Name: 좌측 관상동맥 결찰술: 심근경색의 외과적 쥐 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-09T14:45:00.000+00:00
Duration: 5 min 48 s
Description: 학습하세요 쥐의 좌측 관상동맥 결찰술을 통해 심근경색의 병태생리학과 염증 반응을 연구하는 방법을. 이 수술 모델은 재현성이 높고 덜 침습적이며 심혈관 질환 연구에 필수적인 도구입니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

이 작업은 국립 보건원 보조금(R01HL143967, R01HL142629, R01AG069399 및 R01DK129339), AHA 혁신 프로젝트 상(19TPA34910142), AHA 혁신 프로젝트 상(19IPLOI34760566) 및 ALA 혁신 프로젝트 상(IA-629694)(PD에게).

현재 연구 프로토콜은 피츠버그 대학의 IACUC(Institutional Animal Care and Use Committee)에서 검토하고 승인했습니다. 8마리(가짜 n = 4 및 MI n = 4)의 1세 암컷 C57BL/6J 마우스(체중 24-30g)를 이 실험에 사용했습니다. 마우스의 약 100 % 및 적어도 80 %가 처음 24 시간 및 28 일 동안 각각 생존했습니다.
1. 마우스의 준비 및 기관 내 삽관
<ol><li>비드 멸균기( 재료 표 참조)를 250°C로 예열하고 오토클레이브 수술 기구를 몇 분 동안 그 안에 넣습니다.</li>
	<li>3% 이소플루란과 1L/min 산소가 있는 유도 챔버에서 5분 동안 마우스를 마취합니다.</li>
	<li>단단한 발가락 꼬집음에 대한 반응을 확인하여 마우스의 마취 깊이를 확인하십시오.</li>
	<li>수술 전 진통제인 부프레노르핀(0.1mg/kg)의 용량을 추정하기 위해 마우스의 무게를 잰다. 약물을 주 내로 주사하십시오.</li>
	<li>전기 면도기를 사용하여 흉부 왼쪽의 털을 다듬습니다.</li>
	<li>그 후 포비돈 요오드와 70% 에탄올로 수술 부위를 3회 소독합니다.</li>
	<li>마우스를 경사 보드의 앙와위 위치에 놓습니다. 마우스의 머리와 팔다리를 각각 상악절치에 부착된 탄성 밴드와 접착 테이프를 사용하여 고정합니다. 마취 상태에서 건조를 방지하기 위해 눈에 멸균 안과 윤활제를 바르십시오.</li>
	<li>턱을 열고 혀를 구강 밖으로 부드럽게 잡아 당깁니다.</li>
	<li>후두경을 사용하여 구인두를 조명하여 후두의 입구를 확인합니다( 재료 표 참조).</li>
	<li>24G 카테터 바늘에서 약 0.5cm를 잘라내고 뭉툭한 바늘을 플라스틱 실드에 삽입합니다. 플라스틱 실드가 있는 뭉툭한 바늘을 기관 안으로 향하게 합니다. 바늘을 꺼내 플라스틱 실드를 기관에 남겨 둡니다.</li>
	<li>인공호흡기( 재료 표 참조)를 분당 137회(이 연구에 사용된 마우스에 최적화됨)의 호흡수와 일회 호흡량 0.18cc로 설정합니다. 호흡기 튜브를 카테터 실드에 연결하고 인공호흡기와 동기화된 흉부 움직임을 찾아 올바른 삽관을 확인합니다.</li>
	<li>카테터 실드에서 호흡기 튜브를 분리하고 예열된 온도 조절 수술판에 동물을 앙와위 자세로 놓습니다. 마우스를 인공호흡기에 다시 연결합니다.</li>
</ol>2. 왼쪽 관상 동맥의 영구 결찰
<ol><li>포비돈 요오드와 70 % 알코올로 수술 부위를 소독하십시오. 수술 부위를 고정하기 위해 중앙에 4분의 1 크기의 구멍이 있는 멸균 드레이프를 적용합니다. 한 쌍의 집게를 사용하여 피부를 부드럽게 들어 올리고 한 쌍의 수술 용 가위를 사용하여 왼쪽 가슴 대근육과 소근육 사이의 선을 따라 작은 (1.5-2cm) 피부 횡 절개를합니다. 알림: 가위는 절단 깊이와 방향에 필요한 제어를 제공하기 때문에 절개를 하는 데 사용되었습니다.</li>
	<li>집게와 해부 가위로 밑에있는 가슴 근육을 분리하십시오. 근육은 탄성 밴드에 부착 된 견인기를 사용하여 분리되었습니다.</li>
	<li>흉곽의 자연스러운 각도를 따라 한 쌍의 미세 가위로 세 번째 늑간 공간을 절개합니다. 이 단계에서는 심장과 폐의 손상을 방지하기 위해 각별한 주의를 기울여야 합니다.</li>
