2022년 2월 18일
본 프로토콜은 하행 대동맥 수축을 사용하여 박출률이 보존된 심부전의 minipig 모델을 확립하기 위한 단계별 절차를 설명합니다. 이 질병 모델의 심장 형태, 조직학 및 기능을 평가하는 방법도 제시됩니다.
전 세계 심부전 사례의 절반 이상이 혈액 배출률이 보존된 심부전(HFpEF)으로 분류됩니다. 이 비디오는 HFpEF 미니피그를 모델링하는 단계별 통계 절차와 심장 기능 평가를 위한 심장 초음파 기술을 제공합니다. 이 모델에는 단일 소인 필터가 있습니다.
대동맥 수축, 유도 압력 과부하가 있습니다. 따라서 이 모델은 특정 유형의 HFpEF를 연구하는 데 유용합니다. 수술 계획에 따른 수술 기법 외에도 동물 품질 관리 및 수술 후 동물 관리는 중요한 단계입니다.
생화학 검사와 심전도 검사는 동물의 건강과 구조 및 기능의 변화를 모니터링하는 데 도움이 됩니다. Xiaohui Li, 임상 심장 외과 의사. Weijiang Tan, 훈련된 동물 외과 의사.
이 수술을 위해 훈련된 마취과 의사인 Xiang Li. Shuang Chen, 훈련된 수술실 간호사. 그리고 훈련된 수술실 간호사인 Honghua Chen이 절차를 시연할 것입니다.
수술 전 14일 동안 동물을 시설에 적응시키기 시작합니다. 수술실과 장치를 준비합니다. 미니피그를 고정하고 수술대의 오른쪽 측면 누운 위치에 놓습니다.
동물의 체온을 유지하기 위해 난방 시스템을 켜십시오. 심장 초음파를 수행하고 2밀리리터의 혈액 샘플을 수집합니다. 일회 호흡량 킬로그램당 8밀리리터, 분당 30회 호흡으로 환기를 시작합니다.
귀 정맥에서 말초 정맥 카테터를 사용하여 정맥 캐뉼레이션을 설정합니다. 그런 다음 동물을 수의학 모니터에 연결하십시오. 왼쪽 흉부를 면도합니다.
0.7%의 요오드와 75%의 알코올을 도포하여 견갑골에서 횡격막까지 피부를 무균으로 준비합니다. 수술 부위에 멸균 커튼을 놓습니다. 네 번째 늑간 공간을 따라 약 15cm 길이의 절개를 표시합니다.
그런 다음 전기 소작을 사용하여 피부를 절개합니다. 소작과 근육 및 결합 조직의 둔기 해부를 조합하여 흉부를 엽니다. 리브 견인기를 사용하여 리브를 펼칩니다.
흉부 하행 대동맥 분절을 찾아 수축 부위를 결정하고 2개의 3개의 OTT 수술 봉합사를 사용하여 분절 주위를 두 번 반복합니다. 압력 측정 단위를 설정합니다. 수축 정도를 결정하려면 하행 대동맥 분절을 둘러싼 수술용 봉합사를 점차적으로 조여 원하는 수축 정도를 얻습니다.
압력 판독값이 20분 동안 안정화되도록 하고 수술 매듭을 영구적으로 조입니다. 배액 흉관을 사용하여 흉강의 공기와 과도한 체액을 배출합니다. 동물의 눈 깜박임과 팔다리 움직임의 존재를 모니터링합니다.
인공호흡기를 분리하되 기관내관은 그대로 두고 자발호흡의 존재를 모니터링합니다. 캔버스 덮개가 있는 이동식 안전 장치에 동물을 놓습니다. 동물의 왼쪽 가슴을 면도하십시오.
가슴의 왼쪽 중앙에 손가락을 올려 서사적 맥박을 느껴보세요. 초음파 젤을 주변 부위에 바릅니다. 초음파 시스템의 위상 배열 변환기를 세 번째 늑간 공간에 배치합니다.
변환기를 전방 또는 후방 방향으로 이동하고 노치 각도를 조정합니다. 심방, 심실 및 대동맥을 식별하고 B 모드 및 M 모드 흉골 주위 장축 이미지를 기록합니다. 다음으로 흉골 단축 보기에서 심실 중격, 좌심실 후벽 및 유두 근육을 식별하고 B 모드 및 M 모드 이미지를 기록합니다.
초음파 시스템 제조업체에서 제공하는 워크스테이션을 사용하여 심장 구조와 기능을 평가하십시오. 심장 구조 및 기능 평가는 흉골 단축의 표시된 B 모드 및 M 모드 기록을 보여주었습니다. 하행 대동맥 수축 심장에서 심실 중격 두께가 증가한 반면, 관찰 기간 동안 후방벽 두께가 증가했다가 감소하여 하행 대동맥 수축 미니피그의 좌심실에서 비후성 리모델링을 시사합니다.
말단 이완기의 좌심실 내부 치수는 4주와 6주에 감소했다가 8주 이후 점차 증가하여 심실이 확장되기 전에 동심원 비대를 겪었음을 시사합니다. 모델 심장의 좌심실 박출률은 12주 동안 50% 이상으로 유지되었습니다. 가짜 심장과 비교했을 때, 하행 대동맥 수축 심장의 확대가 관찰되었다.
심부전 표지자인 심장 트로포닌 I은 4주, 8주, 12주에 하행 대동맥 수축 그룹에서 해당 시점의 가짜 그룹보다 유의하게 높았습니다. 심방 심실 중격과 심실의 심근세포는 돼지증과 함께 비대를 보였다. 자궁내막판막의 근육층이 감소하였고 대동맥에서 혈관내피증식이 관찰되었다.
더욱이 하행 대동맥 수축은 미니피그의 심근에 광범위한 섬유화를 유발하고 좌심실, 우심방, 대동맥벽의 염증 세포 침윤을 동반했다. 이 모델은 압력 과부하 유도 HFpEF에서 조직 손상, 섬유증, 염증 및 동심원 기능 장애를 연구하는 강력한 도구입니다.
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본 프로토콜은 하행 대동맥 수축을 통해 박출률 보존 심부전(HFpEF) 미니피그 모델을 구축하는 방법을 설명합니다. 또한, 이 질병 모델에서 심장 형태, 조직학 및 기능의 평가 방법을 상세히 다룹니다.
박출률 보존 심부전(HFpEF)을 재현하는 대동물 모델은 중개 연구와 치료 전략의 전임상 평가에 매우 중요합니다. 티베트 미니피그 DAC 모델은 생리학적으로 유의미한 시스템 내에서 기전적 위험 요소 제거 및 표적 검증을 가능하게 하여, 포트폴리오 확장을 위한 예측 신뢰도를 높여줍니다. 이 모델은 초기 발견 단계와 전임상 검증 단계를 연결함으로써 심혈관 질환 신약 개발의 핵심적인 전환점을 제공합니다.
이 DAC 유도 HFpEF 모델은 초기 발견 단계와 전임상 리드 검증 단계 사이의 간극을 메워, 심혈관 프로그램의 가설 검증과 중개 연구의 연속성을 가능하게 합니다.