Name: 우심실 부전 및 기능적 삼첨판 역류의 만성 소 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-03-17T13:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 43 s
Description: 배우세요 양의 만성 모델에서 우심실 부전 및 기능적 삼첨판 역류를 유도하는 외과적 기법을. 이 방법은 심장 질환의 분자 경로를 밝히고 새로운 치료 전략을 개발하는 데 활용됩니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

이 연구는 Spectrum Health의 Meijer Heart and Vascular Institute의 내부 보조금으로 자금을 지원받았습니다.

이 프로토콜은 Michigan State University Institutional Animal Care and Use Committee(IACUC)(프로토콜 2020-035, 2020년 7월 27일 승인)의 승인을 받았습니다. 이 연구에서는 체중이 62kg± 7kg 인 성인 수컷 양 20 마리가 사용되었습니다.
1. 수술 전 단계
<ol><li>수술 12시간 전(하룻밤) 동물을 금식시킵니다.</li>
	<li>동물을 양 의자에 놓고(그림 1), 긴 11Fr 도입기 덮개(칼집 길이 = 10cm)를 사용하여 오른쪽 경정맥 캐뉼러를 준비합니다.</li>
	<li>IV 배치 부위를 따라 가위로 면도하십시오 - 오른쪽 경정맥의 정중선에서 측면으로 약 10-15cm 떨어진 목의 오른쪽 앞면.</li>
	<li>목의 오른쪽 앞쪽과 옆쪽이 노출되도록 동물의 머리를 왼쪽으로 돌립니다. 경정맥 코스를 현지화하십시오. 이를 용이하게하려면 목 아래쪽을 압축하여 정맥을 팽창시킵니다.</li>
	<li>클로르헥시딘과 알코올 기반 스크럽으로 세척하고 1% 리도카인으로 국소적으로 마취합니다.</li>
	<li>설명된 대로 목의 중간에서 위쪽 1/3에 있는 경정맥을 캐뉼레이트합니다.<ol><li>정맥에 수직 인 11 번 칼날로 정맥 위의 피부를 자릅니다.</li>
		<li>14G 혈관 카테터로 캐뉼러; 제자리에 있을 때(바늘에서 혈액이 나오거나 혈액이 발견됨) 바늘을 제거하고 카테터를 두고 가이드와이어를 통과시키고 카테터를 제거하고 11Fr 덮개를 놓고 고정합니다.</li>
		<li>짙은 적혈구를 빼내고 식염수 플러시를 수행하여 삽입 부위의 흐름과 부종의 부재를 확인하여 캐뉼라의 개통성과 적절한 배치를 보장합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>1.0-1.5 mg/kg 정맥 주사(IV)에서 프로포폴 유도를 시작합니다.</li>
	<li>5번 날이 있는 후두경을 사용하여 9번 기관내(ET) 튜브로 삽관합니다. 이를 위해 한 사람은 턱과 혀를 고정하고 다른 사람은 기관을 식별하고 ET 튜브를 삽입하고 밀봉 커프를 팽창시켜야 합니다. ET 튜브의 양측 호흡음과 응결에 의한 적절한 배치를 확인하십시오.</li>
	<li>진통제인 부프레노르핀을 0.01mg/kg으로 정맥 투여하고 항생제 예방을 위해 겐타마이신 240mg과 세파졸린 1g을 사용합니다.</li>
	<li>양 의자에서 수술대 위로 동물을 옮기고 오른쪽에 놓습니다.</li>
</ol>2. 수술 단계
<ol><li>15mL/kg(12-18회/분)으로 환기하고 산소 유량은 4L/분, 이소플루란은 2.5%-4.0%로 환기시킵니다. 턱 색조와 눈 회전을 확인하여 피험자가 수술 수준(3단계)에 있는지 확인하기 위해 적절한 마취를 확인합니다.</li>
	<li>안과용 oinment를 적용하여 양쪽 눈에 윤활유를 바르고 가스 및 음식물 배출을 보장하기 위해 위관을 삽입하십시오. 심전도(EKG), 맥박산소측정기(SpO2), 카프노그래프(ETCO2) 및 체온계를 연결합니다. EKG 사지 리드(I, II, III)를 악어 클립을 통해 피부에 부착하고, SpO 2 센서를 동물의 뺨에, ETCO2 튜브를 기관내관에 부착하고 온도 프로브를 콧구멍을 통해 비인두로 통과시킵니다.</li>
	<li>수술 현장을 준비하십시오. 왼쪽 전방 흉부를 면도하고 클로르헥시딘과 알코올 기반 스크럽으로 청소하고 멸균 커튼으로 덮습니다.</li>
	<li>네 번째 늑간 공간의 수준에서 10cm 길이의 피부와 피하 절개를하십시오.</li>
