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심혈관 질환에 대한 대형 동물 모델에서 심장의 해부 기술 및 조직 학적 샘플링
심혈관 질환에 대한 대형 동물 모델에서 심장의 해부 기술 및 조직 학적 샘플링
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JoVE Journal Medicine
Dissection Techniques and Histological Sampling of the Heart in Large Animal Models for Cardiovascular Diseases

심혈관 질환에 대한 대형 동물 모델에서 심장의 해부 기술 및 조직 학적 샘플링

Full Text
9,200 Views
10:53 min
June 16, 2022

DOI: 10.3791/63809-v

Irina Constantin1, Alexandru Flaviu Tăbăran1

1Department of Pathology,University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Cluj-Napoca

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

복잡한 해부학으로 인해 심장 샘플에 대한 일관되게 재현 가능한 해부 및 수확 프로토콜을 구현하기가 어려울 수 있습니다. 이 원고는 일부 표준 심장 해부 프로토콜의 핵심 요소를 제시하여 전체 검사 접근 방식과 조직 병리학 검사에 일반적으로 사용되는 샘플링 부위를 강조합니다.

종과 개체 사이의 심장의 구조적 차이와 문헌의 불일치로 인해 심장 해부학에 대한 철저한 이해와 엄격한 방법론 준수가 필요합니다. 이 기술은 관찰자 균일 성을 향상시키고 실험적 심혈관 질환 연구의 비교 가능성과 재현성을 높일 수 있습니다. 이 기술에 익숙하지 않은 사람은 심장의 모든 구성 요소를 식별하는 데 어려움을 겪을 수 있습니다.

내 추천은 심장의 해부학에 익숙해지는 데 시간을 보내는 것입니다. 심장의 복잡한 해부학은 이해하기 어렵 기 때문에 방법을 시각적으로 표현해야합니다. 시작하려면 대상 동물을 왼쪽의 부검 테이블에 놓기 전에 무게를 잰다.

그런 다음 큐티스와 점막을 검사하고 촉지하여 색상, 일관성 및 부피의 모든 변화를 기록하여 피험자의 외부 검사를 수행하십시오. 다음으로 칼을 사용하여 오른쪽 겨드랑이에 날카로운 7 센티미터 절개를하십시오. coxoferacelial 접합부를 찾은 후 칼로 캡슐을 열고 대퇴골 머리의 인대를 자릅니다.

겨드랑이 두개골의 피부 절개를 하악 결합으로 확장하고 꼬리를 비골로 확장하십시오. 메스로 피부를 제거하여 흉부와 복벽을 복부 정중선에서 척추 횡단 과정의 수준으로 노출시킵니다. 다음으로, 메스와 집게를 사용하여 복벽을 통해 플랩을 만들고, 복부는 오른쪽 늑골 아치에 만듭니다.

그런 다음 오른쪽 hypochondrium의 꼬리 측면을 따라 가위로 복강을 엽니 다. 외부 장골 볏까지 오른쪽 paralumbar 영역을 따라 절개 꼬리를 계속 확장하십시오. 그 후, 선상 알바의 치골 삽입까지 절개를 확장하고 제자리에서 복부 장기를 간략하게 검사하여 색상, 일관성, 부피 및 위치의 변화를 확인합니다.

다음으로 메스와 집게를 사용하여 가장 높은 지점에서 다이어프램을 뚫습니다. 그런 다음 뼈 절단 겸자를 사용하여 먼저 흉골 연골 부분을 절편 한 다음 늑골 관절 근위 갈비뼈의 등쪽 부분을 절단하여 오른쪽 흉곽을 제거합니다. 심장을 제자리에서 검사하여 크기, 색상, 위치 및 인접한 조직과의 연결을 확인하십시오.

또한 촉진에 의한 일관성의 변화를 찾으십시오. 그런 다음 가위를 사용하여 심장의 기저부에서 정점까지 세로 부분으로 심낭을 엽니 다. 심낭과 심 외막을 검사하여 색, 일관성 및 부피의 변화가 있는지 확인하십시오.

다음으로, 가위를 사용하여 우심방 입구에서 최소 1cm 위에 있는 상대정맥을 절개하여 심장을 풀어주고 크리스타 말단을 보존하고 대동맥, 폐동맥 및 양쪽 대정맥의 횡단면을 산출합니다. 장기의 외부 윤곽, 심 외막의 모양, 심 외막의 투명성에 의한 심근의 윤곽 및 큰 혈관의 외부 모양을 검사하십시오. 심장 해부를위한 유입 유출 방법을 수행하려면 심방면이 위로 향하도록 심장을 놓고 가위와 이빨없는 집게를 사용하여 꼬리 대정맥에서 우심방으로 넓게 자릅니다.

