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JoVE Journal Biology
Differentiation and Imaging of Brown Adipocytes from the Stromal Vascular Fraction of Interscapular Adipose Tissue from Newborn Mice

Differentiation and Imaging of brown adipocytes from the Stromal Vascular Fraction of Interscapular Adipose Tissue from Newborn Mice(신생아 마우스의 견갑간 지방 조직의 기질 혈관 분획에서 갈색 지방세포의 분화 및 이미징)

Full Text
2,355 Views
04:46 min
February 3, 2023

DOI: 10.3791/64604-v

Ana-María Figueroa1, Francisca Stolzenbach1, Pablo Tapia1, Víctor Cortés1

1Department of Nutrition, Diabetes and Metabolism,Pontificia Universidad Católica de Chile

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study provides a detailed protocol for the differentiation of preadipocytes into mature brown adipocytes using interscapular brown adipose tissue harvested from newborn mice. The differentiated cells display characteristic lipid accumulation, express key adipogenic markers, and exhibit mitochondrial adaptations indicative of thermogenic functionality.

Key Study Components

Research Area

  • Adipocyte biology
  • Obesity research
  • Mechanisms of thermogenesis

Background

  • Investigation of brown adipose tissue's role in energy metabolism
  • Modeling conditions related to obesity and lipodystrophy
  • Importance of preadipocyte differentiation for studying adipogenesis

Methods Used

  • Immunofluorescence and transmission electron microscopy
  • Interscapular brown adipose tissue from newborn mice
  • Cell differentiation protocols and assays for mitochondrial characteristics

Main Results

  • Successful differentiation of preadipocytes into mature adipocytes marked by lipid droplet accumulation
  • Enhanced expression of adipogenic transcription factors and thermogenic markers on differentiation day seven
  • Characterization of mitochondrial morphology changes associated with adipogenesis

Conclusions

  • This protocol enables the reproducible study of brown adipocyte differentiation and functions.
  • Relevance to understanding obesity and potential therapeutic targets.

Frequently Asked Questions

What are preadipocytes?
Preadipocytes are undifferentiated cells that can develop into adipocytes, which store fat.
Why focus on brown adipocytes?
Brown adipocytes play a key role in thermogenesis and energy expenditure, making them important in obesity research.
What techniques are used to analyze differentiated cells?
Immunofluorescence and transmission electron microscopy are employed for detailed cellular analysis.
What markers indicate successful differentiation?
Key markers include PPAR-gamma, C/EBP-alpha, and UCP1, which are significantly upregulated in mature brown adipocytes.
What is the importance of mitochondrial morphology in this study?
Mitochondrial morphology is crucial for assessing the thermogenic potential and functionality of differentiated brown adipocytes.
How can this research be applied?
It can help in understanding obesity and developing potential therapeutic strategies for metabolic disorders.

지방세포는 갓 태어난 마우스의 견갑골 간 갈색 지방 조직의 기질 혈관 분획에서 분리하여 지질 방울을 축적하고 분자 마커를 발현하며 성숙한 갈색 지방세포의 미토콘드리아 형태를 보여주는 세포로 분화합니다. 이러한 세포는 면역 형광 및 투과 전자 현미경으로 추가로 분석됩니다.

이 프로토콜은 주요 지방형성 전사 인자, 성숙한 지방세포 마커를 발현하고 성숙한 갈색 지방세포의 열발생 전위 및 형태학적 표현형을 갖는 갈색 지방세포의 효율적이고 재현성 있는 분화를 가능하게 합니다. 이것은 신생아 마우스의 견갑골 간 갈색 지방 조직에서 성숙한 갈색 지방 세포의 특성을 가진 세포를 얻기 위한 간단하고 복제 가능한 2상 분화 절차입니다. 이 프로토콜은 비만 치료를 위한 표적으로 갈색 지방 조직의 활성화 메커니즘을 연구할 수 있도록 합니다.

그것은 지방이영양증의 병태생리학에 관련된 메커니즘을 결정하기 위한 모델이었습니다. 이 기술을 처음 수행하는 것은 어려울 것으로 예상됩니다. 성공적인 결과를 얻기 위해서는 상세한 프로토콜을 갖고 중요한 점을 강조하는 것이 중요합니다.

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생물학 Issue 192 기질 혈관 분획 견갑간 지방 조직 신생아 마우스 분리 단백질 1 UCP1 미토콘드리아 함량 세포 분화 공초점 면역형광 투과 전자 현미경

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