	<li>견인기를 사용하여 갈비뼈를 부드럽게 펴서 좌심실을 노출시킵니다. 심낭 지방을 옆으로 옮기고 좌심방 가장자리에서 심장의 정점을 향해 이어지는 LCA를 찾습니다.</li>
	<li>8-0 통과 바늘 홀더의 도움으로 LCA 아래의 나일론 봉합사. LCA를 이중 매듭과 두 번째 매듭(수정된 외과 의사의 매듭)으로 합자합니다. 참고: 하부 좌심실의 희석은 성공적인 LCA 결찰을 확인합니다. 이 외에도 트로포닌 측정, ECG 모니터링(ST 상승), 에코/생체 내 심장 게이트 MRI 또는 마이크로 CT 영상도 유사한 MI 병변을 확인하는 것이 좋습니다.</li>
	<li>견인기를 제거하고 22G 카테터 바늘을 흉강에 삽입합니다. 플라스틱 방패의 끝을 흉강에 남겨두고 바늘을 제거하십시오. 4-0 나일론 봉합사를 사용하여 흉곽을 닫습니다.</li>
	<li>주사기를 22G 플라스틱 실드에 연결하고 흉부를 부드럽게 눌러 흉강에 갇힌 과도한 공기를 천천히 제거하여 음의 기압을 설정합니다. 플라스틱 실드를 제거합니다.</li>
	<li>4-0 나일론 봉합사로 피부를 닫습니다.</li>
	<li>이소플루란 공급을 끕니다. 이 단계에서 마우스는 산소를 공급하는 인공 호흡기에 있습니다.</li>
</ol>3. 수술 후 관리
<ol><li>자발 호흡이 시작되면 인공 호흡기를 끄십시오. 참고: 이 절차는 마우스 준비에서 이 단계까지 동물당 약 30-35분이 소요됩니다.</li>
	<li>마우스를 열 램프 아래에 두고 깨어날 때까지 모니터링합니다. 동물은 흉골 누운 자세를 유지하기에 충분한 의식을 회복 할 때까지 방치해서는 안됩니다.</li>
	<li>수술 후 동물을 별도의 케이지에 넣고 완전히 회복 된 후에 만 다른 동물과 함께 원래 케이지로 되돌립니다.</li>
	<li>통증이나 불편함의 징후가 있는지 매일 마우스를 모니터링하십시오.</li>
	<li>수술 후 추가 2일 동안 6-8시간마다 부프레노르핀(0.1mg/kg)을 복강주사를 계속합니다.</li>
</ol>4. 심초음파 평가
참고: MI 후 28일째에 심부전의 매개변수를 평가하기 위해 심초음파를 수행했습니다.
<ol><li>수술 후 28일 후 3% 이소플루란과 1L/min 산소로 마우스를 마취시키고 멸균 안과용 윤활제를 눈에 바르고 제모 크림을 사용하여 가슴 털을 제거합니다. 포비돈 요오드와 70 % 에탄올로 가슴 부위를 세 번 소독하십시오.</li>
	<li>마취된 마우스를 앙와위 자세로 이미징 플랫폼( 재료 표 참조) 위에 고정하고 마취 시스템에 연결된 노즈 콘(1%-2% 이소플루란 및 1L/min 산소)을 사용하여 시술 내내 일정한 수준의 마취를 유지합니다.</li>
	<li>전극 젤로 4개의 발을 ECG 전극에 테이프로 붙입니다( 재료 표 참조). 직장 탐침을 삽입하여 동물의 온도를 모니터링하십시오 ( 재료 표 참조).</li>
	<li>스캐닝 젤( 재료 표 참조)을 가슴에 바르고 변환기를 수직으로 놓고 흉골주위선(흉부와 평행)으로 내린 다음 시계 반대 방향으로 35° 회전하여 흉골주위 장축을 얻습니다.</li>
	<li>이미징 소프트웨어(재료 표 참조)의 B 모드 이미징 버튼을 눌러 심장의 완전한 장축 보기를 얻을 수 있습니다. 게이트 크기와 밝기를 조정하고 나중에 측정할 수 있도록 Save Clip 또는 Save Frame을 사용하여 이미지를 저장합니다16.</li>
	<li>M 모드(모션 모드)로 전환하고 M 모드 축을 유두 근육 수준에 배치합니다. 게이트 크기를 조정하고 M 모드 시작 버튼을 누릅니다. 클립 저장 또는 프레임저장 16,17을 사용하여 이미지를 저장합니다.</li>
	<li>4D 모드 이미지 획득 프로세스가 자동화되므로 데이터를 수집하기 전에 ECG 및 호흡 신호가 활성 상태인지 확인합니다(그림 1).</li>
	<li>B 모드에서 데이터 수집을 시작합니다. 4D 스캔 패널을 열고 3D 모터를 시작합니다. 4D 스캔 패널에서 이미지 매개변수를 설정하고 스캔 버튼을 눌러 스캔 을 시작합니다. 2D 뷰에서 이미지를 검토한 후 4D로 로드 버튼을 사용하여 이미지를 4D 모드로 로드합니다.</li>
</ol>

