상장간막 동맥의 폐색을 통한 장 허혈-재관류 손상의 설치류 모델

마스크, 헤어 커버, 깨끗한 실험실 가운 또는 스크럽을 착용하는 것으로 시작하십시오. 다음으로, 마취된 마우스를 수술 부위와 분리된 깨끗한 표면에 놓고 1.5%의 이소플루란과 21%의 산소를 공급하는 노즈콘을 끼웁니다. 그런 다음 부프레노르핀을 등쪽 경추 흉부 부위에 피하 주사합니다.

또한 헤파린을 복강내로 주사하여 폐색 기간 동안 혈전 형성을 방지합니다. 각막 손상을 방지하기 위해 눈에 안과 연고를 바르고 클리퍼를 사용하여 복부 털을 제거합니다. 마우스를 수술 부위의 온수 담요로 옮깁니다.

다시 말하지만, 이소플루란을 전달하는 노즈 콘에 맞춥니다. 그런 다음 마우스를 등쪽 누운 자세에 놓고 수술용 테이프로 팔다리를 테이블에 고정합니다. 설치류 전용 직장 체온계를 사용하여 동물의 체온을 모니터링합니다.

복부를 철저히 소독한 후 발가락 꼬집기 테스트를 수행하여 동물이 완전히 마취되었는지 확인합니다. 마지막으로 멸균 장갑을 착용하고 수술 부위를 무균 상태로 드레이프합니다. 먼저 15번 메스 칼날을 사용하여 피부에 3-5cm의 복부 정중선 절개를 합니다.

피부 가장자리의 0.5cm를 아래 근육 근막에서 분리하여 나중에 스테이플을 배치할 수 있도록 합니다. 그런 다음 스프링이 장착된 마이크로 가위를 사용하여 선형 알바를 따라 복벽을 통해 절개를 계속하고 견인기를 놓습니다. 따뜻한 멸균 식염수를 적신 멸균 거즈 패드를 수술 부위 주변에 놓습니다.

복강에서 소장을 제거합니다. 두개골과 동물의 왼쪽으로 뒤집고 축축한 패드 위에 놓습니다. 건조를 방지하기 위해 다른 축축한 거즈 패드를 조직 위에 놓습니다.

상장간막 동맥(superior mesenteric artery, SMA)은 복부, 하대정맥 꼬리, 복강 동맥, 두개골은 신장 동맥을 찾습니다. 주변 결합 조직에서 멀리 떨어져 해부하십시오. SMA의 기저부를 따라 비외상성 미세혈관 클립을 놓아 복부 대동맥에서 분기합니다.

분홍색에서 옅은 흰색으로 변하는 것을 관찰하여 소장의 허혈을 확인합니다. 허혈성 기간 동안 내장을 복강 내부의 원래 위치로 되돌립니다. 견인기를 제거하고 절개 부위를 축축한 거즈로 덮습니다.

45분 동안 허혈이 발생한 후 폐색 클립을 제거합니다. 장간막 맥박과 홍조를 관찰하여 혈류의 회복을 확인합니다. 적절한 수분을 유지하기 위해 복강 내 따뜻한 멸균 식염수를 바릅니다.

그런 다음 6-0 폴리글락틴 910 봉합사로 복부 근육을 닫습니다. 통증 완화를 위해 근육 절개 라인을 따라 bupivacaine을 국소적으로 투여합니다. 수술용 스테이플이나 상처 클립으로 피부를 닫습니다.

마우스를 순환 물 담요의 따뜻한 방으로 되돌립니다. 마우스를 90분 동안 회복시키고 마우스에 통증이나 고통의 징후가 있는지 모니터링합니다. 인도적 안락사를 시행한 후 좌측, 좌측, 우측 정중엽을 포함한 간엽 등 원하는 조직을 채취합니다.

그런 다음 양쪽 신장을 채취합니다. 왼쪽 신장을 세로로로 자르고 오른쪽 신장을 단면으로 자릅니다. 마지막으로 소장과 대장의 전체 길이를 수집합니다.

소장 분절을 같은 길이의 절편으로 나누려면 소장을 Z자 모양으로 접어 맨 위 선은 십이지장, 중간 선은 제주눔, 맨 아래 선은 회장입니다. 장의 나머지 부분은 결장입니다. 20게이지 혈관카테터가 부착된 10밀리리터 주사기를 사용하여 장 분절의 내강을 식염수로 씻어냅니다.

다음으로 미세 해부 가위를 사용하여 장의 길이를 자르고 각 장 분절을 내강 면이 위를 향하도록 평평하게 놓습니다. 27게이지 바늘이 부착된 3밀리리터 주사기를 사용하여 10% 완충 포르말린을 적재량으로 넉넉하게 도포하여 점막의 전체 길이를 코팅합니다. 그런 다음 이쑤시개 주위로 각 세그먼트를 원주종으로 굴려 근위 부분이 롤의 안쪽 부분을 형성하고 내강이 내부를 향하도록 합니다.

롤링 후 장은 스위스 롤처럼 보여야 합니다. 개별 스위스 롤의 나선형 면이 위로 향하게 하여 별도의 라벨이 부착된 티슈 카세트 안에 넣습니다. 마지막으로 10% 완충 포르말린으로 채워진 라벨이 붙은 바이알에 조직을 넣어 실온에서 고정합니다.

장 IRI 후, 가짜 그룹의 마우스에서 jejunum과 회장의 H&E 염색은 왜곡 없이 길고 가는 융모를 보여주었습니다. 반면 IRI 그룹의 쥐 절편은 괴사와 출혈 부위를 나타내며 나머지 융모가 무뎌지고 뒤틀렸다. 또한, IRI를 받은 동물의 소장 3개 분절 모두에 대한 미세한 손상은 가짜 개복술을 받은 동물에 비해 현저하게 증가했습니다.