이미지 획득을 통한 피부암의 비침습적 진단을 위한 반사율 공초점 현미경과 광간섭 단층촬영의 결합

이 프로토콜은 침대 옆에서 RCM 및 RCM-OCT 장치에 대한 이미지 획득 단계를 자세히 설명합니다. 피부 병변의 정확한 진단과 관리를 위해 좋은 품질의 이미지를 얻는 것이 필수적입니다. 이 장치는 생체 내에서 조직병리학적 해상도로 피부를 이미지화하여 조기 피부암을 감지하면서 불필요한 양성 생검을 저장합니다.

진단은 침대 옆에서 이루어 지므로 환자의 대기 시간과 불안을 줄일 수 있습니다. 이 현미경으로 이미징하면 침대 옆에서 환자의 피부 병변 및 피부암을 비침습적으로 감지하고 진단할 수 있습니다. 또한 영상은 피부 병변을 피상적일 수 있는 병변과 더 깊을 수 있는 병변으로 분류하여 치료를 안내하는 데 도움이 됩니다.

따라서 이미징은 진단과 치료를 단일 환자 방문으로 통합하거나 결합하는 데 도움이 되며, 이는 현재 원스톱 상점 환자 치료 패러다임으로 불리고 있습니다. 이미징을 사용하여 피부 병변과 피부암을 감지하고 진단하는 것 외에도 이미징을 사용하여 환자의 구강 병변 및 구강암을 감지하고 진단합니다. 절차를 시연하는 것은 제 실험실의 조직학자인 Ms. Ucalene Harris가 될 것입니다.

시작하려면 몸통 및 사지와 같은 피부의 평평한 표면에 위치한 병변에 대해 WP-RCM 장치를 선택하고 코, 귓불, 눈꺼풀 및 생식기와 같은 곡면의 병변에 대해 HH-RCM 장치를 선택하십시오. 영상을 위해 환자를 완전히 뒤로 젖히는 의자나 지지대가 있는 평평한 검사 테이블에 놓습니다. 그런 다음 알코올 물티슈로 병변과 주변 피부를 닦으십시오.

플라스틱 창 중앙에 미네랄 오일 한 방울을 넣고 창 너비에 조심스럽게 펴 바릅니다. 창의 접착면에서 페이퍼백을 제거하고 피부를 부드럽게 펴고 창을 부착합니다. WP-RCM 장치를 사용하여 이미지를 획득하려면 프로브를 병변에 수직으로 배치합니다.

그런 다음 플라스틱 창 캡 위에 WP-RCM 프로브를 올려 피부경 이미지를 획득하고 프로브에 가장 적합한 삽입 각도를 추정합니다. 프로브 측면에 있는 작은 흰색 화살표를 dermoscopy 카메라 측면에 있는 화살표에 맞춥니다. dermoscopy 카메라를 플라스틱 창 캡에 삽입합니다.

피부경 이미지가 전체 병변 표면을 덮고 있는지 확인하고 카메라의 방아쇠를 눌러 이미지를 획득합니다. 그런 다음 dermatoscope를 제거하십시오. 그런 다음 완두콩 크기의 초음파 젤을 일회용 플라스틱 창 캡 안에 넣습니다.

날카로운 딸깍 소리가 날 때까지 RCM 프로브를 플라스틱 일회용 캡에 삽입합니다. 이전 단계에서 획득 한 dermoscopy 이미지를 사용하여 병변의 중심을 선택하고 각질층의 핵 층 인 피부의 최상층 또는 가장 밝은 층을 식별합니다. 이 수준에서 이미징 깊이를 0으로 설정합니다.

스택 아이콘을 눌러 병변 중앙에 스택을 획득합니다. 드롭다운 메뉴에서 해부학적 부위(얼굴 또는 몸)를 선택합니다. 스텝 크기를 4.5미크론으로, 깊이를 250미크론으로 설정합니다.

스택에서 피부-표피 접합부 또는 DEJ 층을 식별하고 전체 병변을 덮을 8x8mm 정사각형을 선택합니다. 그런 다음 모자이크 아이콘을 눌러 DEJ에서 첫 번째 모자이크를 얻습니다. 후속 모자이크를 얻으려면 DEJ 모자이크의 구조를 클릭하여 라이브 뷰에서 봅니다.

DEJ에서 아래로 스크롤하여 진피에서 모자이크를 얻은 다음 DEJ에서 위로 스크롤하여 표피에서 모자이크를 가져옵니다. dermoscopy에서 균질한 패턴으로 각 사분면에 하나의 스택을 캡처하고 병변 중앙에 하나의 스택을 캡처하거나 이질적인 병변에 대한 추가 스택을 획득합니다. 이미지 세션을 완료한 후 현미경 렌즈를 둘러싸고 있는 보호 원뿔을 분리합니다.