<ol><li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics-2021+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics-2021 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 143 (8), 254(2021).</li>
<li>Mendis, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((World+Health+Organization+definition+of+myocardial+infarction%3A+2008-09+revision%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Epidemiology%22%5BJournal%5D)">World Health Organization definition of myocardial infarction: 2008-09 revision.</a> International Journal of Epidemiology. 40 (1), 139-146 (2011).</li>
<li>Frangogiannis, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of myocardial infarction.</a> Comprehensive Physiology. 5 (4), 1841-1875 (2011).</li>
<li>Smit, M., Coetzee, A., Lochner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+myocardial+ischemia+and+perioperative+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiothoracic+and+Vascular+Anesthesia%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of myocardial ischemia and perioperative myocardial infarction.</a> Journal of Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 34 (9), 2501-2512 (2020).</li>
<li>Johny, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+mediated+inflammation+in+coronary+artery+disease+with+Type+2+Diabetes+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Inflammation+Research%22%5BJournal%5D)">Platelet mediated inflammation in coronary artery disease with Type 2 Diabetes patients.</a> Journal of Inflammation Research. 14, 5131(2021).</li>
<li>Martin, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+models+of+myocardial+infarction%3A+from+mechanism+to+translation%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Preclinical models of myocardial infarction: from mechanism to translation.</a> British Journal of Pharmacology. 179 (5), 770-791 (2022).</li>
<li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+myocardial+infarction%3A+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models & Mechanisms. 13 (11), (2020).</li>
<li>Vasamsetti, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis+of+hematopoietic+progenitor-derived+adipose+tissue-resident+macrophages+contributes+to+insulin+resistance+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Apoptosis of hematopoietic progenitor-derived adipose tissue-resident macrophages contributes to insulin resistance after myocardial infarction.</a> Science Translational Medicine. 12 (553), (2020).</li>
<li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+coronary+arteries+of+the+C57BL%2F6+mouse+strains%3A+implications+for+comparison+with+mutant+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li>
<li>van Amerongen, M. J., Harmsen, M. C., Petersen, A. H., Popa, E. R., van Luyn, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryoinjury%3A+a+model+of+myocardial+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Pathology%22%5BJournal%5D)">Cryoinjury: a model of myocardial regeneration.</a> Cardiovascular Pathology. 17 (1), 23-31 (2008).</li>
<li>Lam, N. T., Sadek, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+heart+regeneration%3A+comprehensive+literature+review%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Neonatal heart regeneration: comprehensive literature review.</a> Circulation. 138 (4), 412-423 (2018).</li>
<li>Heusch, G., Gersh, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+acute+myocardial+infarction+and+strategies+of+protection+beyond+reperfusion%3A+a+continual+challenge%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of acute myocardial infarction and strategies of protection beyond reperfusion: a continual challenge.</a> European Heart Journal. 38 (11), 774-784 (2017).</li>
<li>Srikanth, G., Prakash, P., Tripathy, N., Dikshit, M., Nityanand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+rat+model+of+myocardial+infarction+with+a+high+survival+rate%3A+A+suitable+model+for+evaluation+of+efficacy+of+stem+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Stem+Cells+%26+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Establishment of a rat model of myocardial infarction with a high survival rate: A suitable model for evaluation of efficacy of stem cell therapy.</a> Journal of Stem Cells & Regenerative Medicine. 5 (1), 30-36 (2009).</li>
<li>Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+myocardial+infarction+model+using+permanent+ligation+of+left+anterior+descending+coronary+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery.</a> Journal of Visualized Experiments. (150), e59591(2019).</li>
<li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice%3A+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52206(2014).</li>
