Name: 이미지 획득을 통한 피부암의 비침습적 진단을 위한 반사율 공초점 현미경과 광간섭 단층촬영의 결합 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-18T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 37 s
Description: 학습하세요 반사율 공초점 현미경과 광간섭 단층촬영을 결합한 비침습적 피부암 진단 방법을. 병상에서 고해상도 이미지를 획득하여 조기 피부암을 감지하고 불필요한 생검을 줄이며 환자 대기 시간과 불안을 감소시킵니다.

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이미징 자원 봉사자가 된 Kwami Ketosugbo와 Emily Cowen에게 특별한 감사를 전합니다. 이 연구는 메모리얼 슬론 케터링 암 센터(Memorial Sloan Kettering Cancer Center)에 대한 국립 암 연구소(National Cancer Institute)/국립 보건원(National Institutes of Health)(P30-CA008748)의 보조금으로 자금을 지원받습니다.

아래에 설명된 모든 프로토콜은 기관 인간 연구 윤리 위원회의 지침을 따릅니다.
1. RCM 장치 및 이미징 프로토콜
참고: 상업적으로 이용 가능한 생체 내 RCM 장치에는 와이드 프로브 RCM(WP-RCM)과 휴대용 RCM(HH-RCM)의 두 가지가 있습니다. WP-RCM은 디지털 피부경 검사와 통합되어 제공됩니다. 이 두 장치는 별도로 또는 결합된 장치로 사용할 수 있습니다. 다음은 최신 세대(4세대)의 WP-RCM 및 HH-RCM 장치를 사용한 이미지 획득 프로토콜과 임상 적응증입니다.
<ol><li>병변 선택 및 임상 적응증<ol><li>다음과 같은 유형의 병변을 찾으십시오 : 피부경 적으로 모호한 분홍색 (BCC, 편평 상피 세포 암종 [SCC], 광선 각화증 [AK], 기타 양성 병변) 또는 색소 병변 (모반 및 흑색 종, 색소 각질 세포 병변); 최근 임상 또는 피부경 검사에서 변경된 모반; 염증 패턴을 결정하는 염증성 병변.</li>
		<li>악성 흑색점(LM) 변연에 대한 매핑을 수행하여 병변의 범위를 결정하고 유방외 파제트병(EMPD) 및 LM과 같은 무증상 확장이 있는 질병에 대한 생검 부위의 매핑 및 선택을 수행합니다.</li>
		<li>국소 약물(이미퀴모드), 방사선, 광역학 요법 및 레이저 절제와 같은 비수술적 치료의 비침습적 모니터링을 수행합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>장치 선택의 경우 비교적 평평한 피부 표면(몸통 및 사지)에 위치한 병변에는 WP-RCM 장치를 사용하고 곡면(코, 귓볼, 눈꺼풀 및 생식기)의 병변에는 HH-RCM 장치를 사용합니다. 참고: 영상 장치의 선택은 주로 병변의 위치에 따라 달라집니다.</li>
	<li>이미징을 위해 환자를 완전히 리클라이닝 의자나 베개 또는 팔걸이가 있는 평평한 검사 테이블에 배치하여 지지하고 평평한 이미징 표면을 만듭니다. 참고: 이전 세대(3세대) WP-RCM 장치는 병변당 ~30분이 소요되었습니다. 단일 병변을 영상화하는 데 현재 클리닉에서 사용 중인 신세대(4세대) WP-RCM 장치로 ~15분이 소요될 수 있습니다. 향상된 획득 시간에도 불구하고 환자를 편안하게 배치하면 움직임 아티팩트를 최소화하고 우수한 품질의 이미지를 획득하는 데 도움이 됩니다. 다음 단계는 환자를 올바르게 배치하는 데 도움이 될 수 있습니다.</li>
	<li>이미징을 준비하려면 알코올 물티슈로 병변과 주변 피부를 닦아 먼지, 로션 또는 메이크업을 제거합니다. 조직 미세 구조의 시각화를 방해할 수 있는 기포를 피하기 위해 조직 창을 부착하기 전에 털이 많은 피부 표면을 면도하십시오. 알림: 무거운 화장품이나 자외선 차단제를 제거하려면 알코올로 청소하기 전에 순한 비누와 물로 부위를 청소하십시오.</li>
	<li>WP-RCM 장치(그림 1, 그림 2, 보충 그림 S1, 보충 그림 S2그리고 보충 그림 S3) 참고: WP-RCM 장치는 스택, 모자이크, 라이브 단일 프레임 비디오 및 단일 프레임 이미지를 캡처할 수 있습니다.<ol><li>일회용 플라스틱 창 캡을 병변에 부착하려면(그림 1) 최상의 이미지를 위해 프로브를 병변에 수직으로 배치합니다. 예를 들어 그림 1A-F를 참조하십시오.amp부착의 파일. 플라스틱 창 중앙에 미네랄 오일 한 방울을 추가하고 창 너비에 걸쳐 조심스럽게 펴 바릅니다(그림 1A). 플라스틱 창의 접착면에서 종이 뒷면을 제거합니다. 주름이 생기지 않도록 피부를 부드럽게 펴고 창을 부착하십시오. 알림: 안전하고 점도가 높은 식품 등급의 미네랄 오일을 사용하십시오. 병변이 중앙에 있고 전체가 덮여 있는지 확인하십시오. 8mm x 8mm보다 큰 병변의 경우 피부경 검사를 기반으로 관심 영역을 이미지화하거나 전체 병변을 덮기 위해 별도의 이미징 세션을 수행합니다.</li>
		<li>피부경 영상 획득(그림 1C,D) 참고: dermoscopy 이미지는 병변 내 탐색을 위한 가이드 역할을 하기 위해 획득됩니다. 다음 단계는 dermoscopy 이미지와 confocal 이미지 사이의 완벽한 등록을 보장하기 위해 사용되어야 합니다.<ol><li>WP-RCM 프로브를 플라스틱 창 캡 위로 가져가 프로브에 가장 적합한 삽입 각도를 대략적으로 구합니다(그림 1C). 프로브 측면에 있는 작은 흰색 화살표(그림 1C)를 찾아 더모스코피 카메라 측면에 있는 화살표에 맞춥니다(그림 1C).</li>
