Real-Time Quantitative Measurement of Tumor Cell Migration and Invasion Following Synthetic mRNA Transfection

Taeju Park; Neka Large

doi:10.3791/64274

합성 mRNA transfection 후 종양 세포 이동 및 침습의 실시간 정량 측정

JoVE Journal
Cancer Research

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JoVE Journal Cancer Research

Real-Time Quantitative Measurement of Tumor Cell Migration and Invasion Following Synthetic mRNA Transfection

합성 mRNA transfection 후 종양 세포 이동 및 침습의 실시간 정량 측정

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11:00 min

June 23, 2023

DOI: 10.3791/64274-v

Taeju Park^1,2, Neka Large¹

¹Children’s Mercy Research Institute,Children’s Mercy Kansas City, ²Department of Pediatrics,University of Missouri-Kansas City School of Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

상향 조절된 많은 유전자는 종양 세포의 이동과 침입을 자극하여 예후를 악화시킵니다. 어떤 유전자가 종양 세포의 이동과 침입을 조절하는지 알아내는 것은 매우 중요합니다. 이 프로토콜은 종양 세포의 이동 및 침입에 대한 유전자 발현 증가의 효과를 실시간으로 조사하는 방법을 제시합니다.

이 프로토콜은 감각 메신저 RNA 트랜잭션과 임피던스 기반 세포 이동 및 침습 실시간 측정을 결합하면 종양 세포 이동 및 침입을 자극하는 유전자의 식별을 용이하게 할 수 있음을 보여줍니다. 임피던스 기반 실시간 세포 분석 시스템은 유전자 발현 변화에 따른 종양 세포 이동을 정량적이고 연속적이며 포괄적으로 모니터링할 수 있습니다. 종양을 과도하게 발현하고 종양 세포 이동을 자극하는 유전자는 암 치료에서 전이를 억제하는 잠재적 표적이 될 수 있습니다.

먼저, 10x 반응 완충액 10마이크로리터, PNE 원 1.5마이크로리터, 플라스미드 DNA 10마이크로그램을 마이크로 원심분리 튜브에 첨가하여 플라스미드 DNA를 제한효소로 선형화합니다. 뉴클레아제 유리수를 첨가하여 반응 부피를 100마이크로리터로 만듭니다. 섭씨 37도에서 밤새 반응 혼합물을 배양하기 전에 두드려서 회전시켜 혼합합니다.

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