Name: 자유롭게 움직이는 마우스의 간단한 연속 포도당 모니터링 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-02-24T13:35:00.000+00:00
Duration: 3 min 25 s
Description: 학습하세요 마우스에서 연속 혈당 모니터링을 위한 간단한 CGM 이식법을. 비만 및 당뇨병 모델에서 포도당 관리 표현형을 식별하는 데 활용할 수 있는 이 방법은 복잡한 수술 없이 장기간 데이터 수집이 가능합니다.

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유익한 토론을 해주신 Dvir Mintz DVM과 동물 시설의 수의학 및 축산 직원, 그리고 우리 그룹 구성원들에게 감사드립니다. 이 연구는 DBZ에 수여된 이스라엘 과학 재단 보조금 1541/21의 지원을 받았습니다. DBZ는 Zuckerman STEM 교수입니다.

실험은 히브리 대학의 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 승인을 받았습니다.
알림: 모든 도구는 멸균되어야 하며 캐뉼라 취급은 멸균 기술을 사용하여 수행해야 합니다. 아래 프로토콜은 특정 CGM에 맞게 미세 조정됩니다. 이 프로토콜은 다른 CGM에 적용할 수 있습니다.
1. 시술 전 진통제 투여
<ol><li>5% 포도당과 0.45% 식염수를 멜록시캄과 함께 5mg/kg 체중의 피하 투여합니다.</li>
</ol>2. 마취 투여
<ol><li>마우스를 유도실에 넣고 뚜껑을 단단히 닫습니다. 유도 챔버의 마취 유도를 3% 이소플루란에서 500mL/min의 유속으로 설정합니다.</li>
	<li>마우스가 응답하지 않으면 챔버에서 마우스를 제거하고 노즈 콘을 마우스에 맞춥니다. interdigital 핀치로 마취 수준을 확인하십시오. 체중이 1g인 마우스에서 농도를 1%-1.5% 이소플루란으로 설정하고 유속을 100mL/min으로 설정합니다.</li>
	<li>마취 중 건조를 방지하기 위해 눈에 안과 용 연고를 바르십시오.</li>
</ol>3. 센서 준비
<ol><li>센서를 센서 장착 장치에 장착하여 센서의 테이프와 캐뉼라 쪽을 노출시킵니다(그림 1A). 바늘이 캐뉼라에 삽입되어 노출되므로 주의하십시오.</li>
	<li>캐뉼라 양쪽의 테이프에 두 개의 5-0 테이퍼 포인트 봉합사를 봉합합니다(그림 1A).</li>
</ol>4. 제모 및 소독
<ol><li>마우스 뒷면의 정중선에서 약 4cm x 4cm의 면적을 면도합니다.</li>
	<li>면도한 부위에 제모 크림을 투여하여 제모를 완전히 제거합니다.</li>
	<li>피부를 닦고 2 % 클로르헥시딘 글루 코 네이트와 70 % 이소 프로필 알코올을 함유 한 방부제를 사용하여 소독하십시오.</li>
</ol>5. 등쪽 피부 준비
<ol><li>날카로운 가위를 사용하여 척추 위의 면도 부위 중앙을 2mm 절개합니다(그림 1B).</li>
	<li>간단히 말해서, 캐뉼라가 피하 주머니에 쉽게 삽입 될 수 있도록 피부 아래에 뭉툭한 가장자리가있는 작은 집게를 삽입하여 작은 피하 주머니를 형성합니다 (그림 1B).</li>
	<li>3.2단계의 봉합사를 절개 부위의 양쪽 피부를 통해 통과시킵니다(그림 1C).</li>
</ol>6. 센서 삽입
<ol><li>센서 장착 장치에서 센서를 완전히 제거하고(캐뉼라가 바늘에서 비어 있음) 집게로 센서를 잡고 주변 테이프가 달라붙지 않도록 합니다.</li>
	<li>캐뉼라를 피하 주머니에 조심스럽게 삽입하십시오.</li>
	<li>양쪽의 봉합사를 당기고 조이고 묶어 센서를 제자리에 단단히 부착하여 시간이 지남에 따라 접착 테이프가 느슨해지면 캐뉼라가 피하 주머니에서 미끄러지는 것을 방지합니다.</li>
</ol>7. 센서 부착 및 봉합
<ol><li>내부 봉합사를 묶고 센서를 둘러싼 접착 테이프를 사용하여 센서를 뒷면에 단단히 부착합니다.</li>
	<li>센서 주위에 8개의 불연속 봉합사를 만들어 센서 테이프의 테두리를 피부에 부착합니다(그림 1D).</li>
</ol>8. 리더의 활성화
<ol><li>센서가 삽입되면 리더를 켜고 새 센서 시작을 누른 다음 제조업체의 지침에 따라 센서를 스와이프하여 리더를 활성화합니다.</li>