			<li>dermoscopy 카메라를 플라스틱 창 캡에 삽입합니다(그림 1D). 카메라의 트리거를 눌러 이미지를 획득합니다. dermatoscope를 제거하십시오. 이미징 세션을 시작하기 전에 피부경 이미지가 전체 병변 표면을 덮고 있는지 확인하십시오.</li>
		</ol></li>
		<li>RCM 프로브를 플라스틱 일회용 캡(그림 1E,F)에 부착하려면 일회용 플라스틱 창 캡 안에 완두콩 크기의 초음파 젤을 넣습니다(그림 1E). 날카로운 딸깍 소리가 들릴 때까지 캡 안에 프로브를 삽입합니다(그림 1F). 알림: 최상의 이미지를 얻으려면 프로브를 플라스틱 창에 수직으로(90° 각도로) 삽입하십시오. 검사 의자의 높이를 높여 표면을 더 평평하게 만들고, 움직임 아티팩트를 줄이고, 기포를 배출하고(그림 3 및 그림 4) 피부에 안전하게 부착할 수 있습니다.</li>
		<li>RCM 이미지 획득(그림 2, 보충 그림 S1 및 보충 그림 S2)<ol><li>RCM 이미지 획득을 안내하기 위해 dermoscopy 이미지(단계 5.2.)를 사용합니다(보충 그림 S1). 병변의 중심을 선택하고 피부의 최상층 (가장 밝은) 층, 즉 각질층의 핵 층을 확인하십시오 (보충 그림 S1).</li>
			<li>이 수준에서 이미징 깊이 를 0 으로 설정합니다(보충 그림 S1). 참고: 이 깊이는 병변 내 후속 층의 실제 z-깊이를 결정하기 위한 기준점 역할을 합니다.</li>
			<li>스택 아이콘을 눌러 병변 중앙에 스택을 획득합니다(그림 2 및 보충 그림 S1). 드롭다운 메뉴에서 해부학적 부위(얼굴 또는 몸)를 선택합니다. 4.5μm 스텝 크기와 250μm 깊이를 설정합니다. 알림: 각질층에서 스택을 시작하여 진피에서 가장 깊은 가시 층에서 끝납니다. 보충 그림 S1 은 스택을 획득하는 방법의 예를 보여 주며 그림 2 는 스택의 예를 보여줍니다.</li>
			<li>모자이크 획득: 피부-표피 접합부(DEJ)에서 첫 번째 모자이크를 가져옵니다(보충 그림 S2). 획득한 스택에서 DEJ 층을 식별한 다음 마우스를 사용하여 전체 병변을 덮을 8mm x 8mm 정사각형을 선택합니다. 모자이크 아이콘을 눌러 작업을 완료합니다(보충 그림 S2). 다양한 깊이에서 최소 5개의 모자이크를 획득합니다: 각질층, 척수층, 기저상층, DEJ 및 표재성 유두 진피.</li>
			<li>DEJ 모자이크를 열어 후속 모자이크의 획득을 안내합니다. DEJ 모자이크의 구조를 클릭하면 라이브 뷰 이미지에서 해당 영역을 불러올 수 있습니다. 아래로 스크롤하여 진피에서 모자이크를 얻은 다음 위로(DEJ에서) 표피에서 모자이크를 가져옵니다.</li>
			<li>침대 옆에 있는 전문 RCM 리더가 획득한 모자이크를 평가하여 관심 영역을 식별하고 스택을 가져옵니다. 침대 옆에 전문가가없는 경우, 각 사분면에 하나씩, 병변 중앙에 하나씩 5 개의 스택을 캡처하여 dermoscopy에서 균질 한 패턴을 갖습니다 (1.5.2 단계). 이질적인 병변의 경우 모든 dermoscopy 기능을 포괄하기 위해 추가 스택을 확보하십시오. 참고: "스택"(그림 2)은 표피의 최상층에서 표재성 진피(~200μm)까지 깊이로 획득한 고해상도, 단일 프레임, 작은 시야(FOV) 이미지(0.5mm x 0.5mm)의 순차적 모음입니다. "모자이크"(보충 그림 S2)는 개별 500μm x 500μm 이미지를 "XY"(수평 en 면 평면)로 함께 스티칭하여 얻은 이미지의 큰 FOV입니다.</li>
		</ol></li>
		<li>이미징 세션 완료<ol><li>Done Imaging(이미징 완료)을 클릭합니다.</li>
			<li>플라스틱 창에서 현미경을 분리합니다. 환자의 피부를 팽팽하게 잡고 플라스틱 창을 제거하고 폐기하십시오. 알코올 면봉으로 피부의 기름을 닦아냅니다.</li>
			<li>현미경 렌즈를 둘러싼 보호 원뿔을 분리합니다. 알코올 면봉으로 대물 렌즈의 끝을 청소하여 초음파 젤을 제거합니다. 종이 타월로 대물 렌즈를 말리십시오. 플라스틱 콘을 현미경 프로브에 다시 부착합니다. 알림: 이미지를 읽을 수 있으며 훈련된 의사가 침대 옆에서 보고서를 생성하고 서명할 수 있습니다. 전문 리더가 없는 경우, 원격 전문가는 클라우드를 통해 또는 라이브 텔레콘포칼 세션(live teleconfocal session)을 통해 이미지를 전송함으로써 상담될 수 있다(26).</li>
		</ol></li>
		<li>공초점 진단 평가 보고서 생성(보충 그림 S3)<ol><li>New Evaluation(새 평가)을 클릭합니다. 드롭다운 메뉴에서 미리 선택된 옵션에서 진단을 입력합니다.</li>
			<li>다른 이미징 세션이 필요한 경우 이미지를 부적절하고 다시 캡처해야 합니다. 서술적 진단이 필요한 경우 양식 끝에 있는 자유 텍스트 상자에서 기타 를 선택하고 설명합니다. 청구7에 대한 CPT 코드를 입력합니다(보충 그림 S3A). 보고서 체크리스트에서 이미징 중에 표시되는 해당 기능을 선택합니다(보충 그림 S3B). 체크리스트에서 해당 관리를 선택해 주십시오. 참고: HH-RCM 이미징에는 청구 코드가 적용되지 않습니다.</li>