<li>Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+echocardiography+and+ultrasound+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine echocardiography and ultrasound imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (42), e2100(2010).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cardiac+morphological+and+functional+changes+in+mouse+model+of+transverse+aortic+constriction+by+echocardiographic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessment of cardiac morphological and functional changes in mouse model of transverse aortic constriction by echocardiographic imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (112), e54101(2016).</li>
<li>Vasamsetti, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sympathetic+neuronal+activation+triggers+myeloid+progenitor+proliferation+and+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Sympathetic neuronal activation triggers myeloid progenitor proliferation and differentiation.</a> Immunity. 49 (1), 93-106 (2018).</li>
<li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+left+anterior+descending+%28LAD%29+coronary+artery+ligation%3A+an+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: an improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55353(2017).</li>
<li>Alwardt, C. M., Redford, D., Larson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((General+anesthesia+in+cardiac+surgery%3A+a+review+of+drugs+and+practices%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Extra-Corporeal+Technology%22%5BJournal%5D)">General anesthesia in cardiac surgery: a review of drugs and practices.</a> The Journal of Extra-Corporeal Technology. 37 (2), 227-235 (2005).</li>
<li>Kolk, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LAD-ligation%3A+a+murine+model+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">LAD-ligation: a murine model of myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (32), e1438(2009).</li>
<li>Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. -H., McConnell, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+myocardial+infarction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Acute myocardial infarction in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (48), e2464(2011).</li>
<li>Kalogeris, T., Baines, C., Krenz, M., Korthuis, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+six-cell+biology+of+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22International+Review+of+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Chapter six-cell biology of ischemia/reperfusion injury.</a> International Review of Cell and Molecular Biology. , Academic Press. 229-317 (2012).</li>
<li>Scofield, S. L., Singh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confirmation+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion+injury+in+mice+using+surface+pad+electrocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Confirmation of myocardial ischemia and reperfusion injury in mice using surface pad electrocardiography.</a> Journal of Visualized Experiments. (117), e54814(2016).</li>
<li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+dynamics+of+cardiac+immune+cell+accumulation+following+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Temporal dynamics of cardiac immune cell accumulation following acute myocardial infarction.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 62, 24-35 (2013).</li>
<li>Xu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+fentanyl+preconditioning+on+cardiomyocyte+apoptosis+induced+by+ischemia-reperfusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Medical+and+Biological+Research%22%5BJournal%5D)">Protective effects of fentanyl preconditioning on cardiomyocyte apoptosis induced by ischemia-reperfusion in rats.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 50 (2), 5286(2017).</li>
<li>Leuschner, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+monocyte+kinetics+in+acute+myocardial+infarction+are+sustained+by+extramedullary+monocytopoiesis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Rapid monocyte kinetics in acute myocardial infarction are sustained by extramedullary monocytopoiesis.</a> Journal of Experimental Medicine. 209 (1), 123-137 (2012).</li>
<li>Leuschner, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silencing+of+CCR2+in+myocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Silencing of CCR2 in myocarditis.</a> European Heart Journal. 36 (23), 1478-1488 (2015).</li>
<li>Dutta, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((E-selectin+inhibition+mitigates+splenic+HSC+activation+and+myelopoiesis+in+hypercholesterolemic+mice+with+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">E-selectin inhibition mitigates splenic HSC activation and myelopoiesis in hypercholesterolemic mice with myocardial infarction.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (9), 1802-1808 (2016).</li>
<li>Jiang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+simple+method+for+induction+of+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A modified simple method for induction of myocardial infarction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (178), e63042(2021).</li>
</ol>

