Name: 균종속영양 식물 조직의 곰팡이 집락화 및 종자의 공생 발아를 해석하기 위한 현미경 기술 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-05-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 48 s
Description: 배우세요 균종속영양 식물의 곰팡이 집락화를 현미경 기술로 분석하는 방법을. 주사전자현미경과 투과전자현미경을 활용해 균근 상호작용과 식물 조직의 구조를 상세히 관찰할 수 있습니다.

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저자는 FAEPEX 및 FAPESP (2015/26479-6)의 자금 지원에 감사드립니다. MPP는 석사 학위 장학금(프로세스 88887.600591/2021-00)에 대해 Capes에게 감사를 표하고 CNPq. JLSM은 생산성 보조금(303664/2020-7)에 대해 CNPq에 감사드립니다. 저자는 또한 LME (전자 현미경 실험실 - IB / Unicamp), INFABiC (세포 생물학에 적용된 포토닉스에 관한 국립 과학 기술 연구소 - Unicamp) 및 LaBiVasc (혈관 생물학 실험실 - DBEF / IB / Unicamp); LAMEB (UFSC) 및 엘리아나 데 메데이로스 올리베이라 (UFSC) 냉동 보호 프로토콜에 대한 기여; TEM 프로토콜에 대한 기여에 대한 LME.

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식물 해부학 및 형태학의 이미지 분석은지하 기관6,40, 종자의 공생 발아에 대한 구조 분석39, 공중 및 생식 구조41에 의해 입증된 바와 같이 목표를 달성하고 진균종속영양 식물과 필수 진균 내생 식물 간의 관계를 이해하는 데 도움이 되는 중요한 잠재력을 가지고 있습니다. . 구조 식물학은 지난 10년 동안 식물 과학의 다른 영역에 대한 명성과 공간을 잃었음에도불구하고1, 개발에 대한 질문에 답하고 발달, 생태학, 생리학 및 진화와 관련된 참신함과 필수 식물 특성을 밝히는 데 여전히 두드러집니다. 이러한 방법은 MH 식물 분석의 중요한 측면을 고려하여 식물의 구조 연구를위한 기초입니다.
MH 식물을 신중하게 수집하기 위해 필수 정보가 제공되며, 그...

