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DOI: 10.3791/63666-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a technique combining laser capture microdissection with the CEL-Seq2 protocol for generating transcriptomic data from small individual tissue samples. The method facilitates detailed gene expression analysis in C. elegans and can be adapted for non-model species, bypassing the need for species-specific genetic tools.
RNA 시퀀싱을 위해 개별 선충류 조직을 분리하기 위해 레이저 미세 해부를 사용하는 프로토콜이 기술되어 있습니다. 이 프로토콜은 종 특이적 유전자 툴킷을 필요로하지 않으므로 단일 조직 샘플 수준에서 다른 종간에 유전자 발현 프로필을 비교할 수 있습니다.
우리는 레이저 캡처 미세 해부와 CEL-Seq2라는 단일 세포 RNA 탐색 프로토콜을 결합하여 작은 개별 조직 샘플에 대한 전사체 데이터 세트를 생성합니다. 이 기술을 통해 우리는 전통적인 세포 분류 방법을 사용하여 연구 할 수없는 조직이나 종에서 유전자 발현을 연구 할 수 있습니다. 추가적으로, 벌크 RNA-seq 접근법보다 더 특이성을 제공한다.
여기서 우리는 C.elegans 네 번째 애벌레 단계 수컷과 hermaphrodites의 네 개의 세포 꼬리 팁에 대해이 기술을 시연했습니다. 그러나이 접근법의 아름다움은 모델이 아닌 종에도 적용 할 수 있다는 것입니다. 이 절차를 시연하는 것은 내 실험실의 박사 과정 학생 인 Raya Jallad와 현재 테네시 주 채터누가에있는 베일러 학교의 생물 의학 과학자 인 Antonio Herrera 박사입니다.
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