마우스 난모세포에서 세포질 미세소관 조직 센터의 다광자 레이저 제거

이 프로토콜은 마우스 난모세포의 방추체 배치를 위한 중요한 조절자인 세포질 MTOC를 선택적으로 제거하는 탁월한 전략을 제공합니다. 따라서 난모세포 감수분열을 조절하는 분자 메커니즘에 대한 우리의 이해에 기여합니다. 이 기술을 사용하면 높은 공간 정확도와 세포에 대한 광독성 영향을 최소화하면서 살아있는 난모세포 내에서 표적 절제를 수행할 수 있습니다. 이 프로토콜은 세포 생존력을 변경하지 않고 다른 강사의 선택적 기계적 섭동을 유도하는 데 사용할 수 있습니다. 이 프로토콜은 난모세포의 생존력을 손상시키지 않기 위해 가능한 한 최단 시간에 모든 세포질 MTOC를 제거할 수 있는 기술을 필요로 합니다. 따라서 실제 실험을 수행하기 전에 이 기술을 여러 번 연습하는 것이 필수적입니다. 시작하려면 CZB 배지에 글루타민과 밀리논을 보충하고 인큐베이터에 넣습니다. 컬렉션 및 문화 요리를 준비합니다. 60mm 및 35mm 페트리 접시에 각각 4개의 마이크로 방울의 수집 배지와 2개의 마이크로 방울의 배양 배지를 만듭니다. 그리고 미네랄 오일로 덮으십시오. 수집 접시를 슬라이드 보온기에 보관하고 37에서 배양합니다.