쥐의 경골 신경종 전위 모델의 수술 및 행동 테스트

이 방법은 신경종 통증에 대한 더 나은 치료법을 찾는 데 도움이 됩니다. 이 기술의 장점은 동일한 반복 모델에서 신경종 통증과 전신 통증을 독립적으로 측정할 수 있다는 것입니다. TNT 모델은 신경종 자체가 Von Frey 모노필라멘트로 기계적으로 자극될 수 있기 때문에 신경종 통증 테스트에 특히 적합합니다.

마취 된 쥐를 머리를 왼쪽이나 오른쪽으로 향하게하여 등을 대고 시작하십시오. 수술할 다리를 외과 의사 근처에 놓습니다. 내측 복사뼈가 위쪽을 향하도록 하부 뒷다리를 외회전시킵니다.

쥐를 6배 배율의 실체 수술 현미경 아래에 놓기 전에 면도한 부위를 요오드 기반 스크럽과 알코올을 번갈아 가며 최소 3회 소독합니다. 무릎을 찾아 메스를 사용하여 종아리 중간에서 발목까지 뒷발의 내측에서 2-3 센티미터의 세로 절개를하십시오. 필요한 경우 근육층이 보일 때까지 미세 가위로 피부와 피하를 더 엽니다.

표재성 신경혈관 다발을 근육층 위로 자유롭게 움직일 수 있는 2-3개의 흰색, 보라색 또는 빨간색 선으로 식별합니다. 신경 혈관 다발을 그대로 유지하십시오. 이 묶음에서 후방을 해부합니다.

다음으로, 비복근 근육 사이의 근막을 열기 위해 해부합니다. 근육의 근막 사이에는 경골 신경과 더 깊은 신경 혈관 다발이 발견 될 수 있으며, 이는 표재성 신경 혈관 다발의 약 3 배 크기입니다. 경골 신경이 경골 바로 뒤쪽으로 날아가기 때문에 경골 뼈를 추가 랜드마크로 사용하십시오.

주변 혈관 다발에서 경골 신경을 해부하기 위해 경골 신경을 무뚝뚝하게 움직여 경골 신경을 움직이면서 약간의 스트레칭을 보이는 노출 된 조직을 잘라냅니다. 전체 경골 신경이 노출되면 피하 근육에서 경골 전 피부가 해부 될 때까지 신경의 탈수를 피하기 위해 근육층을 다시 놓습니다. 피하 근육층에서 경골 전피를 해부하고 피하 터널을 만들려면 피부를 위로 잡고 무딘 미세 수술 도구를 사용하여 뭉툭한 끝을 피부와 평행 한 조직으로 밀어 넣습니다.

신경종 검사를 위해 해당 부위에 쉽게 접근할 수 있도록 터널의 끝이 경골 전 또는 측면에 위치하는지 확인하십시오. 발목 근처의 말단부에서 경골 신경을 절단한 후 현미경 배율을 10x 또는 16x로 변경하고 발목 근처의 절단에 근접한 경골 신경의 신경외신경을 식별합니다. 또는 경골 신경의 근위 분기점의 경우, 발목 근처의 절개에 근접한 내측 및 외측 화분 가지의 경막 신경을 확인하십시오.

조심스럽게 8-0을 배치하십시오. 핀셋으로 외신경을 잡고 약 0.5mm의 물린 상태로 신경과 외신경관 사이에 바늘을 넣어 근위 신경 말단의 신경외신경을 통한 나일론 봉합. 피하 터널 끝에서 바늘로 피하 주사를 물고 봉합사를 당겨 신경을 피하 터널로 측면으로 전치합니다. 매듭을 만들어 봉합사를 고정하십시오.

피부를 관통하지 않고 고정 된 신경 말단에 어두운 색으로 4-0의 두꺼운 봉합사를 놓습니다. 봉합사가 피부 바깥쪽에 보이는지 확인하십시오. 발과 근육을 움직인 후 신경이 제자리에 있는지 확인하십시오.

봉합사 끝을 4-0에서 약간 더 긴 봉합사 끝으로 잘라낸 다음 8-0에서 잘라냅니다 봉합 사. 현미경의 배율을 다시 6배로 변경하고 8-0을 사용하여 표피내 봉합사로 피부를 닫습니다. 봉합 사. 면봉을 사용하여 0.9% 염화나트륨으로 피부를 부드럽게 닦습니다.

방이 차가우면 깨끗한 케이지의 일부 아래에 가열 패드를 놓고 케이지에 쥐를 종이 타월 아래 편안한 위치에 두십시오. 음식과 물에 쉽게 접근 할 수 있도록하십시오. 과민증에 대한 무균 신경을 자극하려면 발 패드를 건드리지 않고 모발 경계에 가까운 측면에 모노 필라멘트를 바르십시오.

경골 신경을 과민증으로 자극하려면 뒷발의 화분 표면 중앙에 모노 필라멘트를 바르십시오. 신경종 부위 검사의 경우 코가 팔꿈치 접힌 부분을 향하도록 쥐를 잡습니다. 쥐가 오른손에 쥐고 있다면, 왼쪽 뒷발은 오른손 엄지 손가락과 집게 손가락 사이에 자유롭게 매달려 있어야합니다.

쥐가 잡고 있는 동안 차분하고 편안한지 확인한 후 기준선에서 노출된 뒷발의 경골 표면에 15그램 모노필라멘트를 부드럽게 놓습니다. 수술 후 15g의 모노필라멘트를 눈에 보이는 봉합사 위에 놓고 모노필라멘트에 충분한 힘을 가하여 모발을 구부리고 1초 동안 유지합니다. 신경종 부위의 Von Frey는 기준선에서 쥐가 15그램 모노필라멘트 적용의 10%에서 15%에 반응한다는 것을 보여주었습니다.

경골 신경종 전치 수술 1주일 후 반응률이 45%에서 50%로 증가했다 반대쪽 쪽에서 수술 후 반응은 기준선과 유사했다. 쥐의 약 20%에서 고통스러운 신경종이 발생하지 않았으며 반응률은 기준선에 비해 증가하지 않았습니다. 수술 12주 후 경골 신경 그루터기를 절개하고 전치한 후 모든 쥐에게 신경종이 발생했습니다.

경골 신경의 절개는 경골 신경에 의해 신경이 분포된 뒷발의 화분 쪽 중앙에서 기계적 민감도를 감소시켰습니다. 수술 후 1주일에 나타나는 과민증은 수술 후 3주부터 반대측 및 기준선과 유의하게 달랐으며 수술 후 12주까지 지속되었습니다. 온전한 비복 신경에 의해 신경이 분포된 뒷발의 화분 쪽의 측면 부분에서 쥐는 수술 후 1주일부터 반대쪽 및 기준선에서 유의하게 다른 기계적 과민증을 일으켰습니다.

수술 후 12주 동안 지속되었습니다. 반대쪽 발에서 기계적 민감도는 비강 또는 경골 신경에 의해 신경이 분포된 영역의 기준선과 비교하여 영향을 받지 않았습니다. 측면 전위를 위한 운동 범위를 위해 경골 신경의 길이를 벗어나는 것을 잊지 마십시오.

또한이 신경종 부위를 어두운 봉합사로 표시하는 것을 잊지 마십시오.