	<li>흉부 입구를 식별하고 늑간 공간을 아래쪽으로 계산하여 올바른 늑간 공간을 확인합니다. 그 후, 중앙과 네 번째 늑간 공간을 따라 절개를 계속하십시오.</li>
	<li>늑간 근육을 나누고 흉강을 열고 미니 개흉술 Finochietto 스타일 견인기로 갈비뼈를 펼칩니다. 개흉술을 시행하는 동안 절개 부위의 흉골 경계에 있는 왼쪽 내유선(LIMA)과 상부 경계에 있는 폐가 손상되지 않도록 주의하십시오.</li>
	<li>기본 심외막 심초음파를 수행하여 양심실 기능과 판막 능력을 평가합니다. 비표준 견해의 발생은 삼첨판 판막 (TV), 우심실 및 좌심실 기능 및 폐동맥 흐름에 초점을 맞춘 미니 개흉술 때문일 수 있습니다.</li>
	<li>절개 부위의 흉골 경계에서 LIMA를 식별하고 주변의 인접 조직을 제거하고 압력 모니터링을 위한 동맥 라인을 설정할 준비를 합니다.</li>
	<li>동맥 주위에 2개의 4-0 실크 봉합사를 배치하고, 하나는 근위부에, 다른 하나는 캐뉼라 삽입 부위의 원위부(동맥 카테터를 고정하는 데 사용됨)에 배치합니다.</li>
	<li>클립 어플리어가 있는 티타늄 클립을 사용하여 LIMA 원위를 계획된 캐뉼러 삽입 부위에 클립하여 캐뉼러 삽입 중 역류 출혈을 방지합니다.</li>
	<li>11번 칼날로 LIMA에서 카테터 둘레의 절반에 해당하는 수직 절개를 합니다.</li>
	<li>18G 혈관 카테터를 삽입하고 동맥 라인 모듈에 부착합니다. 약 120/80mmHg의 압력에 도달하면 이전에 배치한 두 개의 4-0 실크 봉합사를 사용하여 카테터를 제자리에 고정합니다.</li>
	<li>폐동맥 부비동 수준에서 시작하여 주 폐동맥 (MPA)을 따라 옆으로 4-5cm 가면서 왼쪽 횡격막 신경을 손상시키지 않도록주의하면서 심낭 절개술을 시행하십시오.</li>
	<li>열린 심낭에 4-5 개의 수축 스티치를 적용하여 심낭 우물을 만들면 폐 줄기와 대동맥 사이의 노출과 해부가 용이합니다.</li>
	<li>왼쪽 심방 부속기 수준에서 시작하여 AA를 향해 작업하는 뭉툭한 직각 집게를 사용하여 원점에서 약 2-3cm 떨어진 상행 대동맥(AA)에서 MPA를 해부합니다. AA에서 MPA를 완전히 분리하려면 전기 소작 또는 가위를 사용하여 두 구조 사이의 결합 조직을 제거하십시오.</li>
	<li>뭉툭한 직각 클램프로 MPA 주위에 탯줄 테이프를 통과시킵니다. MPA 부비동에서 말단 5cm 떨어진 0-1 모노필라멘트 지갑 끈 봉합사를 배치하여 MPA 압력 라인을 설정합니다.</li>
	<li>20G 혈관 카테터를 삽입하고 모니터링 라인에 연결합니다. 탯줄 테이프를 조이기 전에 정확한 MPA 및 동맥 라인 판독이 달성되었는지 확인하십시오. 동맥압과 폐압은 다양할 수 있지만 인간 환자의 가치와 비슷해야 합니다.</li>
	<li>탯줄 테이프의 양쪽 끝을 잡고 함께 클립하여 MPA의 내강을 줄입니다.</li>
	<li>클립 어플리어를 연속적으로 적용하여 밴드를 점진적으로 조이고 전신 혈압이 꾸준히 감소하기 시작할 때까지 각 클립을 이전 클립 아래에 배치합니다(그림 2). 이 시점에서 전신 혈압을 안정시키기 위해 마지막으로 배치된 클립을 제거합니다.</li>
	<li>최대 조임 및 안정적인 혈역학적 조건이 달성되면 원위 이동을 피하기 위해 5-0 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 MPA의 외막에 탯줄 테이프를 고정합니다.</li>
	<li>2.7단계에서와 같이 양심실 기능과 판막 능력을 평가하기 위해 밴딩 후 심초음파를 수행합니다. MPA 압력 라인과 동맥 라인을 제거하고 밴드와 동맥 라인이 배치 된 부위에서 출혈이 있는지 확인하여 좋은 지혈을 보장합니다.</li>
	<li>흉관을 왼쪽 흉부에 삽입하고 입구 부위는 초기 절개 부위 아래 늑간 공간을 만듭니다. 두 개의 Vicryl 크기 2 봉합사로 갈비뼈를 닫고 근육 및 피하 조직을위한 Vicryl 2-0 및 피부 용 Prolene 3-0의 3 층 연속 봉합사로 상처를 봉합합니다.</li>
	<li>출혈의 징후가 보이지 않으면 인공 호흡기에서 동물을 떼기 전에 흉관을 제거하십시오.</li>
	<li>인공 호흡기에서 동물을 떼어 내고 발관하고 단일 케이지로 옮기고 적어도 1 시간 동안 밀접하게 따르십시오. 중앙 IV 라인을 제자리에 두고 목에 느슨하게 감긴 붕대를 사용하여 고정합니다. 참고: 수술 후 0,05일 동안 부프레노르핀(1.2mg/kg)과 플루니신(3mg/kg)으로 수술 후 정맥 진통을 유지했습니다.</li>
</ol>