			<li>Finish and Sign(마침 및 서명)을 클릭합니다. 보고서를 PDF로 생성하고 인쇄합니다. 의사가 서명한 보고서를 받아 청구를 위해 환자의 차트에 추가합니다.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
	<li>HH-RCM 장치를 사용한 이미지 획득(그림 5) 알림: HH-RCM 장치는 스택, 라이브 단일 프레임 비디오 및 단일 프레임 이미지를 캡처할 수 있습니다.<ol><li>의사가 확인한 병변을 종이 고리로 둘러 쌉니다. 섹션 3에 자세히 설명된 단계를 사용합니다. 환자의 위치를 지정하고 병변 부위를 청소합니다. 참고: 병변 크기에 따라 종이 링의 크기(5-15mm)를 선택하여 병변의 경계를 정의하고 병변 내에서 이미징이 수행되도록 합니다. 종이 링을 사용할 수 없는 경우 종이 테이프를 사용하여 병변을 정의하십시오.</li>
		<li>현미경 렌즈를 덮고 있는 플라스틱 캡을 제거합니다. 완두콩 크기의 초음파 젤을 HH-RCM의 대물 렌즈에 바르고 플라스틱 캡으로 덮습니다(보충 그림 S3A). 피부에 닿을 플라스틱 캡 측면에 미네랄 오일을 넉넉히 떨어뜨립니다. 알림: 필요한 경우 매우 건조한 피부의 경우 유분의 양을 늘리십시오.</li>
		<li>프로브를 피부의 병변 부위에 강한 압력으로 누릅니다. HH-RCM 장치의 z-깊이 컨트롤을 사용하여 병변 내의 다양한 깊이에서 위아래로 움직입니다(보충 그림 S3B). 관심 영역에서 여러 개의 단일 프레임 이미지와 스택을 수집합니다. 1.5.4.3 단계에서 설명한대로 스택을 가져옵니다.</li>
		<li>WP-RCM 장치를 부착할 수 없는 큰 병변의 경우 HH-RCM 프로브를 병변 표면 전체에 걸쳐 움직여 다양한 레이어에서 연속 동영상을 촬영합니다. 그렇게 하려면 비디오 캡처 기호 를 클릭하십시오. 필요한 경우 혈관 내 혈액 세포의 움직임을 기록합니다. 참고: 이 비디오는 나중에 소프트웨어를 사용하여 연결하여 모자이크와 유사한 큰 FOV 이미지를 제공할 수 있습니다.</li>
		<li>이미징 세션이 완료된 후 Done Imaging 을 누릅니다. 알코올 면봉으로 병변을 청소하여 기름을 제거하십시오. 알코올 물티슈로 청소하고 플라스틱 캡을 다시 부착하여 프로브의 대물 렌즈에서 초음파 젤을 제거합니다. 알림: 기술자가 조작할 수 있는 WP-RCM 장치와 달리 HH-RCM은 실시간으로 이미지를 해석하여 병변 내부를 탐색하고 정확한 진단에 도달할 수 있는 RCM 판독기로 작동해야 합니다.</li>
	</ol></li>
</ol>2. RCM-OCT 장치 및 이미징 프로토콜 결합
주: RCM-OCT 장치의 프로토타입은 하나뿐입니다. 이 장치에는 휴대용 프로브가 있으며 HH-RCM 장치와 유사하게 모든 신체 표면에 사용할 수 있습니다. RCM 스택(RCM 장치와 유사)과 OCT 래스터(순차적 단면 이미지22의 비디오)를 획득합니다. RCM 및 OCT 이미지는 모두 회색조로 표시됩니다. RCM 이미지의 FOV는 ~200μm x 200μm인 반면 OCT 이미지의 FOV는 2mm(너비) x 1mm(깊이)입니다. 아래는 RCM-OCT 장치를 사용한 이미지 획득 프로토콜과 임상 적응증입니다. 그림 6 은 RCM-OCT 장치의 이미지이고 그림 7 은 RCM-OCT 장치의 소프트웨어 시스템을 보여줍니다.
<ol><li>병변 선택<ol><li>BCC를 배제하기 위해 피부경적으로 모호한 분홍색 또는 색소 병변을 찾으십시오.</li>
		<li>관리를 위한 BCC의 깊이를 평가하고 치료 후 잔류 BCC를 평가합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>영상 촬영을 위한 환자 위치 지정: RCM-OCT 장치를 사용하여 단일 병변을 영상화하는 데 최대 20분이 소요될 수 있습니다. 이 장치는 또한 HH-RCM 장치와 유사한 휴대용 프로브이므로 병변 위로 자유롭게 이동할 수 있습니다. 환자 위치에 대한 자세한 내용은 섹션 1.4를 참조하십시오. 위.</li>
	<li>이미징 부위 준비: 이 프로브를 사용할 때 병변의 경계에 과도한 모발과 국소 불순물이 없고 명확하게 정의되어 있는지 확인하십시오. 1.4.1단계를 참조하십시오. 자세한 내용은 위에.</li>
	<li>RCM-OCT 장치를 사용한 이미지 획득(그림 6 및 그림 7)<ol><li>HH-RCM에 사용된 것과 유사하게 프로브를 준비합니다(1.6.1-1.6.2 단계).</li>
		<li>라인 이미징 모드와 래스터 모드에서 이미지를 수집합니다.<ol><li>이미징 설정을 클릭합니다(그림 7A). 라인 이미징 모드를 선택하여 RCM 이미지(셀룰러 해상도)를 획득합니다(그림 7B). 스텝 크기를 5μm로 설정하고 스텝 수를 40으로 설정합니다(그림 7A).</li>
			<li>Grab을 클릭합니다. 1.5.4.3단계에 따라 스택을 획득합니다. 완료되면 동결 버튼을 클릭합니다.</li>
			<li>이미징 설정을 클릭합니다. 래스터 모드를 선택하여 병변 구조에 대한 상관 OCT 비디오를 획득합니다(그림 7B). 기술자 탭으로 전환합니다(그림 7C). 완료되면 잡기 버튼(그림 7A)을 클릭하고 즉시 저장 버튼을 누릅니다.</li>
			<li>의사의 관심에 따라 여러 스택과 비디오를 획득합니다.</li>
			<li>1.6.5 단계에 설명 된대로 병변과 기계를 청소하십시오.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
</ol>