식물 형태학 및 해부학을 다루는 식물학의 구조 연구는 전체 유기체를 이해하는 데 기본이며1,2, 식물의 생태, 생리학, 발달 및 진화에 관한 지식을 통합하고 기여하는 데 필수적인 관점을 제공합니다3. 식물 형태학 및 해부학의 방법은 현재 최근에 개발 된 프로토콜, 장비 및 지식뿐만 아니라 100 년 이상 전에 개발 된 것으로 구성됩니다2. 보다 최근의 기술(예: 컨포칼 현미경, X선 마이크로단층 촬영)과 함께 고전적인 방법(예: 광학 현미경)의 지속적인 실행 및 적응은 방법론 개발을 가능하게 하는 이론적 지식이라는 동일한 필수 기반을 가지고 있습니다.
식물 해부학 및 형태학의 주요 도구는 이미지입니다. 이러한 분석이 주관적인 해석에 공간을 제공하는 단순한 관찰이라는 오해에도불구하고2,이 영역의 이미지를 분석하고 이해하려면 적용된 방법 (장비, 분석 유형, 방법 론적 절차), 세포 구성 요소, 조직 화학 및 식물체 (조직 조직 및 기능, 개체 발생, 형태 학적 적응). 다양한 방법을 통해 얻은 이미지를 해석하면 형태와 기능을 상호 연관시키고, 구조의 화학적 구성을 해독하고, 분류군을 설명하고, 식물 병원체에 의한 감염을 이해하고, 기타 그러한 평가를 수행 할 수 있습니다.
균사 종속 영양 (MH) 식물 (즉, 균근 균류 4,5에서 탄소를 얻는 비 광합성 식물)을 연구 할 때 구조적 적응의 현저한 측면, 곰팡이에 의한 조직 식민지화 패턴 및 지하 기관의 형태 해부학은 개발 전략과 영양소의 원천 인균사와의 관계를 계몽 할 수 있습니다. MH 식물의 지하 기관은 일반적으로 토양 곰팡이와의 연관성과 관련된 중요한 적응을 보여 주므로 이러한 해부학 적 및 형태 학적 조사를 수행하는 것이 필수적입니다6. MH 종의 공중 기관은 균근 진균이 아니더라도 내생 식물이 이러한 조직에 존재할 수 있으므로 무시해서는 안됩니다 (개인 관찰, 아직 발표되지 않음).
전체 수명주기 동안 MH 종과 균근 진균 결합의 잘 확립 된 필수 성 외에도7, 모든 난초 종, 심지어 독립 영양 종조차도 자연 환경에서 초기 의무 진균 종속 영양 단계를 가지고 있습니다. 난초의 배아가 미분화되고 배젖이나 자엽이 없기 때문에 곰팡이 파트너 4,8의 영양 지원 없이는 자연 환경에서 발달하고 확립 할 수 없기 때문에 발생합니다. 이를 고려할 때, 공생 발아 프로토콜은 MH 종뿐만 아니라 광합성 난초에도 적용될 수 있으며, 발아 및 프로토 코름 발달에서 난초-곰팡이 특이성을 조사하는 것을 목표로하며, 멸종 위기 종 보존을위한 이니셔티브에 광범위하게 적용되는 방법론 9,10,11.
이 방법 어셈블리에서는 해부학 적 연구 (섹션 1), 표면 분석 및 샘플 선택 (섹션 2), 절편 방법 (자유형 : 섹션 3, 미세 절제술 : 섹션 4, 저온 미세 절제술 : 섹션 5), 염색 및 장착 (섹션 6), 곰팡이 내생 식물의 형광 및 공초점 현미경 (섹션 7), 주사 전자 현미경 (섹션 8), 및 투과 전자 현미경 (섹션 9). 또한 앞서 언급한 이미징 방법을 발아 과정에서 종자, 원생 및 묘목의 곰팡이 집락을 분석하는 데 성공적으로 적용할 수 있기 때문에 난초 종자(MH 및 독립 영양, 섹션 10)에 대한 공생 발아 방법을 설명합니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63777/63777fig01.jpg"> 그림 1: 이미징 방법의 개략적 요약. 회로도는 자세히 설명된 프로토콜 단계의 표시를 제공합니다. 약어 : GMA = 글리콜 메타 크릴 레이트, OCT = 최적 절단 온도 화합물, SEM = 주사 전자 현미경. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63777/63777fig01large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
여기에 자세히 설명된 현미경 기술(그림 1)은 샘플 수집, 고정, 탈수, 매립 및 절편과 같은 필수 단계가 선행됩니다. 선택한 기술에 따라 단계가 다양하기 때문에(그림 1), 준비 및 수집 장소로 운송할 고정제, 고정 전에 샘플을 준비하는 방법, 사용할 탈수 공정(섹션 1), 다양한 매립 가능성 및 절단 방법(섹션 4, 5, 및 9). 그림 1 은 아래에 자세히 설명된 각 현미경 기술에 필요한 모든 단계를 순차적으로 요약한 것입니다.