<ol><li>Haddad, F., Hunt, S. A., Rosenthal, D. N., Murphy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+function+in+cardiovascular+disease%2C+part+I%3A+Anatomy%2C+physiology%2C+aging%2C+and+functional+Assessment+of+the+right+ventricle%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Right ventricular function in cardiovascular disease, part I: Anatomy, physiology, aging, and functional Assessment of the right ventricle.</a> Circulation. 117 (11), 1436-1448 (2008).</li>
<li>Taramasso, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+growing+clinical+importance+of+secondary+tricuspid+regurgitation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">The growing clinical importance of secondary tricuspid regurgitation.</a> Journal of the American College of Cardiology. 59 (8), 703-710 (2012).</li>
<li>Mangieri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+and+implications+of+the+tricuspid+regurgitation%3A+From+the+pathophysiology+to+the+current+and+future+therapeutic+options%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Cardiovascular+Interventions%22%5BJournal%5D)">Mechanism and implications of the tricuspid regurgitation: From the pathophysiology to the current and future therapeutic options.</a> Circulation: Cardiovascular Interventions. 10 (7), 005043(2017).</li>
<li>Otto, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2020+ACC%2FAHA+Guideline+for+the+Management+of+Patients+With+Valvular+Heart+Disease%3A+Executive+summary%3A+A+report+of+the+American+College+of+Cardiology%2FAmerican+Heart+Association+Joint+Committee+on+Clinical+Practice+Guidelines%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">2020 ACC/AHA Guideline for the Management of Patients With Valvular Heart Disease: Executive summary: A report of the American College of Cardiology/American Heart Association Joint Committee on Clinical Practice Guidelines.</a> Circulation. 143 (5), 35-71 (2021).</li>
<li>Vonk-Noordegraaf, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+heart+adaptation+to+pulmonary+arterial+hypertension%3A+physiology+and+pathobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Right heart adaptation to pulmonary arterial hypertension: physiology and pathobiology.</a> Journal of the American College of Cardiology. 62, 22-33 (2013).</li>
<li>Yoganathan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tricuspid+valve+diseases%3A+Interventions+on+the+forgotten+heart+valve%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiac+Surgery%22%5BJournal%5D)">Tricuspid valve diseases: Interventions on the forgotten heart valve.</a> Journal of Cardiac Surgery. 36 (1), 219-228 (2021).</li>
<li>Vachiéry, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension due to left heart diseases.</a> Journal of the American College of Cardiology. 62, 25 Suppl 100-108 (2013).</li>
<li>Chin, K. M., Coghlan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterizing+the+right+ventricle%3A+Advancing+our+knowledge%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Characterizing the right ventricle: Advancing our knowledge.</a> American Journal of Cardiology. 110, 6 Suppl 3-8 (2012).</li>
<li>Malinowski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large+animal+model+of+acute+right+ventricular+failure+with+functional+tricuspid+regurgitation%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Large animal model of acute right ventricular failure with functional tricuspid regurgitation.</a> International Journal of Cardiology. 264, 124-129 (2018).</li>
<li>Borgdorff, M. A., Dickinson, M. G., Berger, R. M., Bartelds, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+failure+due+to+chronic+pressure+load%3A+What+have+we+learned+in+animal+models+since+the+NIH+working+group+statement%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Failure+Review%22%5BJournal%5D)">Right ventricular failure due to chronic pressure load: What have we learned in animal models since the NIH working group statement.</a> Heart Failure Review. 20 (4), 475-491 (2015).</li>
<li>Andersen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+right+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Diagnosis+and+Therapy%22%5BJournal%5D)">Animal models of right heart failure.</a> Cardiovascular Diagnosis and Therapy. 10 (5), 1561-1579 (2020).</li>
<li>Dixon, J. A., Spinale, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large+animal+models+of+heart+failure%3A+A+critical+link+in+the+translation+of+basic+science+to+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Large animal models of heart failure: A critical link in the translation of basic science to clinical practice.</a> Circulation: Heart Failure. 2 (3), 262-271 (2009).</li>
<li>Miyagi, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large+animal+models+of+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Failure+Review%22%5BJournal%5D)">Large animal models of heart failure with preserved ejection fraction.</a> Heart Failure Review. 27 (2), 595-608 (2022).</li>
<li>Sato, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large+animal+model+of+chronic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Society+for+Artificial+Internal+Organs+Journal%22%5BJournal%5D)">Large animal model of chronic pulmonary hypertension.</a> American Society for Artificial Internal Organs Journal. 54 (4), 396-400 (2008).</li>
<li>Bogaard, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+pulmonary+artery+pressure+elevation+is+insufficient+to+explain+right+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Chronic pulmonary artery pressure elevation is insufficient to explain right heart failure.</a> Circulation. 120 (20), 1951-1960 (2009).</li>
<li>Xie, X. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tricuspid+leaflet+resection+in+an+open+beating+heart+for+the+creation+of+a+canine+tricuspid+regurgitation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Interactive+Cardiovascular+and+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Tricuspid leaflet resection in an open beating heart for the creation of a canine tricuspid regurgitation model.</a> Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. 22 (2), 149-154 (2016).</li>
<li>Hoppe, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percutaneous+technique+for+creation+of+tricuspid+regurgitation+in+an+ovine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+and+Interventional+Radiology%22%5BJournal%5D)">Percutaneous technique for creation of tricuspid regurgitation in an ovine model.</a> Journal of Vascular and Interventional Radiology. 18, 133-136 (2007).</li>
<li>Malinowski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large+animal+model+of+functional+tricuspid+regurgitation+in+pacing+induced+end-stage+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Interactive+Cardiovascular+and+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Large animal model of functional tricuspid regurgitation in pacing induced end-stage heart failure.</a> Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. 24 (6), 905-910 (2017).</li>
<li>Ukita, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+large+animal+model+for+pulmonary+hypertension+and+right+ventricular+failure%3A+Left+pulmonary+artery+ligation+and+progressive+main+pulmonary+artery+banding+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A large animal model for pulmonary hypertension and right ventricular failure: Left pulmonary artery ligation and progressive main pulmonary artery banding in sheep.</a> Journal of Visualized Experiments. (173), e62694(2021).</li>
<li>Dufva, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+arterial+banding+in+mice+may+be+a+suitable+model+for+studies+on+ventricular+mechanics+in+pediatric+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Magnetic+Resonance%22%5BJournal%5D)">Pulmonary arterial banding in mice may be a suitable model for studies on ventricular mechanics in pediatric pulmonary arterial hypertension.</a> Journal of Cardiovascular Magnetic Resonance. 23 (1), 66(2021).</li>
<li>Verbelen, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+support+of+the+pressure+overloaded+right+ventricle%3A+An+acute+feasibility+study+comparing+low+and+high+flow+support%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Mechanical support of the pressure overloaded right ventricle: An acute feasibility study comparing low and high flow support.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 309 (4), 615-624 (2015).</li>
</ol>