Ucalene Harris는 경쟁하는 재정적 이해 관계가 없습니다. Dr. Jain은 Enspectra Health Inc.의 컨설턴트이며, Dr. Milind Rajadhyaksha는 VivaScope 컨포칼 현미경을 제조 및 판매하는 회사인 Calibre ID(구 Lucid Inc.)의 전직 직원이자 지분을 소유하고 있습니다. VivaScope는 Rajadhyaksha 박사가 하버드 의과대학 매사추세츠 종합병원에 있을 때 개발한 오리지널 실험실 프로토타입의 상용 버전입니다.

이 기사에서는 생체 내 RCM 및 RCM-OCT 장치를 사용한 이미지 획득을 위한 프로토콜에 대해 설명했습니다. 현재 상업적으로 이용 가능한 RCM 장치는 와이드 프로브 또는 암 장착형 RCM(WP-RCM) 장치와 핸드헬드 RCM(HH-RCM) 장치의 두 가지가 있습니다. 임상 환경에서 이러한 장치를 언제 사용해야 하는지 이해하는 것이 중요합니다. 암 유형과 위치는 장치 선택을 결정하는 주요 요소입니다.
WP-RCM 장치는 피부와의 접촉이 필요하기 때문에 몸통 및 사지와 같이 평평하고 완만하게 물결치는 신체 표면의 병변에 매우 적합합니다. 프로브 헤드가 넓기 때문에 본체의 좁은 부분이나 모서리에 부착할 수 없습니다. 그러나 HH-RCM은 더 유연한 장치이며 프로브 헤드가 더 좁습니다. 결과적으로 이 장치는 WP-RCM을 부착할 수 없는 코, 눈꺼풀, 귓볼, 생식기 등 신체의 구부러지고 상대적으로 기복이 심한 부위의 병변을 영상화하는 데 자주 사용됩니다.
<...