저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.

MI의 쥐 모델은 심혈관 연구 실험실에서 인기를 얻고 있으며, 이 연구는 재현 가능하고 임상적으로 관련된 MI 모델을 설명합니다. 이 프로토콜은 여러 가지 방법으로 LCA 결찰 과정을 개선합니다. 우선, 자일라진/케타민 또는 펜토바르비탈나트륨 14,15와 같은 주사 가능한 수술 전 마취제의 사용을 피합니다. 이소플루란 마취제만 사용했는데, 이는 동물 생존율을 높이고(수술 후 28일 생존율 >80%), 약물로 인한 합병증을 최소화하며, 다른 약제에 비해 심장 효과를 최소화하는 데 도움이 된다19. 그러나, 이소플루란은 다른 마취제에 비해 낮은 수준이기는 하지만 심장을 느리게 한다20. 이 프로토콜은 수술 후 통증과 불편함을 감소시키는 기관절개술21을 피하는 덜 침습적인 기관내 삽관을 포함합니다. 이전...

심혈관 질환은 매년 1,790만 명의 목숨을 앗아가는 주요 공중 보건 문제로, 전 세계 사망률의 31%를 차지합니다1. 심혈관 기형의 가장 흔한 유형은 관상 동맥 심장 질환이며, 심근 경색(myocardial infarction, MI)은 관상 동맥 심장 질환의 주요 증상 중 하나이다2. MI는 일반적으로 취약한 플라크의 파열로 인한 관상동맥의 혈전성 폐색에 의해 발생한다3. 결과적인 허혈은 영향을받는 심근의 심오한 이온 및 대사 변화뿐만 아니라 수축기 기능의 급격한 감소를 유발합니다. 심근경색은 심근 세포의 사멸을 초래하며, 이는 심실 기능 장애와 심부전을 유발할 수 있다4.
MI 환자에서 MI에 대한 연구는 MI5 환자로부터 얻은 조직의 부족으로 인해 제한적입니다. 이와 같이, MI의 쥐 모델은 질병 기전을 연구하고 잠재적인 치료 표적을 개발하는 데 유용합니다. MI의 현재 이용 가능한 쥐 모델에는 비가역적 허혈 모델(LCA 및 절제 방법) 및 재관류 모델(허혈/재관류, I/R)이 포함됩니다6. 마우스에서 좌관상동맥(LCA)의 영구 결찰이 가장 많이 사용되는 방법이며, 환자에서 MI의 병태생리학 및 면역학을 모방한다 7,8,9. 영구적인 MI는 전기적 손상이나 냉동 손상을 수반하는 절제 방법에 의해서도 유도될 수 있습니다. 절제 방법은 정확한 위치(10)에서 균일한 크기의 경색을 발생시킬 수 있다. 반면에, 흉터 형성, 경색 형태 및 분자 신호 전달 메커니즘은 절제 방법10,11에 따라 다를 수 있다. 쥐 I/R 방법은 재관류 요법의 임상적 시나리오를 나타내기 때문에 또 다른 중요한 MI 모델이다12. I/R 모델은 다양한 경색 크기, 초기 손상의 반응을 구별하는 어려움, 재관류6와 같은 문제와 관련이 있다.
LCA 결찰법은 널리 사용되고 있지만, 낮은 생존율과 수술 후 통증과 관련이 있다13. 이 프로토콜은 마우스의 준비 및 삽관, LCA 결찰, 수술 후 관리 및 MI의 검증을 포함하는 LCA 결찰의 쥐 수술 MI 모델을 입증한다. 침습적 기관 절개술14을 사용하는 대신, 이 방법은 기관내 삽관을 사용한다. 동물은 후두경을 사용하여 구강 인두를 비추어 삽관하므로 절차가 더 쉽고 안전하며 외상이 적습니다15. 마우스는 시술 내내 인공호흡기 지지대와 이소플루란 마취 하에 유지됩니다. 또한, 심초음파와 Masson's trichrome 염색을 수행하여 MI 후 심장 기능과 심장 섬유증을 각각 평가합니다. 전반적으로, 이 방법은 MI 후 병태생리학 및 염증을 연구하는 데 사용할 수 있는 MI의 신뢰할 수 있고 재현 가능한 외과적 쥐 모델을 제공합니다.