크리스타 말단 또는 동방 결절을 노출시키기 위해 오른쪽 귀의 부속기로 심장을 자른 후 등쪽에서 삼첨판 막을 검사하십시오. 그런 다음 우심방에서 우심실과 뇌실 내 중격 사이의 교차점까지의 섹션을 절단하여 오른쪽 방실 판막을 표시합니다. 다음으로, 폐동맥의 기원까지 뇌실 내 중격을 따라 우심실 자유 벽을 절단합니다.

척막 건과 유두근을 포함한 오른쪽 방실 판막을 철저히 검사 한 후 척색 건을 자릅니다. 다음으로 폐동맥을 따라 집게를 놓고 몸통을 세로로 잘라 폐 유출관, 폐동맥 기원 및 반월 판막을 검사합니다. 등쪽에서 이첨판 막을 검사하려면 폐정맥에서 왼쪽 귀의 끝까지 좌심방을 자릅니다.

다음으로, 심실 중격이 아래를 향하도록 심장을 배치하고 심실 기저부에서 심장 정점까지 심실 자유 벽에 큰 절개를하십시오. 그런 다음 왼쪽 방실 판막의 교두의 척막 건을 자릅니다. 마지막으로 좌심실 유출로를 통해 집게를 배치하여 대동맥을 엽니 다.

식염수를 사용하여 모든 혈전을 제거하고 심장의 무게를 측정하십시오. 조직학을위한 샘플을 채취하려면 먼저 우심방, 삼첨판 막 및 우심실 자유 벽을 포함하는 메스로 약 5mm 간격으로 두 개의 세로 평행 절단을하십시오. 다음으로, 좌심방, 승모판, 등쪽 유두근 및 좌심실을 포함하는 두 개의 유사한 평행 절단을하십시오.

심장의 등쪽 상부 1/3 내에서 심실 중격, 우심방, 대동맥, 대동맥 판막 및 삼첨판 막을 포함하여 선을 따라 심장의 기저부를 횡단합니다. 그리고 대동맥의 기저부와 심실 중격을 포함하는 두 개의 평행 한 세로 절단을하십시오. 그런 다음 크리스타 터미널 주변의 우심방을 다듬습니다.

동방 결절의 6 개를 얻으려면 크리스타의 세로 축을 가로 질러 방향으로 약 3-4 밀리미터 떨어진 여러 개의 평행 섹션을 만드십시오. 다음으로, 수득 된 조직을 조직 학적 카세트로 트리밍하고 조직을 10 % 중성 완충 포르말린에 적어도 48 시간 동안 담그십시오. 관상 동맥을 샘플링하려면 집게와 메스를 사용하여 원추 홈에서 관상 동맥을 해부하고 밤새 10 % 중성 완충 포르말린에 고정하십시오.

필요한 경우 8 % 포름산과 염산의 일대일 혼합물로 조직을 석회질합니다. 다음으로 약 3mm 간격으로 여러 개의 가로 절단을하십시오. 섹션을 조직학적 카세트에 넣고 카세트를 10%중성 완충 포르말린에 넣어 삽입합니다.

심장을 10 % 중성 완충 포르말린에 최소 48 시간 동안 고정 한 후 두 개의 이빨없는 직선 해부 집게를 놓습니다. 하나는 두개골 구멍, 우심방, 삼첨판 및 우심실을 통해 이루어집니다. 그리고 다른 하나는 폐정맥, 좌심방, 승모판 및 좌심실을 통해.

집게 사이의 공간을 안내로 활용하여 절단 날을 사용하여 심장의 바닥에서 정점까지 자릅니다. 약 5 밀리미터 간격으로 대동맥을 포함하는 심장 부분의 다른 세로 부분을 자릅니다. 그런 다음 심장 기저부를 정점에서 완전히 분리하십시오.

각 조직 세그먼트를 조직학적 카세트에 넣은 후 카세트를 임베딩될 때까지 10% 중성 완충 포르말린에 넣습니다. 이 프로토콜은 심장의 외부 특징과 내부 구조를 성공적으로 시각화 할 수있었습니다. 이 기술을 사용하여 개와 고양이와 같은 다양한 동물의 조직학적 연구를 위해 심장 조직 샘플을 성공적으로 수집할 수 있습니다.

심장을 놓는 동안 항상 조심하십시오 관심있는 구조가 손상 될 수 있으므로 심장을 풀어주십시오. 또한 동방 결절을 해부, 수확 및 매립하는 동안. 이 방법은 부정맥 모델링, 비대성 심근 병증, 심근 경색 및 심장 중독을 진단하기 위해 만들어졌지만 모든 심장 상태를 진단하는 데 사용할 수 있습니다.

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