Intravital Widefield Fluorescence Microscopy of Pulmonary Microcirculation in Experimental Acute Lung Injury Using a Vacuum-Stabilized Imaging System

Stefan Hall; Sufyan Faridi; Irene Euodia; Sophie Tanner; Andrew Krzysztof Chojnacki; Kamala D. Patel; Juan Zhou; Christian Lehmann

doi:10.3791/63733

진공 안정화 이미징 시스템을 이용한 실험적 급성 폐 손상에서의 폐 미세순환의 생체내 광역 형광 현미...

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Immunology and Infection

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Intravital Widefield Fluorescence Microscopy of Pulmonary Microcirculation in Experimental Acute Lung Injury Using a Vacuum-Stabilized Imaging System

진공 안정화 이미징 시스템을 이용한 실험적 급성 폐 손상에서의 폐 미세순환의 생체내 광역 형광 현미경 검사

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09:28 min

April 6, 2022

DOI: 10.3791/63733-v

Stefan Hall¹, Sufyan Faridi², Irene Euodia^2,3, Sophie Tanner⁴, Andrew Krzysztof Chojnacki⁵, Kamala D. Patel^6,7, Juan Zhou^2,4, Christian Lehmann^1,2,4,8

¹Department of Physiology and Biophysics,Dalhousie University, ²Department of Microbiology and Immunology,Dalhousie University, ³Department of Neuroscience,Dalhousie University, ⁴Department of Anesthesia, Pain Management, and Perioperative Medicine,Dalhousie University, ⁵Live Cell Imaging Center,University of Calgary, ⁶Department of Physiology and Pharmacology,University of Calgary, ⁷Department of Biochemistry and Molecular Biology,University of Calgary, ⁸Department of Pharmacology,Dalhousie University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

생체 내 형광 현미경 검사는 백혈구 - 내피 상호 작용 및 모세관 관류를 실시간으로 연구하는 데 활용 될 수 있습니다. 이 프로토콜은 진공-안정화된 폐 영상화 시스템을 사용하여 폐 미세순환에서 이러한 파라미터를 영상화하고 정량화하는 방법을 기술한다.

이 프로토콜은 생체내에서 폐 백혈구 부착 및 모세관 관류를 이미지화하기 위해, 외과적 준비 및 진공 안정화 시스템의 사용을 상세히 기술한다. 이 기술의 가장 큰 장점은 최소한의 물리적 외상으로 손상되지 않은 미러링 폐의 안정적인 고해상도 생체 내 이미징을 허용한다는 것입니다. 시작하려면, 진공 채널의 오염을 피하면서 외부 링의 상부에 얇은 층의 진공 그리스를 투여하여 이미징 윈도우를 준비하십시오.

깨끗한 8mm 유리 커버 슬립을 창문에 놓고 부드럽게 눌러 씰을 만듭니다. 이미징 창을 디지털 압력 게이지가 장착된 진공 펌프에 연결하고 50~60mm의 수은 정수 흡입을 제공할 수 있습니다. 길이 광섬유 케이블을 20 게이지 기관내 캐뉼라를 통과시키고 팁을 리도카인 HCL에 잠기십시오.

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