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DOI: 10.3791/64356-v
Amirah Haziqah-Rashid1, Kinga Stobierska1, Lorna Glenn1, Soeren Metelmann1,2, Ken Sherlock3, Ewa Chrostek1, Marcus S. C. Blagrove1
1Department of Evolution, Ecology, and Behavior, Institute of Infection, Veterinary and Ecological Sciences,University of Liverpool, 2COVID-19 Outbreak Surveillance Team,UK Health Security Agency, 3Department of Livestock and One Health, Institute of Infection, Veterinary and Ecological Sciences,University of Liverpool
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
곤충은 내부에 머물기를 원하는 최적의 환경 온도 범위를 가지고 있으며 많은 외부 및 내부 요인이 이러한 선호도를 변경할 수 있습니다. 여기에서는 곤충이 자연스러운 행동을 자유롭게 나타낼 수 있도록 온도 선택을 연구하는 비용 효율적이고 간단한 방법을 설명합니다.
이 두 챔버 장치 설정은 곤충의 온도 선호도를 연구하는 데 사용되며 밝은 습도 대 어두운 습도 또는 높은 습도 대 낮은 습도와 같은 다른 이진 선택 선호도 상황을 연구하도록 수정할 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 간단한 설정, 곤충이 선호하는 온도를 선택할 때 비행 특성을 나타낼 수있는 넓은 공간, 외부 장비없이 쉽게 채점 할 수 있다는 것입니다. 프로토콜의 가장 어려운 부분은 실험 후 아크릴 위반을 제거하는 것입니다.
곤충이 탈출 할 확률이 높기 때문입니다. 따라서 곤충을 마취하기 위해 이산화탄소를 사용하는 것이 중요합니다. 이 절차를 시연하는 것은 Kinga Stobierska와 Lorna Glenn, 둘 다 내 실험실의 마스터 학생입니다.
시작하려면 12cm 슬리브 개구부가있는 2 개의 빈 모기장을 준비하고 구멍이나 기타 손상이 없는지 확인하십시오. 그런 다음 기계식 흡인기를 사용하여 실험 후 쉽게 취급하고 폐기 할 수 있도록 30 마리의 곤충을 별도의 케이지로 옮깁니다. 인큐베이터를 원하는 온도로 설정하고 가열하고 안정화되도록하십시오.
섭씨 25도에서 30도 사이의 온도에 도달하는 데 약 30 분이 걸립니다. 그런 다음 빈 모기장을 인큐베이터에 넣고 인큐베이터의 전면 구멍을 통해 케이지의 슬리브를 공급하십시오. 온도 프로브로 인큐베이터의 내부 공기 온도를 확인하십시오.
다음으로 덕트 테이프로 준비된 개방형 플랩을 아크릴 튜브의 구멍 위에 놓습니다. 첫 번째 인큐베이터 앞의 구멍을 통해 튀어 나온 슬리브를 감아 아크릴 튜브의 한쪽 끝에 탄성 밴드로 고정하십시오. 그런 다음 인큐베이터를 서로 마주 보게하고 아크릴 튜브의 한쪽 끝을 두 번째 인큐베이터 구멍의 슬리브에 삽입하십시오.
아크릴 튜브의 직경이 인큐베이터 앞면의 구멍보다 커서 구멍을 완전히 덮도록하십시오. 아크릴 튜브가 느슨하지 않고 인큐베이터 사이에 매달려 있지 않은지 확인하십시오. 그렇다면 케이지 슬리브를 당겨 케이지와 고무 밴드 사이의 과도한 재료를 제거하십시오.
모기를 안에 넣으려면 덕트 테이프 플랩을여십시오. 아크릴 튜브의 구멍에 깔때기를 놓은 다음 깔때기를 통해 곤충을 튜브에 비우십시오. 곤충을 비운 후 깔때기를 제거하고 덕트 테이프 플랩으로 튜브 구멍을 덮으십시오.
곤충이 선호하는 방을 선택할 수 있도록 30 분 동안 그대로 두십시오. 정착 시간이 끝나면 아크릴 튜브 브리지에서 보이는 곤충의 수를 육안으로 관찰하고 기록하십시오. 그런 다음 다리의 모든 곤충을 인큐베이터의 양쪽으로 두드리거나 날려 버리거나 다리로 이산화탄소를 방출하십시오.
그런 다음 양쪽의 아크릴 튜브에서 슬리브를 꼬집고 닫으려면 매듭으로 빠르게 고정하십시오. 그런 다음 두 인큐베이터에서 새장을 제거하고 각 새장의 곤충을 시각적으로 세십시오. 인큐베이터와 브리지의 숫자가 모두 30이되는지 확인하십시오.
본 연구에서는 모기와 초파리의 온도 선호도를 2-챔버 모델을 사용하여 결정하였다. 결과는 두 케이지가 섭씨 27도에서 유지되었을 때 큰 차이가 없었으며, 이는 모기가 자연스러운 행동을 보이는 케이지 중에서 자유롭게 선택할 수 있음을 나타냅니다. 반대로, 두 개의 챔버가 서로 다른 온도로 설정되었을 때 모기는 섭씨 30도 이상 섭씨 27도의 최적 온도를 일관되게 선택했습니다.
유사하게, 초파리 멜라노가스터(Drosophila Melanogaster)로 설정을 테스트했을 때, 초파리의 또 다른 외배엽 모델은 더 따뜻한 챔버를 피하고 섭씨 25도의 최적 온도를 선호했습니다. 곤충이 2개의 챔버 중에서 자유롭게 선택할 수 있도록 은폐 공간과 비행 영역을 방해하는 메쉬 없이 설정이 완전히 밀봉되었는지 확인하십시오.
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