전통적으로 피부암의 진단은 병변을 육안으로 검사한 다음 피부경이라는 돋보기를 사용하여 의심스러운 병변을 자세히 관찰하는 데 의존합니다. 피부경은 피부암 진단을 위한 육안 검사보다 민감도와 특이도를 높이는 지하 정보를 제공한다 1,2. 그러나 피부경 검사는 세포 세부 사항이 부족하여 종종 조직 병리학 적 확인을 위해 생검으로 이어집니다. 피부경 검사3의 특이도가 낮고 가변적(67%에서 97%)은 병리상 양성 병변을 보이는 위양성 및 생검을 초래한다. 생검은 출혈과 통증을 유발하는 침습적 시술일 뿐만 아니라4 흉터로 인해 얼굴과 같이 미용적으로 민감한 부위에도 매우 바람직하지 않다.
현존하는 한계를 극복함으로써 환자 치료를 개선하기 위해, 많은 비침습적 생체 내 이미징 장치가 탐색되고 있다 5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18 . RCM 및 OCT 장치는 피부 병변, 특히 피부암을 진단하는 데 사용되는 두 가지 주요 광학 비침습적 장치입니다. RCM은 미국에서 CPT(Current Procedural Terminology) 청구 코드를 획득했으며 학술 3차 진료 센터 및 일부 사립 클리닉에서 점점 더 많이 사용되고 있습니다 7,8,19. RCM은 거의 조직학적(세포) 해상도로 병변을 이미지화합니다. 그러나 이미지는 en-face 평면(한 번에 한 층의 피부 시각화)에 있으며 이미징 깊이는 ~200μm로 제한되어 표재성(유두) 진피에만 도달하기에 충분합니다. RCM 이미징은 피부의 다양한 구조의 반사율 대비에 의존합니다. 멜라닌은 가장 높은 대비를 부여하여 색소 병변을 밝고 진단하기 쉽게 만듭니다. 따라서 피부경 검사와 결합된 RCM은 흑색종을 포함한 색소 병변의 피부경 검사에 비해 진단(민감도 90%, 특이도 82%)을 크게 개선했습니다20. 그러나 분홍색 병변, 특히 BCC의 경우 멜라닌 조영제가 부족하기 때문에 RCM은 특이도가 낮습니다(37.5%-75.5%)21. 일반적으로 사용되는 또 다른 비침습적 장치인 기존의 OCT 장치는 피부 내에서 최대 1mm 깊이의 병변을 이미지화하고 수직면(조직병리학과 유사)으로 시각화합니다9. 그러나 OCT에는 셀룰러 해상도가 부족합니다. OCT는 주로 각질형성 병변, 특히 BCC를 진단하는 데 사용되지만, 여전히 특이도는 낮다9.
따라서, 이러한 장치들의 기존의 한계를 극복하기 위해, 멀티모달 RCM-OCT 장치(22)가 구축되었다. 이 장치는 RCM과 OCT를 단일 핸드헬드 이미징 프로브 내에 통합하여 병변의 공동 등록된 en-face RCM 이미지와 수직 OCT 이미지를 동시에 획득할 수 있습니다. OCT는 병변의 구조적 세부 사항을 제공하고 피부 내 더 깊게(최대 ~1mm 깊이) 이미지화할 수 있습니다. 또한 휴대용 RCM 장치(~0.75mm x 0.75mm)에 비해 ~2mm 22의 더 큰 시야(FOV)를 가지고 있습니다. RCM 이미지는 OCT에서 확인된 병변의 세포 세부 정보를 제공하는 데 사용됩니다. 이 프로토 타입은 아직 상용화되지 않았으며 클리닉23,24,25에서 연구 장치로 사용되고 있습니다.
피부암의 진단 및 관리를 개선하는 데 성공했음에도 불구하고(문헌에 의해 뒷받침됨) 이러한 장치는 아직 클리닉에서 널리 사용되지 않습니다. 이는 주로 이러한 영상을 판독할 수 있는 전문가가 부족하기 때문이기도 하지만, 병상8에서 진단 품질의 영상을 효율적으로(임상 시간 내에) 획득할 수 있는 훈련된 기술자가 부족하기 때문이기도 하다. 이 원고의 목표는 클리닉에서 이러한 장치에 대한 인식과 궁극적인 채택을 촉진하는 것입니다. 이 목표를 달성하기 위해 피부과 의사, 피부병리학 의사 및 모스 외과의에게 RCM 및 RCM-OCT 장치로 획득한 정상 피부 및 피부암 이미지를 익히도록 합니다. 또한 피부암 진단을 위한 각 장치의 유용성에 대해서도 자세히 설명합니다. 가장 중요한 것은 이 원고의 초점이 이러한 장치를 사용하여 이미지 획득에 대한 단계별 지침을 제공하여 임상용으로 좋은 품질의 이미지를 보장하는 것입니다.