<table><tbody><tr><td>아세톤</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>179124</td><td>(SEM 스텁 장착용)</td></tr><tr><td>한천(AA)</td><td>시그마-알드리치</td><td>A1296</td><td>(종자 발아 테스트용)</td></tr><tr><td>Calcofluor White</td><td>Stain Sigma-Aldrich</td><td>18909</td><td>형광 염료(셀룰로오스 검출)</td></tr><tr><td>구연산염 완충 용액, 0.09M pH 4.8</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C2488</td><td>(톨루이딘 블루 O 염색용)</td></tr><tr><td>전도성 양면 탄소 테이프</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-285-81</td><td>(SEM용)</td></tr><tr><td>컨포칼 현미경</td><td>Zeiss</td><td></td><td>(모든 모델)</td></tr><tr><td>구리 그리드</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G4776</td><td>(TEM용)</td></tr><tr><td>임계점 건조기</td><td>Balzers</td><td></td><td>(모든 모델)</td></tr><tr><td>저온 유지 장치</td><td>Leica Biosystems</td><td></td><td>(모든 모델)</td></tr><tr><td>해부 현미경</td><td>Leica Biosystems</td><td></td><td>(= 실체현미경, 모든 모델)</td></tr><tr><td>Entellan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>107960</td><td>현미경 검사용 빠른 장착 매체</td></tr><tr><td>에틸 알코올, 순수 (&ge; 99.5 %</td> <td>시그마 - 알드리치</td><td>459836</td> <td>(= 에탄올, 탈수 공정 용)</td></tr> <tr><td>포름 알데히드 용액, 37 %</td> <td>시그마 알드리치</td><td>252549</td> <td>(NBF 용액 준비 용)</td></tr> <tr><td>포르말린 용액, 중성 완충, 10 %</td> <td>시그마 알드리치</td><td>HT501128</td><td>조직 조직 고착</td></tr><tr><td>젤라틴 캡슐 TEM</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-248-71</td> <td>(TEM의 수지 중합 용)</td></tr><tr><td>젤라틴 용액, H2O</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G1393</td><td>(슬라이드 준비용 희석 - OCT 준수)</td></tr><tr><td>글루타르알데히드 용액, 25%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G6257</td><td>(Karnovsky' 용액 준비)</td></tr><tr><td>HistoResin</td><td>Leica Biosystems</td><td>14702231731</td><td>글리콜 메타크릴레이트(GMA) 임베딩 키트</td></tr><tr><td>요오드</td><td>시그마-알드리치</td><td>207772</td><td>(루골 용액 준비용)</td></tr><tr><td>질산납(II) 질산</td><td>염 시그마-알드리치</td><td>228621</td><td>Pb(NO3)2(TEM 대비 염색용)</td></tr><tr><td>광학 현미경</td><td>Olympus</td><td></td><td>(모든 모델)</td></tr><tr><td>LR 백색 아크릴 수지</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L9774</td> TEM Lugol 용액<td>용 친수성 아크릴 수지</td></tr><tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>62650</td><td>(염색용)</td></tr><tr><td>시편 마운트용 금속 스텁</td><td>Rave Scientific</td><td></td><td>(SEM용, 다른 모델)</td></tr><tr><td>Microtome</td><td>Leica Biosystems</td><td></td><td>수동 회전식 마이크로톰 또는 기타 모델</td></tr><tr><td>오트밀 한천 (OMA)</td><td>Millipore</td><td>O3506</td> <td>(종자 발아 테스트 용)</td></tr> <tr><td>OCT 화합물, Tissue-Tek</td><td>Sakura Finetek USA</td><td>4583</td><td>냉동 조직 용 매립 배지</td></tr><tr><td>Osmium tetroxide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>201030</td><td>OsO4 (TEM 후위 용)</td></tr><tr><td>Parafilm M</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7793</td><td>밀봉 열가소성 필름</td></tr><tr><td>파라포름알데히드</td><td>시그마-알드리치</td><td>158127</td><td>(카르노프스키의 경우) s 용액 준비)</td></tr><tr><td>폴리-L-라이신 용액, H2O 0.1%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P8920</td><td>(슬라이드 