돼지 심근 경색 모델에서 심장 활성 치료제 전달

이 프로토콜은 돼지 피험자에게 심폐활성 약물을 전달하기 위한 세 가지 재현 가능한 기술을 설명합니다. 이는 심근경색 후 심장 복구에 대한 새로운 생물학적 접근 방식을 추구하는 중개 과학자들에게 큰 관심사입니다. 이 비디오에서는 심장에 외과적으로 노출된 후 심근 주사를 통해 약물 전달을 시연합니다.

이 기술은 직접적인 시력 하에서 정확한 약물 전달을 가능하게 하며, 전달된 제품의 높은 국소 유지율과 관련이 있습니다. 오늘 저와 함께 절차를 시연할 사람은 우리 연구실의 수의사인 Juntang Lu입니다. 그를 돕는 것은 수의학 마취과 의사인 Alan Marcus 박사, Sally Kim 박사, Samuel Turnbull 및 Mr.Vu Tran입니다.

예방적 항생제를 정맥 주사하여 개흉술 및 심외막 세포 주사를 시작하고 절차 내내 90분마다 계속합니다. 동물을 오른쪽 옆으로 누운 자세로 놓고 돼지 귀 뒤의 평평한 평면에 시간당 100마이크로그램의 펜타닐 패치를 바릅니다. 접착 드레싱이나 2-0 봉합사로 덮습니다.

제품 사양에 따라 electroanatomic mapping system, cabling 및 patches를 설정합니다. 동물의 갈비뼈 4번과 5번 사이에 10cm 수평선을 표시하기 전에. 25게이지 바늘이 있는 주사기에 리도카인과 부피바카인의 혼합물을 준비하고 원고에 기재된 대로 무균으로 준비된 수술 부위에 피부 라인 차단 시술을 수행합니다.

동물을 드레이프한 후 숫자 22 메스를 사용하여 표시된 선을 따라 10cm 피부를 절개합니다. 단극성 소작술을 사용하여 늑간 근육에 도달할 때까지 밑에 있는 근육층을 통해 절개 부위를 깊게 절개합니다. 부피바카인과 리그노카인의 멸균 주사기를 준비합니다.

25 게이지 바늘을 부착하고 네 번째 갈비뼈의 꼬리 가장자리에 바늘을 삽입합니다. 바늘이 늑간 정맥이나 동맥을 통과하지 않도록 주사기 부피의 1/4을 천천히 주입합니다. 네 번째 갈비뼈의 꼬리 가장자리를 따라 세 군데에서 이 작업을 반복합니다.

마취의의 확인 후 Metzenbaum 가위를 사용하여 늑간 근육을 조심스럽게 절개합니다. 인공호흡기를 끄고 흉막을 절개하십시오. 절개 부위가 끝나면 인공호흡기를 다시 켜고 양압과 호기를 4cm의 물로 조절합니다.

갈비뼈 사이에 자체 유지 늑골 견인기를 놓고 천천히 열어 심장을 노출시킵니다. 조직 겸자를 사용하여 심낭을 부드럽게 잡고 메첸바움 가위로 절개하여 심장을 바깥쪽으로 만듭니다. 심낭 절개 부위의 양쪽 끝과 측면에 임시 2-0 스테이 봉합사를 배치하여 흉벽에 고정합니다.

심낭 웰을 만들어 심낭 웰을 가능한 한 얕게 만들기 위해 심낭의 측면이 지지되도록 합니다. 완료되면 노출된 조직의 건조를 방지하기 위해 물에 적신 면봉이나 개복술 스펀지를 사용하여 심장 주변 부위를 포장합니다. 다음으로, 심낭강 내에서 집게손가락으로 좌심실 뒤에서 심장의 정점을 전달합니다.

좌심실 압박을 최소화하도록 주의하십시오. 즉시 심장을 심낭강으로 되돌리고 추가 탈구가 발생하기 전에 혈역학적 매개변수를 개선하는 데 필요한 조치를 취합니다. 전기생리학적 매핑 카테터를 사용하고 좌심실 심외막 표면의 전기해부학적 전압 맵을 생성합니다.

표준 전압 차단으로 흉터, 경계 및 원격 영역을 식별합니다. 27 게이지 치료용 전달 주사기의 바늘을 대략 80-90도 각도로 구부리고 얕은 각도로 바늘을 대상 조직으로 전진시킵니다. 주사기 플런저에 압력을 가하여 전체 부피의 1/4에서 1/3을 배출합니다.

전기생리학적 매핑 카테터를 사용하여 생성된 심외막 전압 맵의 주사 부위 위치에 주석을 추가합니다. 바늘을 부분적으로 빼내고 심근 내에서 방향을 바꾼 다음 주사기 부피의 1/4에서 1/3을 더 배출합니다. 원하는 복용량을 전달하려면 이것을 반복하십시오.

다음으로, 심장을 감싸고 있는 면봉을 제거하고 심장 아래의 슬링을 부드럽게 제거하여 중립 위치로 되돌립니다. 흉부에서 견인기를 제거하고 휴식을 취하기 전에 심낭에서 2-0 스테이 봉합사를 제거합니다. 끝이 뭉툭한 둥근 바늘을 사용하여 갈비뼈 3번과 4번, 갈비뼈 5번과 6번 사이의 공간을 통해 크기 1의 폴리디옥사논 봉합사 또는 PDS를 삽입하여 흉부를 닫습니다.

갈비뼈에 가까운 봉합사를 조이고 묶기 전에 절개 부위의 복부 가장자리에 짧은 실리콘 튜브를 삽입합니다. 흉막강의 수중 밀봉 배액을 위해 튜브의 다른 쪽 끝을 멸균 식염수 그릇에 넣습니다. 흉부에서 자유로운 공기를 배출하려면 인공호흡기를 자유 호흡 설정으로 돌립니다.

재호흡 회로의 저장 주머니를 사용하여 기도에 일관된 양압을 제공하고 식염수 용기에서 기포가 더 이상 관찰되지 않을 때까지 이 압력을 계속합니다. 그런 다음 실리콘 튜브를 제거합니다. 그런 다음 2-0 흡수성 봉합사로 단순 연속 패턴으로 위에 있는 근육층을 닫고 2-0 또는 3-0 비흡수성 봉합사로 단순 연속 패턴으로 피부를 닫습니다.

마지막으로, 수술 부위에 접착 드레싱을 바르고 흩어져 있는 단순 단속 봉합사를 배치하여 드레싱을 제자리에 유지하는 데 도움이 됩니다. 개흉술과 심외막 주사를 맞은 29마리 중 26마리가 살아남았다. 조직학적 분석은 인간 세포 생착이 이 모든 생존 동물에서 성공적이었음을 확인했다.

마취과 의사의 혈역학적 매개변수에 대한 엄격한 관찰과 함께 외과의가 심장을 신중하고 부드럽게 다루는 것은 이 절차의 안전을 보장하는 데 매우 중요합니다. 일시적인 혈역학적 불안정성을 교정하기 위해 승압제 약물의 사용이 필요할 수 있습니다. 이 재현 가능한 프로토콜은 신뢰할 수 있는 심근 내 약물 전달을 촉진하며 개별 연구 설계에 맞게 조정할 수 있습니다.