<table><tbody><tr><td>크리스탈 플러스 500FG 미네랄 오일</td><td>STE Oil Company, Inc.</td><td></td><td>in vivo imaging 동안 다양한 장치와 함께 사용되는 식품 등급의 고점도 미네랄 오일입니다.</td></tr><tr><td>RCM-OCT</td><td>피지컬 사이언스 주식회사</td><td>-</td><td>ᅡ " 멀티 모달" 결합된 RCM-OCT 장치는 수평 및 수직 모드에서 피부 병변을 동시에 이미징합니다.</td></tr><tr><td>비바스코프 1500</td><td>칼리버 I.D.</td><td>-</td><td>피부에 부착하여 in vivo 장치를 캠핑하는 와이드 프로브 RCM(WP-RCM) 장치.</td></tr><tr><td>비바스코프 3000</td><td>칼리버 I.D.</td><td>-</td><td>피부를 가로질러 움직여 in vivo 이미지를 캡처하는 휴대용 RCM(HH-RCM) 장치입니다.</td></tr></tbody></table>

이미지 획득을 통한 피부암의 비침습적 진단을 위한 반사율 공초점 현미경과 광간섭 단층촬영의 결합

Combining Reflectance Confocal Microscopy with Optical Coherence Tomography for Noninvasive Diagnosis of Skin Cancers via Image Acquisition

피부암은 전 세계적으로 가장 흔한 암 중 하나입니다. 진단은 육안 검사와 피부경 검사에 의존한 후 조직병리학적 확인을 위한 생검에 의존합니다. 피부경 검사의 민감도는 높지만 특이도가 낮을수록 생검의 70%-80%가 조직병리학에서 양성 병변으로 진단됩니다(피부경 검사에서 위양성).
반사 공초점 현미경(RCM) 및 광간섭 단층 촬영(OCT) 영상은 피부암 진단을 비침습적으로 안내할 수 있습니다. RCM은 en-face 레이어에서 세포 형태를 시각화합니다. 피부경 검사보다 흑색종 및 색소성 각질형성 피부암의 진단 특이성을 두 배로 늘려 양성 병변의 생검 횟수를 절반으로 줄였습니다. RCM은 미국에서 청구 코드를 획득했으며 현재 클리닉에 통합되고 있습니다.
그러나 이미징의 얕은 깊이(~200μm), 착색되지 않은 피부 병변에 대한 열악한 대비, 안면 레이어의 이미징과 같은 제한으로 인해 비색소 기저 세포 암종(BCC)의 검출에 대한 특이도가 상대적으로 낮습니다. 대조적으로, OCT는 세포 해상도가 부족하지만 수직면의 조직을 ~1mm 깊이까지 이미지화하여 BCC의 표면 및 더 깊은 하위 유형을 모두 검출할 수 있습니다. 따라서 두 기술 모두 본질적으로 상호 보완적입니다.
"멀티 모달" 결합 RCM-OCT 장치는 en-face 및 vertical 모드 모두에서 피부 병변을 동시에 이미지화합니다. BCC의 진단 및 관리에 유용합니다(표재성 BCC에 대한 비수술적 치료 대 더 깊은 병변에 대한 외과적 치료). RCM 단독에 비해 작고 착색되지 않은 BCC를 검출하는 경우 특이성이 현저히 향상되었습니다. RCM 및 RCM-OCT 장치는 피부암의 진단 및 관리에 주요 패러다임 전환을 가져오고 있습니다. 그러나 그들의 사용은 현재 학술 3차 진료 센터 및 일부 사립 클리닉으로 제한되어 있습니다. 이 백서는 임상의가 이러한 장치와 그 응용 분야에 익숙해지도록 하여 일상적인 임상 워크플로에 대한 번역 장벽을 해결합니다.

반사율 컨포칼 현미경(RCM) RCM의 이미지 해석: RCM 이미지는 조직병리학 슬라이드의 평가를 모방하는 방식으로 해석됩니다. 모자이크는 먼저 평가되어 전반적인 아키텍처 세부 사항을 파악하고 관심 영역을 식별하며, 이는 스캐닝 배율(2x)에 대한 조직학 섹션의 평가와 유사합니다. 그런 다음 고배율(20x)에서 슬라이드를 평가하는 것과 유사하게 세포 세부 사항을 평가하기 위해 모자이크를 확대합니다. 도 8 은 이러한 이미지 분석의 스키마를 나타낸다.
이미지 품질: 피부의 관련 깊이에서 획득 한 중요한 인공물이없는 고품질 이미지는 정확한 진단에 필수적입니다. 도 4A는 이러한 이미지 중 하나를 나타낸다. 해석할 수 없는 이미지의 주된 이유는 아티팩트 또는 이미지 획득 경...