준비 - OCT 준수용)</td></tr><tr><td>폴리프렙 슬라이드</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P0425</td><td>폴리-L-라이신 코팅 유리 슬라이드</td></tr><tr><td>폴리에틸렌 몰딩 컵 트레이</td><td>Polysciences</td><td>17177A-3</td><td>(6x8x5 mm, GMA 수지에 샘플 삽입용)</td></tr><tr><td>폴리에틸렌 몰딩 컵 트레이</td><td>Polysciences</td><td>17177C-3</td><td>(13x19x5mm, GMA 수지에 샘플 삽입용)</td></tr><tr><td>요오드화칼</td>륨 <td>시그마-알드리치</td><td>221945</td><td>(루골 용액 제제용)</td></tr><tr><td>감자 포도당 한천(PDA)</td><td>밀리포어</td><td>70139</td><td>(종자 발아 테스트용)</td></tr><tr><td>주사전자현미경</td><td>전(</td><td></td><td>모든 모델)</td></tr><tr><td>실란 [(3-아미노프로필)트리에톡시실란]</td><td>시그마-알드리치</td><td>A3648</td><td>(슬라이드 준비용 - 10월 준수용)</td></tr><tr><td>실란 준비 슬라이드</td> 실란으로 코팅된 <td>시그마-알드리치</td><td>S4651</td><td>유리 슬라이드</td></tr><tr><td>실리카겔 오렌지, 과립</td><td>Supelco</td><td>10087</td><td>(건조 공정용)</td></tr><tr><td>소듐 카코딜레이트 트리하이드레이트</td><td>시그마-알드리치</td><td>C0250</td><td>(글루타르알데히드-소듐 카코딜레이트 완충액용)</td></tr><tr><td>수산화나트륨</td><td>시그마-알드리치</td><td>S5881</td><td>NaOH(카르노프스키의 경우) 용액 준비 및 TEM 대비 염색)</td></tr><tr><td>차아염소산나트륨 용액</td><td>시그마-알드리치</td><td>425044</td><td>NaClO(종자 표면 소독용)</td></tr><tr><td>인산나트륨 이염기성, 무수</td><td>시그마-알드리치</td><td>71640</td><td>Na2HPO4(NBF 용액 및 PB 제제용)</td></tr><tr><td>인산나트륨 일염기성 일수화물</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9638</td><td>NaH2PO4&middot; H2O (NBF 및 PB용)</td></tr><tr><td>스퍼터</td><td>코터 Balzers</td><td></td><td>(모든 모델)</td></tr><tr><td>수크로스</td><td>시그마-알드리치</td><td>S0389</td><td>C12H22O11 (동결 보호 및 발아 테스트용)</td></tr><tr><td>수단 III</td><td>시그마-알드리치</td><td>S4131</td><td>(염색용)</td></tr><tr><td>수단 IV</td><td>시그마-알드리치</td><td>198102</td><td>(염색용)</td></tr><tr><td>Sudan Black B</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>199664</td><td>(염색용)</td></tr><tr><td>주사기</td><td></td><td></td><td>(3 mL, 모든 브랜드, TEM 대비 염색용)</td></tr><tr><td>주사기 필터 유닛, Millex-GV 0.22 &micro; m</td><td>Millipore</td><td>SLGV033R</td><td>PVDF, 33mm, 감마 멸균(TEM 대비 염색용)</td></tr><tr><td>Tek Bond Super Glue 793</td><td>Tek Bond Saint-Gobain</td><td>78072720018</td><td>liquid cyanoacrylate adhesive, medium viscosity</td></tr><tr><td>Toluidine Blue O</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T3260</td><td>(staining)</td></tr><tr><td>Transmission Electron Microscope</td><td>Jeol</td><td></td><td>(모든 모델)</td></tr><tr><td>트리페닐테트라졸륨 염화물</td><td>: 시그마 - 알드리치</td><td>T8877</td> <td>(종자 발아의 테트라 졸륨 테스트 용)</td></tr> <tr><td>구연산 삼 나트륨 : 이수화물</td><td>시그마 - 알드리치</td><td>S1804</td><td>Na3 (C 6 H < > 5 O < > 7) &middot; 2H2O (TEM 대비 염색용)</td></tr><tr><td>초박절편탐기</td><td>Leica Biosystems</td><td></td><td>(모든 모델)</td></tr><tr><td>우라닐 아세테이</td>트 <td>Fisher Scientific</td><td>18-607-645</td><td>UO2(CH3COO)2(TEM 대비 염색용)</td></tr><tr><td>진공 펌프</td><td></td><td></td><td>(모든 모델)</td></tr><tr><td>밀 배아 응글로티닌, Alexa Fluor 488 Conjugate</td><td>TermoFisher Scientific</td><td>W11261</td><td>형광 염료 접합 렉틴(시알산 및 N-아세틸글루코사미닐 잔류 물 검출)</td></tr></tbody></table>

