncatula 식물의 성장 저하 불임없이 루트 시스템과 결절의 자주 검사를 허용합니다. 식물은 최대 9 주 동안 이러한 성장 챔버에서 유지 될 수있다.

유괴와 콩과 식물의 성장을위한 단일 공장, 무균 소우주<em&gt; 개자리 truncatula</em&gt; Rhizobi​​al 공생과<em&gt; Sinorhizobi​​um meliloti</em

농약침과 PVX 농병은 식물에 있는 유전자의 일시적인 자궁 발현을 위한 일상적인 기능적인 분석입니다. 이 방법은 효과적인 전략 (급속한 저항 및 비열유전자 발견)에 있는 능률적인 연구및 분자 식물 병리학에 있는 현대 연구에 결정적입니다. 그들은 공장에서 강력한 고처리량 기능 분석에 대한 수요를 충족합니다.

감자와 니코티아나 벤타미안의 농아침투 및 PVX 농병감염

기술 된 수경 공동 배양 시스템은 금속 메쉬 스크린이있는 온전한 식물을지지하고 박테리아와 함께 배양한다. 식물 조직, 박테리아 및 분비 된 분자는 하류 분석을 위해 따로 따로 수확 할 수 있으며 동시에 식물 숙주와 상호 작용하는 미생물 또는 미생물의 분자 반응을 조사 할 수 있습니다.

식물 / 미생물 분자 상호 작용 및 신호의 동시 및 체계적 분석을위한 수경 공동 공동 배양 시스템

검은 후추 식물의 기저 머리를 핀찌르는 것은 그것을 손상시키는 간단하고 시간을 절약 할 수있는 방법입니다. 여기에서는 검은 후추 식물을 감염시키기위한 비디오와 함께 자세한 단계를 제공했습니다.

검은 후추 식물에 대한 Phytophthora capsici에 대한 효과적인 접종 방법

수박의 Fusarium wilt를 관리하려면 존재하는 병원균 종족에 대한 지식이 필요합니다. 여기에서, 우리는 병원성 균류 Fusarium oxysporum f. sp niveum (Fon)의 인종 타이핑에서 그들의 효능을 입증하기 위해 뿌리 딥, 감염된 커널 시딩, 및 변형된 트레이-딥 접종 방법을 설명한다.

알려지지 않은 Fusarium oxysporum f.sp.의 인종을 결정하는 데 사용되는 세 가지 접종 기술의 대조. 니벳 격리

배우세요 식물 뿌리에 토양 미생물을 접종하는 세 가지 방법을. Verticillium과 Arabidopsis를 사용하여 뿌리-미생물 상호작용을 분자 및 세포 수준에서 연구하는 기술을 익히세요.

식물 뿌리를 토양 매개 미생물로 감염시키는 접종 전략

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