저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.

이 모델에서 8주간의 폐동맥 밴딩은 우심실 기능 장애의 안정적인 만성 양 모델을 초래했으며 대부분의 경우 상당한 FTR을 초래했습니다. 제시된 만성 PAB 모델의 강점은 RV 반응에 미치는 영향이 다를 수 있지만 절차 중 정확한 후부하 조정을 포함합니다. 이 모델은 다양한 정도의 RV 부전 또는 FTR을 평가하는 데 적합하며 중증도는 폐동맥 수축 정도에 따라 조절됩니다. 더욱이, 폐고혈압 모델에서와 달리 주 PA의 수준에서 고정되고 안정적인 저항의 적용은 폐혈관 층의 변화가 후부하(11)에 미치는 영향을 배제한다. 폐동맥 색전술을 통한 폐고혈압의 양 모델은 RVF14를 예측 가능하게 유도하는 것으로 입증되지 않았습니다. 그러나, 정확한 TR 등급은 말할 것도 없고, 우심부전의 원하는 정도(표현형)15를 달성하기 위해 밴드를 적절하게 조이는 것은 어려울 수 있다. 이것은 모든 동물에서 유사한 피크 PA ...

우심실 부전(RVF)은 심장 환자의 이환율과 사망률에 기여하는 중요한 요인으로 인식되고 있습니다. RVF의 가장 흔한 원인은 좌측 심장 질환과 폐 고혈압입니다1. RVF가 진행되는 동안 기능적 삼첨판 역류(FTR)는 우심실(RV) 기능 장애, 환형 확장 및 판막하 리모델링의 결과로 발생할 수 있습니다. 중등도에서 중증의 FTR은 사망률의 독립적인 예측 인자이며2,3, 삼첨판 역류 사례의 80%-90%는 본질적으로 기능적인 것으로 추정된다4. FTR 자체는 후압 또는 예압에 영향을 미침으로써 불리한 심실 리모델링을 촉진할 수 있다5. 삼첨판 판막은 역사적으로 잊혀진 판막6으로 간주되어 왔으며 왼쪽 심장 질환의 치료가 관련 RV 병리 및 FTR7을 해결할 것이라고 믿었습니다. 최근 데이터에 따르면 이것이 잘못된 전략인 것으로 나타났으며 현재 임상 지침은 FTR4에 대한 훨씬 더 공격적인 접근 방식을 옹호합니다. 그러나 우심실 기능 장애와 관련된 중증 FTR의 병태생리학은 여전히 잘 알려져 있지 않아 차선의 임상 결과를 초래한다8. 현재 사용 가능한 RVF의 대형 동물 모델은 압력, 부피 또는 혼합 과부하를 기반으로 합니다. 우리는 이전에 RVF와 TR의 대형 동물 모델을 설명했으나 급성 환경에서만 설명했다9.
현재 연구는 RV 후부하(압력 과부하)를 증가시키고 RV 기능 장애 및 FTR을 유도하기 위한 폐동맥 밴딩(PAB)의 만성 양 모델에 초점을 맞추고 있습니다. 후부하 모델은 미세혈관 구조의 변화를 예측하기 어렵고 가능성이 더 높은 폐고혈압 모델에 비해 신뢰할 수 있고 재현 가능하다10. 이 연구의 목표는 좌측 심장 질환 및 폐고혈압 환자의 RV 압력 과부하를 가장 정확하게 모방하는 RVF 및 FTR의 만성 대형 동물 모델을 개발하는 것이었습니다. 이러한 모델의 확립은 RV 기능 장애 및 삼첨판 기능 부전과 관련된 심실 및 판막 리모델링의 병태생리학에 대한 심층 연구를 가능하게 할 것입니다. 양 모델은 승모판막에 대한 우리의 이전 연구와 인간과 양 심장 사이의 해부학적 및 생리학적 유사성을 뒷받침하는 출판된 문헌을 기반으로 선택되었습니다11,12,13.
이 연구를 위해 20마리의 성체 양(62kg ± 7kg)이 좌흉술과 주폐동맥 밴딩(PAB)을 받아 수축기 폐동맥압(SPAP)을 최소 두 배로 늘려 RV 압력 과부하를 유도했습니다. 동물을 8주 동안 추적 관찰하고, 심부전의 증상이 임상적으로 명백할 때 이뇨제로 치료하였다. RV 기능과 판막 능력을 평가하기 위해 주기적으로 감시 심초음파를 시행했습니다. 모델 개발을 위한 실험 프로토콜(8주)이 완료된 후, 동물을 정중 흉골 절개술 및 심외막 및 심장 내 구조에 초음파 측정 결정을 이식하기 위해 수술실로 다시 가져갔습니다. 이 절차는 심장 박동과 bicaval 제어와 함께 심폐 우회술을 사용하여 수행되었습니다. 심폐 우회술에서 동물을 떼거나 올바른 심장 지원을 위한 수축 촉진제 없이 안정적인 정상 상태 혈역학적 환경에서 초음파 측정 데이터를 획득하는 데 문제가 없었습니다. 우리는 가까운 장래에 말기 및 생존 실험 모두에서 우측 개흉술 접근법을 사용하여 삼첨판 고리 고리 성형술 및 기타 우심장 절차를 수행할 것으로 예상합니다. 현재의 경험에 비추어 볼 때 우리는 심폐 우회술에서 동물을 어려움없이 떼어 낼 수 있으며 장기 생존이 가능하다고 믿게합니다. 따라서 우리는 이 모델이 임상적으로 적절한 심장 절차의 수행을 허용할 것이라고 믿습니다. 아래는 양 실험 프로토콜을 수행하기 위해 수행되는 단계(수술 전후 및 수술)에 대한 설명입니다.