균종속영양 식물 조직의 곰팡이 집락화 및 종자의 공생 발아를 해석하기 위한 현미경 기술

Microscopy Techniques for Interpreting Fungal Colonization in Mycoheterotrophic Plants Tissues and Symbiotic Germination of Seeds

구조 식물학은 식물의 생태, 생리학, 발달 및 진화를 완전히 이해하는 데 없어서는 안될 관점입니다. 진균 종속 영양 식물 (즉, 곰팡이에서 탄소를 얻는 식물)을 연구 할 때 구조적 적응의 놀라운 측면, 곰팡이에 의한 조직 식민지화 패턴 및 지하 기관의 형태 해부학은 발달 전략과 영양소 공급원 인 균사와의 관계를 계몽 할 수 있습니다. 공생 균류의 또 다른 중요한 역할은 난초 씨앗의 발아와 관련이 있습니다. 모든 난초과과 종은 발아 및 묘목 단계(초기 진균이영양)에서 진균종속영양성이며 심지어 성체기에서 광합성을 하는 종도 있습니다. 난초 씨앗에 영양 매장량이 부족하기 때문에 곰팡이 공생체는 기질을 제공하고 발아를 가능하게하는 데 필수적입니다. 구조적 관점에서 발아 단계를 분석하면 곰팡이와 씨앗의 상호 작용에 관한 중요한 질문에 답할 수 있습니다. 이 기사에서 제안한 것처럼 식물 조직에서 곰팡이 내생식물을 밝히기 위해 다양한 이미징 기술을 적용할 수 있습니다. 식물 장기의 자유형 및 얇은 부분을 염색 한 다음 광학 현미경을 사용하여 관찰 할 수 있습니다. 밀 배아 응집소에 접합 된 형광 색소를 곰팡이에 적용하고 Calcofluor White와 함께 배양하여 컨포칼 현미경에서 식물 세포벽을 강조 표시 할 수 있습니다. 또한, 주사 및 투과 전자 현미경의 방법론은 mycoheterotrophic 난초에 대해 자세히 설명되어 있으며, 관련 식물에 이러한 프로토콜을 적용 할 가능성을 탐구합니다. 난초 종자의 공생 발아 (즉, 균근 진균이있는 경우)는 빛, 공초점 및 전자 현미경으로 분석하기 위해 발아의 여러 단계에서 얻은 구조를 준비 할 수있는 가능성과 함께 프로토콜에 자세히 설명되어 있습니다.

식물 조직을 고정하는 필수 단계에 이어 세포 구성 요소 및 조직의 형태, 부피 및 공간 조직을 고려하여 가능한 한 유사한 세포 구조가 살아있는 상태와 유사합니다16. 화학적 고정 후 샘플에서 이러한 특성을 관찰하십시오(그림 4). 그림 4C-F는 광학 현미경 하에서 적절하게 고정된 샘플을 나타냅니다. 설명된 고정 절차를 따르고 샘플 구조에 익숙해지면 고정 성공을 분석하는 데 도움이 됩니다.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63777/63777fig04.jpg"> 그림 4</stron...

이 프로토콜은 균근 진균으로 발아된 식물 조직 및 종자에서 진균 집락을 연구하기 위해 주사 및 투과 전자 현미경, 빛, 공초점 및 형광 현미경과 같은 다양한 현미경 기술을 적용하여 진균종속영양 식물 샘플을 수집, 고정 및 유지하기 위한 자세한 절차를 제공하는 것을 목표로 합니다.

Structural botany is an indispensable perspective to fully understand the ecology, physiology, development, and evolution of plants. When researching ...