여기에서는 반사 공초점 현미경(RCM)과 결합된 RCM 및 광간섭 단층 촬영(OCT)의 새로운 비침습적 이미징 장치를 사용하여 양질의 이미지를 획득하기 위한 프로토콜을 설명합니다. 또한 임상의가 임상 적용에 익숙해지도록 하여 기술을 정기적인 임상 워크플로에 통합하여 환자 치료를 개선할 수 있도록 합니다.

Skin cancer is one of the most common cancers worldwide. Diagnosis relies on visual inspection and dermoscopy followed by biopsy for histopathological ...

이 프로토콜은 침대 옆에서 RCM 및 RCM-OCT 장치에 대한 이미지 획득 단계를 자세히 설명합니다. 피부 병변의 정확한 진단과 관리를 위해 좋은 품질의 이미지를 얻는 것이 필수적입니다. 이 장치는 생체 내에서 조직병리학적 해상도로 피부를 이미지화하여 조기 피부암을 감지하면서 불필요한 양성 생검을 저장합니다.진단은 침대 옆에서 이루어 지므로 환자의 대기 시간과 불안을 줄일 수 있습니다. 이 현미경으로 이미징하면 침대 옆에서 환자의 피부 병변 및 피부암을 비침습적으로 감지하고 진단할 수 있습니다. 또한 영상은 피부 병변을 피상적일 수 있는 병변과 더 깊을 수 있는 병변으로 분류하여 치료를 안내하는 데 도움이 됩니다.따라서 이미징은 진단과 치료를 단일 환자 방문으로 통합하거나 결합하는 데 도움이 되며, 이는 현재 원스톱 상점 환자 치료 패러다임으로 불리고 있습니다. 이미징을 사용하여 피부 병변과 피부암을 감지하고 진단하는 것 외에도 이미징을 사용하여 환자의 구강 병변 및 구강암을 감지하고 진단합니다. 절차를 시연하는 것은 제 실험실의 조직학자인 Ms. Ucalene Harris가 될 것입니다.시작하려면 몸통 및 사지와 같은 피부의 평평한 표면에 위치한 병변에 대해 WP-RCM 장치를 선택하고 코, 귓불, 눈꺼풀 및 생식기와 같은 곡면의 병변에 대해 HH-RCM 장치를 선택하십시오. 영상을 위해 환자를 완전히 뒤로 젖히는 의자나 지지대가 있는 평평한 검사 테이블에 놓습니다. 그런 다음 알코올 물티슈로 병변과 주변 피부를 닦으십시오.플라스틱 창 중앙에 미네랄 오일 한 방울을 넣고 창 너비에 조심스럽게 펴 바릅니다. 창의 접착면에서 페이퍼백을 제거하고 피부를 부드럽게 펴고 창을 부착합니다. WP-RCM 장치를 사용하여 이미지를 획득하려면 프로브를 병변에 수직으로 배치합니다.그런 다음 플라스틱 창 캡 위에 WP-RCM 프로브를 올려 피부경 이미지를 획득하고 프로브에 가장 적합한 삽입 각도를 추정합니다. 프로브 측면에 있는 작은 흰색 화살표를 dermoscopy 카메라 측면에 있는 화살표에 맞춥니다. dermoscopy 카메라를 플라스틱 창 캡에 삽입합니다.피부경 이미지가 전체 병변 표면을 덮고 있는지 확인하고 카메라의 방아쇠를 눌러 이미지를 획득합니다. 그런 다음 dermatoscope를 제거하십시오. 그런 다음 완두콩 크기의 초음파 젤을 일회용 플라스틱 창 캡 안에 넣습니다.날카로운 딸깍 소리가 날 때까지 RCM 프로

combining-reflectance-confocal-microscopy-with-optical-coherence

Research

연구

JoVE Journal

Cancer Research

암 연구

이중 모드 이미징 시스템은 피부 조직의 산소와 혈관 기능의 비 접촉 평가 위해 개발되었습니다.

피부 조직 산소와 혈관 기능의 듀얼 모드 영상

Photoacoustic 안과 (PAOM), 광 - 흡수 기반 이미징 양상은 현재 안과 이미징 기술로 망막의 보완 평가를 제공합니다. 우리는 쥐의 동시 multimodal 망막 이미징을위한 스펙트럼 영역 광 간섭 단층 촬영의 (SD -10 월)와 통합 PAOM의 사용을보고합니다.

통합 Photoacoustic Ophthalmoscopy 및 스펙트럼 도메인 광 결맞음 단층 촬영 장치

출처: Jagodzinska, J., et. al., Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo. J. Vis. 특급. (2017) &lt;br /&gt; 이 비디오에서는 SD-OCT(spectral-domain optical coherence tomography)를 사용하여 망막층을 이미지화하고 시신경병증이 있는 유전자 변형 마우스 모델의 구조적 변화를 평가하는 방법을 보여줍니다.