<table><tbody><tr><td>마취 기계 Dräger Narkomed MRI-2 DRÄGER</td><td></td><td>4116091-001</td><td></td></tr><tr><td>혈관 카테터</td><td>BD</td><td></td><td>BD382268 14GAx8.25cm</td></tr><tr><td>BD ChloraPrep 스크럽 틸 26 ml 애플리케이터와 멸균 용액</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Blade #11</td><td>Bard-Parker</td><td>371111</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphine&nbsp;</td><td>HIKMA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>세파졸린 1.0g</td><td>Hikma</td><td>0143-9924-90</td><td></td></tr><tr><td>Diprivan 200mg/20ml</td><td>63323-0269-29</td><td>FRESENIUS KABI</td><td></td></tr><tr><td>전기 수술 발전기 Valleylab Force FX</td><td>Valleylab</td><td>CF5L44233A</td><td></td></tr><tr><td>겐타마이신 설페이트 40 mg/mL</td><td>Fresenius</td><td>406365</td><td></td></tr><tr><td>i-Stat 혈액 분석기 MN 300</td><td>Abbott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>리도카인 HCl 1%</td>화<td>이자</td><td>243243</td><td></td></tr><tr><td>오픈 결찰 클립 애플라이어 호라이즌 미디엄</td><td>텔레플렉스</td><td>237061</td><td></td></tr><tr><td>PERMAHAND 실크 봉합사</td><td>PERMA HAND</td><td>SA 63H</td><td></td></tr><tr><td>피나클 도입부 칼집</td><td>Terrumo</td><td>RSS102</td><td>칼집 길이 10cm</td></tr><tr><td>Prolene 3-0</td><td>ETHICON</td><td>8684H</td><td></td></tr><tr><td>티타늄 클립 중간</td><td>Teleflex</td><td>2200</td><td></td></tr><tr><td>배꼽 테이프</td><td>Ethicon</td><td>EFA 1165</td><td></td></tr><tr><td>VICRYL 2 코팅 염색되지 않은 1X54" TP-1</td><td>ETHICON</td><td>J 880T</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl 2-0</td><td>ETHICON</td><td>J269H</td><td></td></tr></tbody></table>

우심실 부전 및 기능적 삼첨판 역류의 만성 소 모델

Chronic Ovine Model of Right Ventricular Failure and Functional Tricuspid Regurgitation