<table><tbody><tr><td>22 G 카테터 바늘</td><td>Exel INT</td><td>26741</td><td>흉강천자</td></tr><tr><td>24 G 카테터 바늘</td><td>Exel INT</td><td>26746</td><td>기관내 삽관</td></tr><tr><td>4-0 나일론 봉합</td>사 <td>Covetrus</td><td>29263</td><td>근육 및 피부 봉합</td></tr><tr><td>8-0 나일론 봉합</td>사 <td>S& T</td><td>3192</td><td>LAD</td></tr><tr><td>마취 기화기의</td> 결찰 <td>수의사 장비</td><td>VE-6047</td><td>마취 지원</td></tr><tr><td>동물 생리학 모니터</td><td>Fujifilm</td><td>VEVO 3100</td><td>모니터 심박수, 호흡수 및 체온 베타</td></tr><tr><td>딘 용액</td><td>PBS 동물 건강</td><td>11205</td><td>항산화</td></tr><tr><td>부 프레 노르핀</td><td>코브 트러스</td><td>55175</td><td>진통제</td></tr><tr><td>해부 현미경</td><td>OMANO</td><td>OM2300S-V7</td><td>쌍안</td></tr><tr><td>전기 면도기</td><td>Wahl</td><td>79300-1001M</td><td>면도</td></tr><tr><td>전극 젤</td><td>Parker Laboratories</td><td>W60698L</td><td>전기 전도성 젤</td></tr><tr><td>에탄올</td><td>Decon Laboratories</td><td>22-032-601</td><td>소독</td></tr><tr><td>겸자</td><td>FST</td><td>11065-07</td><td>스테인레스 스틸</td></tr><tr><td>거즈</td><td>Curity</td><td>CAR-6339-PK</td><td>멸균</td></tr><tr><td>열 램프</td><td>Satco</td><td>S4998</td><td>수술 후 관리</td></tr><tr><td>가열 패드</td><td>Kent scientific</td><td>Surgi-M</td><td>온도 조절</td></tr><tr><td>핫 비드 살균기</td><td>Germinator 500</td><td>11503</td><td>수술기구 살균</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Covetrus</td><td>29405</td><td>마취</td></tr><tr><td>Masson&rsquo; s 트리크롬 염색 키트</td><td>Thermoscientific</td><td>87019</td><td>심장 섬유증 측정</td></tr><tr><td>마이크로 바늘 홀더</td><td>FST</td><td>12500-12</td><td>스테인레스 스틸</td></tr><tr><td>마이크로 가위</td><td>FST</td><td>15000-02</td><td>스테인레스 스틸</td></tr><tr><td>안과 연고</td><td>Dechra</td><td>Puralube Vet</td><td>멸균 안구 윤활제</td></tr><tr><td>스캐닝 젤</td><td>Parker Laboratories</td><td>Aquasonic 100</td><td>수성 초음파 투과 젤</td></tr><tr><td>가위</td><td>FST</td><td>14060-11</td><td>스테인레스 스틸</td></tr><tr><td>소형 동물 후두경</td><td>Penn-Century</td><td>모델 LS-2-M</td><td>구인두 조명</td></tr><tr><td>소형 동물 인공 호흡기</td><td>하버드 장치</td><td>557058</td><td>인공 호흡기 지원</td></tr><tr><td>수술 용 조명</td><td>Cole parmer</td><td>41723</td><td>조명기 너비 (in) : 7</td></tr><tr><td>Vevo 3100 전임상 이미징 플랫폼</td><td>Fujifilm</td><td>VEVO 3100</td><td>심초음파</td></tr>, <tr><td>VevoLAB 소프트웨어</td>, <td>Fujifilm</td><td>VevoLAB 3.2.6</td><td>심초음파, 데이터 분석</td></tr></tbody></table>

좌측 관상동맥 결찰술: 심근경색의 외과적 쥐 모델

Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction

허혈성 심장 질환 및 그에 따른 심근 경색(MI)은 미국 및 전 세계에서 사망의 주요 원인 중 하나입니다. 심근경색 후 병태생리학적 변화를 탐색하고 향후 치료법을 설계하기 위해서는 MI의 연구 모델이 필요합니다. 마우스에서 좌관상동맥(LCA)의 영구 결찰은 MI 후 심장 기능 및 심실 리모델링을 조사하는 데 널리 사용되는 모델입니다. 여기에서 우리는 LCA의 영구 결찰에 의한 덜 침습적이고 신뢰할 수 있으며 재현 가능한 외과적 쥐 MI 모델을 설명합니다. 우리의 수술 모델은 쉽게 가역적인 전신 마취, 기관 절개술이 필요하지 않은 기관내 삽관 및 개흉술로 구성됩니다. MI를 보장하기 위해 심전도 및 트로포닌 측정을 수행해야 합니다. MI 후 28일째에 심초음파는 심장 기능과 심부전 매개변수를 식별합니다. 심장 섬유증의 정도는 Masson의 삼색 염색 및 심장 MRI로 평가할 수 있습니다. 이 MI 모델은 MI 후 병태생리학적 및 면역학적 변화를 연구하는 데 유용합니다.