광간섭 단층촬영(Optical Coherence Tomography)을 사용한 마우스 망막의 In vivo 이미징

출처: Huang, Y. et. al., 광간섭 단층촬영을 사용한 3차원 종양 스페로이드의 종단적 형태학적 및 생리학적 모니터링. J. Vis. Exp. (2019)이 비디오는 광간섭의 사용을 보여줍니다. 단층촬영(OCT)은 고해상도 단면 이미지를 캡처하여 멀티웰 플레이트에서 종양 스페로이드를 모니터링합니다. OCT는 세포 구조에서 반사되는 빛을 분석하여 3D 모델을 구축하여 크기 및 모양과 같은 형태학적 특징을 평가하는 동시에 시간 경과에 따른 광 산란 변화를 기반으로 생존 가능한 세포와 생존 불가능한 세포를 구별합니다.

Optical Coherence Tomography를 사용한 종양 스페로이드의 형태학적 및 생리학적 모니터링 

우리는 각막 기증자 기질의 고품질 평가를 위한 방법으로 전체 필드 광학 간섭 현미경의 사용을 설명합니다. 이 프로토콜은 건강 또는 질병을 나타내는 특징을 식별하는 데 사용할 수 있으며 기증자 조직의 스크리닝 및 선택, 따라서 각막 성형술의 결과를 개선하는 것을 목표로 합니다.

각막 이식편의 기질 특징에 대한 조직학과 유사한 분석을 위한 전체 필드 광학 간섭 현미경

여기, 우리 소설 영상 복합 플랫폼을 사용 하 여 큰 시야 (FOV) 3 차원 (3D) 형광 및 10 월 망막 이미지를 얻을 프로토콜 제시. 시스템 설치 프로그램, 정렬 방법 및 운영 프로토콜을 소개 합니다. Vivo에서 화상 진 찰 설명 될 것입니다, 그리고 대표적인 결과 제공 됩니다.

복합 체적 망막 이미징 오블리크 스캐닝 레이저 Ophthalmoscopy (오슬로) 및 광학 일관성 단층 촬영 (OCT)

이 프로토콜은 적극적으로 수축심장 trabecula ex vivo에서sarcomere, 칼슘 및 거시적 기하학적 기하학적 데이터의 컬렉션을 제공합니다. 이러한 동시 측정은 세 가지 이미징 양식의 통합에 의해 가능하게됩니다.

동시 브라이트필드, 형광, 및 수축 심장 Trabeculae Ex Vivo의 광학 일관성 지형 이미징

여기에서는 마우스에서 망막병증의 진단 및 정량적 측정을 용이하게 하기 위해 광학 간섭 단층 촬영을 사용하는 생체 내 이미징 기술에 대해 설명합니다.

망막병증의 마우스 모델에 대한 광학 간섭 단층 촬영의 적용

본 프로토콜은 in vivo 이미지에서 관찰된 망막 신경절 세포 축삭 다발 형태를 검증하기 위한 목적으로 in vivo 가시광선 광간섭 단층 촬영 fibergraphy(vis-OCTF) 이미지를 동일한 마우스 망막의 ex vivo 공초점 이미지와 정렬하는 단계를 설명합니다.

Align of Visible-Light Optical Coherence Tomography Fibergrams with Confocal Images of the Same Mouse Retina(가시광선 광간섭 단층 촬영 파이버그램과 동일한 마우스 망막의 컨포칼 이미지 정렬)

Intravital microscopy 결과의 번역은 조직에 대한 얕은 깊이 침투로 인해 어려움을 겪고 있습니다. 여기에서는 직접적인 공간 상관 관계를 위해 생체 내 현미경 검사와 임상적으로 적용 가능한 이미징 양식(예: CT, MRI)을 함께 정합할 수 있는 등쪽 창 챔버 마우스 모델에 대해 설명하며, 이를 통해 생체 내 현미경 검사 결과의 임상 번역을 간소화할 수 있습니다.

중개 암 연구에서 생체 내 현미경 및 자기 공명 영상의 결합을 위한 Dorsal Skinfold Window Chamber 종양 마우스 모델

전방편절 고분해능 광간섭 단층촬영(HR-OCT)은 안구 표면 편평 종양(OSSN)의 진단 및 치료 평가를 위한 유망한 비침습적 양식입니다. 여기에서 시스템 설정, 스캐닝 기술 및 대표적인 진단 결과를 제시합니다.

Anterior High-Resolution Optical Coherence Tomography in the Diagnosis and Therapeutic Monitoring of Ocular Surface Squamous Neoplasia(안구 표면 편평 종양의 진단 및 치료 모니터링에서 전방 고해상도 광학 간섭 단층 촬영)

학습하세요 반사율 공초점 현미경과 광간섭 단층촬영을 결합한 비침습적 피부암 진단 방법을. 병상에서 고해상도 이미지를 획득하여 조기 피부암을 감지하고 불필요한 생검을 줄이며 환자 대기 시간과 불안을 감소시킵니다.

이미지 획득을 통한 피부암의 비침습적 진단을 위한 반사율 공초점 현미경과 광간섭 단층촬영의 결합

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