이 프로토콜은 샘플 수집에서 준비에 이르기까지 진균종속영양 식물의 곰팡이 집락화를 이해하기 위해 적용되는 다양한 현미경 기술을 제시하고 필수 단계를 포함합니다. 이러한 기술은 다양한 진균 종속 영양 식물, 심지어 진균 종속 영양 이외의 식물 재료에도 적용될 수 있습니다. 이 방법은 주로 구조 식물학과 관련이 있으며 균근 상호 작용, 생리학, 생식 생물학, 진화 및 진균 종속 영양 식물의 생태학에 대한 통찰력을 제공 할 수도 있습니다.시작하려면 지하 장기를 손상시키지 않도록주의하면서 식물 기반 주변의 토양을 탐색하여 진균 종속 영양 식물을 수집하십시오. 또한 지하 기관에서 공중 기관이 분리되는 것을 방지하기 위해 땅에서 식물을 당기지 마십시오. 조심스럽게 원예 흙손을 사용하여 공중 구조물 주변을 파고 뿌리, 줄기, 뿌리 줄기 및 저장 기관과 같은 지하 기관을 이러한 구조물을 손상시키지 않고 탐험하십시오.깨지기 쉬운 구조를 보존하기 위해 토양 입자를 제거하고 샘플을 고정하기 전에 수돗물로 이러한 장기를 섬세하게 씻어 나머지 토양 입자를 헹굽니다. 잎 깔짚과 관련된 Mycoheterotrophic 식물은 특별한주의를 요구합니다. 따라서 연결된 구조물에서 끌어 당기지 않고 균사를 통해 분해 물질에 연결된 섬세한 기관을 조심스럽게 수집하십시오.이러한 연결이있는 구조물을 보존하고 분석을 위해 깔짚을 수집하십시오. 투과 전자 현미경 분석을 위해, 글루타르알데히드 나트륨 카코딜레이트 완충액 한 방울 안에 있는 3 내지 4-밀리미터 두께의 샘플을 1 내지 2-밀리미터 두께의 더 작은 섹션으로 분할한다. 드롭 외부의 절단면을 버립니다.식물 수집 직후 수집 장소에서 고정 과정을 수행하십시오. 첨가제 고정물이므로 시료의 부피보다 10배 이상 큰 고정제 부피의 수집 튜브로 섹션을 즉시 옮깁니다. 장기의 표면 균사, 특히 지하 균사 및 잎 깔짚과 접촉하는 균사의 표면 분석.해부 현미경으로 신선하거나 고정된 물질을 7.5배 이상의 배율로 관찰합니다. 표면 균사와 rhizomorphs에 의해 안내되는 관심 영역을 검색하십시오. 표면성 근형의 영역을 포함하는 샘플을 선택하여 뿌리와 줄기의 피질 세포 내에서 펠로톤과 균사 코일을 시각화할 수 있습니다.텍스트 원고에 설명 된대로 0.1 몰 인산염 완충액에 밀 배아 응집소 형광 색소 접합체 밀리리터 당 0.2 밀리그램과 1 % 칼코 플루오르 백색 용액을 준비하십시오. 이제 유리 슬라이드의 섹션을

microscopy-techniques-for-interpreting-fungal-colonization

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

이 프로토콜은 성장과 질적으로 공 초점 및 전자 현미경으로 곰팡이 균사에 세균 바이오 필름을 분석하는 새로운 방법을 설명합니다.

새로운 방법 사상 진균 식민지에 세균 바이오 필름의 질적 다중 스케일 분석을 위해 사용 공 촛점 및 전자 현미경

주사 전자 현미경 관찰을 위한 생물학적 샘플 처리의 문제에는 세포 붕괴, 습한 미세 환경의 샘플 처리 및 세포 파괴가 포함됩니다. 꽃 분열 분열체, 난균 낭종 및 곰팡이(Agaricales)와 같은 까다로운 샘플을 준비하는 데 적합한 저렴하고 비교적 빠른 프로토콜이 여기에 컴파일되고 자세히 설명되어 있습니다.

문제있는 공장, 난균 강 및 곰팡이 샘플에 대한 전자 현미경 (SEM) 프로토콜을 스캔

여기 우리는 초보자에 대 한 프로토콜 Streptomyces약리학 중요 한 세균 속에 대 한 형질을 시작 하는 연구원을 제시.

Streptomyces 발달 돌연변이의 영상 및 현미경 평가

이 논문에서는 스틸, 형광 이미지 및 고해상도 투과 전자 현미경 이미지를 사용하여 연구되는 크립토코카인 세포 및 아메바의 공동 배양을 준비하기 위한 프로토콜을 자세히 설명합니다. 여기에 예시된 것은 정량적 데이터가 이러한 정성적 정보를 보완하는 방법입니다.