그림 1은 가짜 마우스(그림 1A) 및 MI(그림 1B) 마우스의 심초음파 평가 동안 대표적인 활성 ECG 및 호흡 신호를 보여줍니다. 심초음파 데이터를 수집하기 전에 활성 ECG 및 호흡 신호를 확인하는 것이 중요합니다. 그림 2는 LCA 결찰 후 28일 후 심장 기능 매개변수의 심초음파 측정을 보여줍니다. 그림 2는 가짜(그림 2A) 및 MI(그림 2B) 심장의 흉골주위 단축 보기의 M-모드 이미지를 보여줍니다. 그림 2B는 LCA 결찰 후 결함 있는 심장 벽 움직임을 보...

여기에 제시된 것은 생쥐에서 왼쪽 관상 동맥의 영구 결찰을위한 수술 절차입니다. 이 모델은 심근 경색 후 병태생리학 및 관련 염증 반응을 조사하는 데 사용할 수 있습니다.

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In ...

마우스에서 좌동맥의 영구 결찰 수술 모델은 심근 경색 후 병태생리학 및 관련 염증 반응을 조사하는 데 사용할 수 있습니다. 이 방법은 쉽고 안전하며 덜 침습적인 MI의 신뢰할 수 있고 생산 가능한 마우스 모델을 제공합니다. 시작하려면 비드 살균기를 섭씨 250도로 예열하고 오토클레이브 수술 기구를 몇 분 동안 넣습니다.단단한 발가락 꼬집음에 대한 반응을 확인하여 마우스의 마취 깊이를 확인하십시오. 마우스의 체중을 측정하여 수술 전 진통제인 부프레노르핀의 용량을 추정하고 약물을 복강 주사합니다. 전기 면도기를 사용하여 흉부 왼쪽의 털을 다듬습니다.수술 부위를 소독 한 후 마우스를 경사 보드에 앙와위 자세로 놓습니다. 마우스의 머리와 팔다리를 각각 상악절치에 부착된 탄성 밴드와 접착 테이프를 사용하여 고정합니다. 마취 상태에서 건조를 방지하기 위해 멸균 안과 윤활제를 눈에 바르십시오.턱을 열고 혀를 구강 밖으로 부드럽게 잡아 당깁니다. 후두경을 사용하여 구강 인두를 조명하여 후두의 입구를 확인하십시오. 24 게이지 카테터 바늘에서 약 0.5cm를 잘라내어 뭉툭한 바늘을 플라스틱 실드에 삽입합니다.플라스틱 실드가 있는 뭉툭한 바늘을 기관 안으로 향하게 합니다. 바늘을 꺼내 플라스틱 방패를 기관에 남겨 둡니다. 인공호흡기를 분당 137회씩 호흡수로 설정하고, 본 연구에 사용된 마우스와 일회 호흡량 0.18 폐쇄 용량에 최적화하였다.호흡기 튜브를 카테터 실드에 연결하고 인공호흡기와 동기화된 흉부 움직임을 찾아 올바른 삽관을 확인합니다. 카테터 실드에서 호흡기 튜브를 분리하고 예열된 온도 조절 수술판에 동물을 앙와위 자세로 놓습니다. 마우스를 인공호흡기에 다시 연결합니다.수술 부위를 소독 한 후 한 쌍의 집게를 사용하여 피부를 부드럽게 들어 올리고 한 쌍의 수술 용 가위를 사용하여 왼쪽 가슴 대근육과 소근육 사이의 선을 따라 작은 피부 횡 절개를합니다. 집게와 해부 가위로 밑에있는 가슴 근육을 분리하십시오. 세 번째 늑간 공간을 절개 한 후 견인기를 사용하여 갈비뼈를 부드럽게 펴서 좌심실을 노출시킵니다.심낭 지방을 옆으로 옮기고 좌심방 가장자리에서 심장 정점으로 이어지는 좌측 관상 동맥을 찾습니다. 8-0 통과 바늘 홀더의 도움으로 왼쪽 관상 동맥 아래의 나일론 봉합사. 왼쪽 관상 동맥을 이중 매듭으로 묶고 두 번째 매듭을 짓습니다.견인기를 제거하고 22게이지 카테터 바늘을 흉강에 삽입합니다. 플라스틱 방패의 끝을 흉강에

left-coronary-artery-ligation-surgical-murine-model-myocardial

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

이 동영상은 심근 국소 빈혈의 pathobiological 및 pathophysiological 프로세스를 연구하기위한 빠르고 안정적​​인 모델을 사용하는 방법을 보여줍니다.