알코올 면봉으로 대물 렌즈의 끝을 청소하고 렌즈를 건조시킵니다. 플라스틱 콘을 현미경 프로브에 다시 부착합니다. 컨포칼 진단 평가 보고서를 생성하려면 New Evaluation(새 평가)을 클릭합니다.

드롭다운 메뉴에서 미리 선택된 옵션에서 진단을 입력합니다. 보고서 체크리스트에서 이미징 중에 표시되는 기능을 선택하고 해당 관리를 선택합니다. Finish and Sign(마침 및 서명)을 클릭합니다.

보고서를 PDF로 생성하고 인쇄합니다. HH-RCM 장치를 사용하여 이미지를 획득하려면 먼저 환자의 위치를 지정하고 병변 부위를 청소하고 종이 링으로 병변에 동그라미를 치십시오. 완두콩 크기의 초음파 젤을 HH-RCM의 대물 렌즈에 바르고 플라스틱 캡으로 덮습니다.

피부에 닿을 플라스틱 캡 측면에 미네랄 오일을 넉넉히 떨어뜨립니다. 프로브를 피부의 병변 쪽에 세게 누르십시오. HH-RCM 장치의 Z 깊이 컨트롤을 사용하여 병변 내의 다양한 깊이에서 위아래로 움직입니다.

관심 영역에서 여러 개의 단일 프레임 이미지와 스택을 수집합니다. 큰 병변의 경우 HH-RCM 프로브를 전체 병변 표면으로 이동하고 비디오 캡처 기호를 클릭하여 다양한 레이어에서 연속 비디오를 촬영합니다. 혈관 내 혈액 세포의 움직임을 기록합니다.

이미징 세션이 완료되면 이미징 완료를 누릅니다. 알코올 면봉으로 병변을 청소하고 프로브의 대물 렌즈에서 초음파 젤을 제거한 다음 플라스틱 캡을 다시 부착합니다. 이미징을 위해 환자를 배치하고 병변의 경계에 과도한 모발과 국소 불순물이 없는지 확인합니다.

이전 섹션에서 설명한 대로 프로브를 준비한 후 Imaging Settings(이미징 설정)를 클릭합니다. Line Imaging 모드를 선택하여 RCM 이미지를 획득합니다. 스텝 크기를 5미크론으로 설정하고 스텝 수를 40으로 설정합니다.

이전 섹션에 표시된 대로 Grab을 클릭하여 스택을 획득합니다. 그런 다음 완료 후 동결 버튼을 클릭합니다. 이미징 설정을 클릭하고 래스터 모드를 선택하여 병변 아키텍처에 대한 상관 OCT 비디오를 획득합니다.

기술자 탭으로 전환합니다. 완료되면 Grab 버튼을 클릭하고 즉시 Save 버튼을 누릅니다. 이 프로토콜을 사용하여 피부의 관련 깊이에서 고품질 RCM 이미지를 획득했습니다.

기포, 표면 파편 및 모션 아티팩트와 같이 진단 평가를 방해하는 아티팩트는 피해야 합니다. RCM에서는 핵개화된 각질세포로 구성된 각막층과 밝은 세포질로 빽빽하게 채워진 유핵세포로 구성된 척수층 등 다양한 피부층이 관찰되어 전형적인 벌집 패턴을 생성했습니다. 그 다음에는 기저 각질 세포의 멜라닌 캡에 의해 형성된 조약돌 패턴으로 식별되는 기저층 기저부가 뒤따랐습니다.

그리고 밝은 고리 패턴이 특징인 DEJ. 유두 진피는 밝은 콜라겐 섬유와 혈관으로 구성되었습니다. 기저 세포 암종과 같은 일반적인 피부암에 대한 RCM 이미지는 갈라진 틈과 palisading을 동반 한 종양 결절을 보여주었습니다.

편평 세포 암종은 비정형 벌집 패턴과 단추 구멍 혈관을 보여주었습니다. 그리고 흑색종은 표피에 밝고 크고 둥근 페이지토이드 세포의 클러스터를 보여주었습니다. 기저 세포 암종의 경우 RCM 이미지는 결정적인 종양 결절을 보여줄 수 없었습니다.

스택과 래스터 모두에 의해 해석된 RCM-OCT 이미지는 갈라지고 두꺼워진 콜라겐 다발과 함께 표피에 연결된 뚜렷한 회색 종양 결절을 보여주었습니다. 진단은 H & E 염색 생검에 의해 확인되었다. WP-RCM 이미징을 사용하여 피부의 5개 층에서 진단 품질의 모자이크를 획득하는 것이 중요합니다.

HH-RCM을 사용하여 부드러운 비디오와 스택을 촬영하고 RCM-OCT 장치를 사용하여 동일한 영역에서 스택과 래스터를 모두 촬영합니다.