크립토코커스-아메바 상호 작용 을 연구할 때 현미경 기술과 형광 읽기의 상호 보완적 사용

중요한 형광 염료는 현대 곰팡이 세포 생물학에 있는 살아있는 세포 화상 진찰 분석을 위한 필수적인 공구입니다. 이 논문은 필라멘트 균류에서 플라즈마 막 역학, 내분비 / 외신 세포증 및 세포 벽 형태 형성을 추적하기위한 확립되고 덜 알려진 형광 염료의 응용 프로그램에 대해 자세히 설명합니다.

필라멘트 곰팡이의 살아있는 세포 이미징을 위한 막 및 세포벽 선택적 형광 염료의 적용

Micro-CT는 식물 구조를 3차원으로 분석할 수 있는 비파괴 도구입니다. 현재 프로토콜은 기생 식물 구조 및 기능을 분석하기 위해 마이크로 CT를 활용하기 위한 샘플 준비를 설명합니다. 특정 제제와 결합 될 때이 방법의 장점을 강조하기 위해 다른 종이 사용됩니다.

Micro-CT 스캐닝을 활용하여 기생 식물-숙주 상호작용 분석

여기의 프로토콜은 Zea mays 와 Festuca rubra의 두 종에 대한 뿌리의 arbuscular mycorrhizal 식민지화 패턴과 전략을 평가하는 방법을 설명합니다. MycoPatt 방법을 사용하면 매개 변수 계산, 균근 구조를 디지털 데이터로 변환하고 뿌리에서 실제 위치를 매핑 할 수 있습니다.

Festuca rubra와 Zea mays의 뿌리에서 식민지화 패턴과 곰팡이 전략을 탐구하는 도구로서의 균근 지도

토양의 불투명도로 인해 구성 미생물 간의 상호 작용은 세포 분해능으로 쉽게 시각화 될 수 없습니다. 여기에서는 곰팡이 - 미생물 상호 작용을 조사하기위한 새로운 기회를 제공하는 두 가지 미세 유체 도구가 제시됩니다. 이 장치는 다재다능하고 사용하기 쉬우므로 세포 수준에서 높은 시공간 제어 및 고해상도 이미징이 가능합니다.

세포 수준에서 곰팡이 - 미생물 상호 작용을 조사하기위한 미세 유체 도구

현재 논문은 식물 관련 내생균의 분리, 분리물의 장기 보존, 형태학적 특성 분석 및 후속 분자 식별 및 균유전체 분석을 위한 전체 DNA 추출을 위한 상세하고 적절한 프로토콜을 제공하는 것을 목표로 합니다.

Mycoheterotrophic 식물에서 내생균 균류를 식별하기 위한 분리, 특성화 및 전체 DNA 추출

이 원고는 곰팡이 식물 병원체와의 옥수수 상호 작용에 대한 재현 가능한 세포학적, 생리학적, 분자적 연구를 위해 분리된 옥수수 잎 덮개를 사용하는 최적화된 접종 프로토콜을 자세히 설명합니다. 잎 덮개는 고정되지 않은 조직에서 살아있는 식물과 곰팡이 사이의 세포 상호 작용을 실시간으로 관찰할 수 있도록 합니다.

곰팡이 잎 옥수수 병원체에 의한 감염의 살아있는 세포 이미징을 위한 분리된 옥수수 덮개

여기에서는 초흡수성 고분자 기반 독립 영양 시스템에서 arbuscular mycorrhizal fungi를 접종하고 관찰하기 위한 간단하고 저렴한 기술에 대해 설명합니다.

Superabsorbent Polymer-based Autotrophic Systems에서 Arbuscular Mycorrhizal Cultures 접종 및 관찰

배우세요 균종속영양 식물의 곰팡이 집락화를 현미경 기술로 분석하는 방법을. 주사전자현미경과 투과전자현미경을 활용해 균근 상호작용과 식물 조직의 구조를 상세히 관찰할 수 있습니다.

균종속영양 식물 조직의 곰팡이 집락화 및 종자의 공생 발아를 해석하기 위한 현미경 기술

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