우심실 기능 장애와 관련된 중증 기능성 삼첨판 역류(FTR)의 병태생리학은 잘 이해되지 않아 차선의 임상 결과를 초래합니다. 우리는 FTR의 메커니즘을 조사하기 위해 FTR 및 우심부전의 만성 양 모델을 확립하기 시작했습니다. 20 마리의 성인 수컷 양 (6-12 개월령, 62 ± 7kg)이 왼쪽 개흉술과 기준선 심 초음파 검사를 받았다. 폐동맥 밴드(PAB)를 주폐동맥(PA) 주위에 배치하고 조여 수축기 폐동맥압(SPAP)을 최소 두 배로 늘려 우심실(RV) 압력 과부하와 RV 팽창 징후를 유도했습니다. PAB는 SPAP를 21 ± 2 mmHg에서 62 ± 2 mmHg로 급격히 증가시켰다. 동물을 8주 동안 추적 관찰하고, 심부전 증상을 이뇨제로 치료하고, 감시 심초음파를 사용하여 흉막 및 복액 수집을 평가했습니다. 추적 관찰 기간 동안 뇌졸중, 출혈 및 급성 심부전으로 3마리의 동물이 사망했습니다. 2개월 후, 정중 흉골 절개술과 심외막 심초음파를 시행했습니다. 살아남은 17마리의 동물 중 3마리는 경미한 삼첨판 역류, 3마리는 중등도의 삼첨판 역류, 11마리는 심한 삼첨판 역류가 발생했습니다. 8주간의 폐동맥 밴딩은 우심실 기능 장애 및 유의한 FTR의 안정적인 만성 양 모델을 초래했습니다. 이 대형 동물 플랫폼은 RV 실패 및 기능적 삼첨판 역류의 구조적 및 분자적 기초를 추가로 조사하는 데 사용할 수 있습니다.

모델 개발을 위한 실험 프로토콜(거의 8주)이 완료된 후, 동물을 수술실로 다시 데려가 정중 흉골 절개술과 심외막 및 심장 내 구조에 초음파 측정 결정을 이식했습니다. 이 절차는 이전에 우리 그룹이 자세히 설명한 바와 같이 심장 박동과 bicaval 제어와 함께 심폐 우회술을 사용하여 수행되었습니다9. 심폐 우회술에서 동물을 떼거나 안정적인 정상 상태 혈역학적 환경에서 초음파 측정 데이터를 획득하는 데 문제가 없었습니다.
폐동맥 밴딩은 SPAP를 21 ± 2 mmHg에서 62 ± 9 mmHg로 급격히 증가시켰다(p = 0.001). 추적 관찰 기간 동안 뇌졸중, 출혈 및 급성 심부전으로 3마리의 동물이 사망했습니다. 살아남은 17마리의 동물 중 3마리는 경미한 TR, 3마리는 중등도 TR, 11마리는 중증 TR이 발생했습니다. 추적 관찰 기간 후 평균 TR 등급(0-4; 0 = 없음 또는 미량, 1 = 경증, 2 = 중등...

우심실 부전 및 기능적 삼첨판 역류는 좌측 심장 질환 및 폐 고혈압과 관련이 있으며, 이는 환자의 이환율과 사망률에 크게 기여합니다. 우심실 부전 및 기능적 삼첨판 역류를 연구하기 위해 만성 양 모델을 구축하면 메커니즘, 진행 및 가능한 치료법을 이해하는 데 도움이 됩니다.

The pathophysiology of severe functional tricuspid regurgitation (FTR) associated with right ventricular dysfunction is poorly understood, leading to ...