내사 - 결합 : 심근 경색의 Murine 모델

수많은 유전자 조작 및 / 또는 유전자, 단백질, 세포 및 / 또는 biomaterials의 intramyocardial 주사는 급성 국소 빈혈 / reperfusion 부상과 생쥐의 만성 리모델링의 연구에 시간의 차원에 따라 겹쳐있다. 이 동영상은 국소 빈혈 / reperfusion에 대한 microsurgical 절차, 영구적인 관상 동맥 내고, 그리고 intramyocardial 사출 공부를 보여줍니다.

경색의 Murine 모델에서 관상 동맥 내고과 Intramyocardial 사출

쥐 실험 심근 경색을 유발하는 데 사용되는 외과 수술은 심장과 왼쪽 폐의 앞쪽 표면을 시각화하기 위해 세 번째와 네 번째 갈비뼈 사이의 왼쪽 thoracotomy로 시작합니다. 왼쪽 관상 동맥이 출혈도 잡았되어 가슴이 폐쇄되고 마우스가 저절로 복구 할 수 있습니다.

마우스의 관상 동맥 결합에 대한 수정 기술

이 비디오에서는 좌측 전방 하행 관상 동맥을 영구적으로 결찰하여 심근 경색의 마우스 모델을 생성하는 수술 절차에 대해 설명합니다.

심근경색의 쥐 모델 생성: 마우스 모델에서 좌측 전방 하행 관상동맥의 영구 결찰을 위한 수술 절차

우리는 재현성을 높이기 위해 좌전 하행 동맥 (LAD)에 결찰의 위치에서 더 명확 수 있습니다 마우스 모델에서 심근 경색 (MI)을 시뮬레이션하기 위해 실험 허혈 / 재관류 (I / R) 손상을 유발하는 수술 방법을 소개합니다 마우스에있는 MI 실험.

왼쪽 앞쪽에 내림차순 동맥의 결찰을 통해 심근 허혈 - 재관류 손상의 생쥐 모델

심부전은 입원의 주요 원인이자 사망의 주요 원인입니다. 마우스에서 좌측 전방 하행 관상동맥의 영구 결찰 모델을 적용하여 심근경색 후 심실 리모델링 및 심장 기능 장애를 조사합니다. 마우스의 침습적 혈류역학적 측정 기술이 제시됩니다.

마우스의 왼쪽 전방 내림차순 관상 동맥의 영구 결찰 : 심근 경색 리모델링과 심장 마비의 모델

우리는 마우스 모델에서 좌측 전방 하행 동맥(LAD) 결찰에 대한 신뢰할 수 있는 방법을 제공합니다. 이 방법은 기관 내 삽관, 좌측 개흉술 접근법 및 흉강천자를 포함하는 다른 방법보다 상대적으로 덜 침습적입니다. 이 방법은 급성 및 만성 심근 경색(MI)에 대한 모델로 사용할 수 있습니다.

쥐 왼쪽 앞쪽에 내림차순 (LAD) 관상 동맥 결찰 : 심근 경색에 대한 개선 및 단순화 된 모델

여기서 우리는 마우스에서 좌측 전방 의 관상 동맥의 영구적 인 결찰을 달성하는 방법을 보여주는 외과 적 절차를 설명합니다. 이 모형은 심근 경색의 병리생리학 및 수반되는 생물학 프로세스를 조사하기 위하여 높은 관련성입니다.

왼쪽 전방 내림차순 관상 동맥의 영구 결찰을 사용하는 뮤린 심근 경색 모델

이 프로토콜은 심낭과 그 내용물을 보존하면서 마우스에서 심근 경색을 유도하는 단계를 설명합니다.

온전한 심낭 허혈성 설치류 모델

여기서는 미세 조작을 통해 좌측 전방 하행 관상동맥의 정밀 결찰에 의해 마우스에서 심근경색 또는 심근 허혈 재관류 손상을 유도할 수 있는 간단하고 재현 가능한 방법을 설명합니다.

마우스의 심근경색 및 심근 허혈-재관류 손상 유도

학습하세요 쥐의 좌측 관상동맥 결찰술을 통해 심근경색의 병태생리학과 염증 반응을 연구하는 방법을. 이 수술 모델은 재현성이 높고 덜 침습적이며 심혈관 질환 연구에 필수적인 도구입니다.

좌측 관상동맥 결찰술: 심근경색의 외과적 쥐 모델

더 많은 동영상 탐색