상기 모델은 문헌에 이전에 기술된 것과 유사하다. 우리의 구체적인 목표는 고립된 우심장 기능 장애가 아닌 상당한 기능적 삼첨판 역류를 유도하는 것이었습니다. 이 기술은 향후 관련 우심실 환형 및 하부 리모델링과 조직 변화와 함께 기능적 삼첨판 역류의 메커니즘을 연구하는 데 사용될 수 있습니다.이 모델은 기능적 삼첨판 역류를 담당하는 분자 경로를 식별하고 치료를 위한 보다 효율적이고 복잡한 수술 기술을 확립하는 데 도움이 될 수 있습니다. 동물을 양 의자에 놓는 것으로 시작하십시오. 가위를 사용하여 오른쪽 경정맥의 정중선에서 측면으로 약 10-15cm 정도 목의 오른쪽 앞부분을 면도합니다.수술 부위를 소독 한 후 동물의 머리를 왼쪽으로 돌려 목의 오른쪽 앞쪽과 옆쪽을 노출시킵니다. 그런 다음 정맥을 팽창시키기 위해 목 아래쪽을 압축하여 경정맥 경로를 국소화합니다. 지금, 1%lidocaine를 가진 삽입 부위를 마취하십시오.11번 칼날을 사용하여 위의 피부를 정맥에 수직으로 자르고 14게이지 혈관 카테터로 캐뉼러를 삽입합니다. 혈관 카테터가 제자리에 있으면 바늘을 제거하고 가이드 와이어를 통과시킨 다음 카테터를 제거합니다. 그런 다음 11 프렌치 피복을 놓고 피복을 고정하기 전에 가이드 와이어를 제거합니다.짙은 적혈구를 빼내고 식염수 세척을 수행하여 삽입 부위의 흐름과 부종의 부재를 확인하여 캐뉼라의 개통성과 적절한 배치를 보장합니다. 프로포폴을 정맥 주사로 유도한 후, 원고에 기재된 바와 같이 5번 칼날이 있는 후두경을 이용하여 기관내관으로 삽관한다. 기관내관의 양측 호흡음과 응결에 의한 적절한 배치를 확인합니다.수술 부위를 준비한 후 왼쪽 전방 흉부를 면도하십시오. 그런 다음 소독된 수술 부위 주위에 멸균 커튼을 붙입니다. 네 번째 늑간 공간의 수준에서 10 센티미터 길이의 피부와 피하 절개를하십시오.흉부 입구를 식별하고 늑간 공간을 아래쪽으로 계산하여 올바른 늑간 공간이 절개되었는지 확인합니다. 그 후, 중앙과 네 번째 늑간 공간을 따라 절개를 계속하십시오. 이제 늑간 근육을 나누고 흉강을 열고 미니 개흉술 finochietto 스타일 견인기로 갈비뼈를 펼칩니다.절개 부위의 흉골 경계에 있는 왼쪽 내유선 동맥과 상부 경계에 있는 폐를 손상시키지 마십시오. 그런 다음 기본 심외막 심초음파를 수행하여 양심실 기능과 판막 능력을 평가합니다. 절개 부위의 흉골 경계에서 왼쪽 내유선 동맥을 확인하고 그 주변의 인접 조직을 제거하고 압력 모니터링을 위한 동맥 라인을 설정할 준비를 합니다.이제 두 개의 4-0 실크 봉합사를 동맥 주위에 배치하고 하나는 근위부에, 하나는 캐뉼라 삽입 부위에 원위부에 배치합니다. 클립 어플리어가 있는 티타늄 클립을 사용하여 캐뉼러 삽입 중 역류 출혈을 방지하기 위해 계획된 캐뉼라 삽입 부위 원위부에 왼쪽 내부 유선 동맥을 클립합니다. 11번 칼날로 왼쪽 내유동맥에 카테터 둘레의 절반을 수직으로 절개합니다.18게이지 혈관 카테터를 삽입하고 동맥 라인 모듈에 부착합니다. 동맥압선 판독으로 혈관 카테터의 적절한 배치가 확인되면 이전에 배치한 두 개의 4-0 실크 봉합사를 사용하여 카테터를 고정합니다. 다음으로, 폐동맥 부비동 수준에서 시작하여 왼쪽 횡격막 신경을 손상시키지 않도록 주의하면서 주 폐동맥을 따라 옆으로 4-5cm 진행하는 심낭 절개술을 시행합니다.열린 심낭에 4-5 개의 수축 스티치를 적용하여 폐 몸통과 대동맥 사이의 노출과 박리를 용이하게하는 심낭 우물을 만듭니다. 뭉툭한 직각 집게를 사용하여 원고에 설명 된대로 원점에서 약 2-3 센티미터 떨어진 상행 대동맥에서 주요 폐동맥을 해부합니다. 상행 대동맥에서 주요 폐동맥을 분리하려면 전기 소작 또는 가위를 사용하여 두 구조 사이의 결합 조직을 제거하십시오.무딘 직각 클램프로 주 폐동맥 주위에 탯줄 테이프를 통과시킵니다. 그런 다음 주요 폐동맥 부비동에서 1cm 떨어진 곳에 5-0 모노필라멘트 지갑 끈 봉합사를 배치하여 주 폐동맥 압력 라인을 설정합니다. 20게이지 혈관 카테터를 삽입하고 모니터링 라인에 연결합니다.탯줄 테이프를 조이기 전에 올바른 주 폐동맥과 동맥 라인 판독 값이 달성되었는지 확인하십시오. 탯줄 테이프의 양쪽 끝을 잡은 후 함께 끼워 주요 폐동맥의 내강을 줄입니다. 그런 다음 원고에 설명된 대로 클립 어플리어를 연속적으로 적용하여 밴드를 조입니다.앞서 설명한 바와 같이 양심실 기능과 판막 능력을 평가하기 위해 밴딩 후 심초음파를 수행합니다. 주요 폐동맥 압력 라인을 제거하십시오. 최대한의 조임 및 안정적인 혈역학적 조건이 달성되면 원위 이동을 피하기 위해 5-0 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 주 폐동맥의 외막에 탯줄 테이프를 고정합니다.그런 다음 동맥 라인을 제거하고 밴드와 동맥 라인이 배치 된 부위에서 출혈이 있는지 확인하여 지혈이 잘되도록합니다. 왼쪽 흉부에 흉관을 놓고 입구 부위가 초기 절개 부위 아래 늑간 공간을 한 번 차지합니다. 두 개의 vicryl 2-0 봉합사로 갈비뼈를 닫고 3 층 연속 봉합사로 상처를 봉합합니다.근육과 피하 조직에 대한 Vicryl 2-0 및 피부를위한 proline 3-0. 좋은 지혈이 확인되면 흉관을 제거하고 동물을 발관하십시오. 추적 관찰 기간 후 평균 TR 등급은 0.4에서 3.2로 증가하여 우심실 부전의 진행 징후와 8주간의 폐 밴딩 후 상당한 TR이 발생했음을 보여줍니다.심 초음파 검사와 일치합니다. 밴드를 과도하게 조이거나 조이면 동물이 일찍 사망하거나 재결 부전 및 기능적 삼첨판 역류를 유발하지 않을 수 있습니다. 심부전을 유도하는 추가 방법은 심실 아트 페이싱 또는 상행 대동맥 밴딩과 같은 초기 폐동맥 밴딩 후에 수행되거나 우심부전을 높이기 위해 밴드를 해제할 수 있습니다.

chronic-ovine-model-right-ventricular-failure-functional-tricuspid

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

우심실 (RV) 부전은 심혈관 질환의 발병 기전에 중요하다, 그러나 제한 방법은 평가를 위해 사용할 수 있습니다. 초음파 영상에서의 최근 발전은 세로 RV의 연구를위한 비 침습적 및 정확한 옵션을 제공합니다. 여기서, 우리 세부 RV 압력 과부하의 뮤린 모델을 사용하여 단계별 심 초음파 방법.

경 흉부 심 초음파에 의한 폐동맥 수축의 마우스 모델에서 마우스 오른쪽 심실 구조 및 기능의 평가

만성 혈전색전성 폐고혈압(CTEPH) 및 우심실(RV) 기능 장애는 폐동맥의 점진적인 폐색에 의해 새끼 돼지에서 유발되었습니다. 결과는 CTEPH 환자에서 관찰된 것과 매우 유사했습니다. 이 동물 모델은 CTEPH 및 RV 실패에 대한 병태생리학 및 치료 실험에 매우 유용한 도구가 될 것입니다.

만성 혈전 색 전성 폐 고혈압과 돼지에서 마우스 오른쪽 심실 기능의 평가

여기, 선물이 tachycardia 유발 심근 돼지에서 생산 하는 프로토콜. 이 모델은 진보적인 만성 심장 마비의 hemodynamics 및 적용 된 치료의 효과 공부 하는 강력한 방법을 나타냅니다.

돼지에서 만성 심장 마비 모델로 tachycardia 유발 심근

선물이 아즈를 유도 하 여 돼지 모델에서 오른쪽 심 실 부전을 만드는 프로토콜. 왼쪽 및 오른쪽 심 실 심장 출력 흐름을 사용 하 여 프로브 대동맥 및 폐 동맥에서 혈압 측정 뿐만 아니라 대동맥과 폐 동맥의 침입 모니터링 설명 합니다.

대동맥 및 폐 동맥 Hemodynamics 아즈의 큰 동물 모델에서의 침략 Hemodynamic 감시

우리는 만성 폐 고혈압을 가진 큰 동물 모형에 있는 급성 우측 심부전을 유도하고 표현하기 위하여 프로토콜을 제시합니다. 이 모형은 치료 내정간섭을 시험하기 위하여 이용될 수 있습니다, 적당한 심혼 측정기를 개발하기 위하여 또는 급성 오른쪽 심부전 병리학의 이해를 향상하기 위하여.

만성 혈전색전성 폐 고혈압의 큰 동물 모델에서 급성 오른쪽 심부전의 유도 및 표고

여기에서는 우심실의 3D 체적 평가를 위한 단계별 획득 및 분석 프로토콜을 제공하며, 주로 이 기술의 실현 가능성을 극대화하는 실용적인 측면에 중점을 둡니다.

3D 심 초음파를 사용한 우심실의 형태 학적 및 기능적 평가

이 원고는 적응성 및 적응형 표현형을 모델링하기 위해 심각한 오른쪽 심실 압력 과부하를 개발하는 수술 기술과 실험적 접근 방식을 설명합니다.

폐 고혈압 과 우심 심실 부전을 위한 대형 동물 모델: 왼쪽 폐 동맥 리깅 및 양에 있는 진보적인 주요 폐 동맥 밴딩

현재 프로토콜은 폐동맥 고혈압의 쥐 모델에서 우심실 형태 및 기능의 심초음파 특성을 설명합니다.

폐동맥 고혈압의 쥐 모델에서 우심실 기능의 종합적인 심초음파 평가

이 프로토콜은 복부 동정맥루(AVF)가 있는 마우스에서 출생 후 우심실 부피 과부하(VO) 모델의 설정 및 확인을 제시하며, VO가 출생 후 심장 발달에 어떻게 기여하는지 조사하는 데 적용할 수 있습니다.

출생 후 우심실 용적 과부하 마우스 모델의 확립 및 확인

우리는 폐동맥 밴딩에 의해 유발된 우심실 압력 과부하의 쥐 모델을 설명합니다. 삽관, 수술 및 심장 초음파에 의한 표현형에 대한 자세한 프로토콜이 논문에 포함되어 있습니다. 삽관 및 수술에는 맞춤형 기구가 사용되어 모델을 빠르고 저렴하게 복제할 수 있습니다.

압력 과부하로 인한 우심실 비대와 폐동맥 밴딩에 의한 실패의 Murine 모델

배우세요 양의 만성 모델에서 우심실 부전 및 기능적 삼첨판 역류를 유도하는 외과적 기법을. 이 방법은 심장 질환의 분자 경로를 밝히고 새로운 치료 전략을 개발하는 데 활용됩니다.

우심실 부전 및 기능적 삼첨판 역류의 만성 소 모델

더 많은 동영상 탐색