	<li>첫 번째 판독은 CGM을 설치한 후 몇 분 동안만 수행할 수 있습니다. 이 CGM의 경우 60분 후에 첫 번째 판독을 할 수 있습니다.</li>
</ol>9. 결과 읽기
<ol><li>리더를 마우스 가까이에 놓습니다(만질 필요가 없음). 센서에 저장된 모든 데이터는 리더로 전송됩니다. 알림: CGM 장치마다 과거 데이터 저장 용량이 다를 수 있습니다. 이 CGM의 경우 두 판독값 사이에 최대 8시간을 저장할 수 있습니다.</li>
</ol>10. 센서 제거
<ol><li>마우스를 마취합니다(섹션 2 참조).</li>
	<li>날카로운 가위를 사용하여 센서를 마우스 뒷면에 연결하는 봉합사를 자릅니다.</li>
	<li>센서를 부드럽게 제거하여 절개 부위의 봉합사를 제거하고 자릅니다.</li>
	<li>필요한 경우 단일 봉합사를 사용하여 마우스 뒤쪽의 절개 부위를 닫습니다.</li>
</ol>11. 데이터 분석
<ol><li>데이터 다운로드: CGM 제조업체에서 제공한 지침에 따라 데이터를 다운로드합니다. 참고: 각 CGM에는 사용자가 쉽게 액세스할 수도 있고 그렇지 않을 수도 있는 형식이 다릅니다. 이것은 CGM을 선택할 때 중요한 고려 사항입니다.</li>
	<li>제공된 소프트웨어로 분석하려면 Github(https://github.com/mika-littor/CGM-in-Mice-Analysis.git)의 readme 파일에 있는 지침에 따라 데이터 형식을 지정합니다.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64743/64743fig01.jpg"> 그림 1: 마우스에 센서 부착 (A) 빨간색 화살표로 표시된 두 개의 봉합사가 흰색 화살표로 표시된 CGM 센서 하단의 캐뉼라 양쪽에 있는 센서 테이프를 통과합니다. (B) 날카로운 가위를 사용하여 척추를 따라 면도한 부위의 중앙에 2mm의 작은 절개를 합니다. 뭉툭한 가장자리를 가진 작은 집게를 피부 아래에 잠깐 삽입하여 작은 피하 주머니를 형성하여 캐뉼라를 피하로 삽입 할 수 있습니다. (C) A 의 동일한 봉합사가 절개 부위의 양쪽에 피하로 전달됩니다. 빨간색 화살표는 A와 같이 센서에 부착된 봉합사를 표시하고, 파란색 화살표는 봉합사가 마우스 뒤쪽의 피부로 통과한 위치를 표시하고, 검은색 화살표는 절개를 나타냅니다. (D) 캐뉼라를 삽입한 후 내부 봉합사를 조이고 절개 부위에 가깝게 묶어 CGM을 고정합니다. 그런 다음 센서를 피부에 봉합합니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64743/64743fig01large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

<ol><li>Polonsky, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+past+200+years+in+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">The past 200 years in diabetes.</a> New England Journal of Medicine. 367 (14), 1332-1340 (2012).</li>
<li>Rees, D. A., Alcolado, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetic+Medicine%22%5BJournal%5D)">Animal models of diabetes mellitus.</a> Diabetic Medicine. 22 (4), 359-370 (2005).</li>
<li>Pearson, J. A., Wong, F. S., Wen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+non-obese+diabetic+%28NOD%29+mouse+model+in+autoimmune+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Autoimmunity%22%5BJournal%5D)">The importance of the non-obese diabetic (NOD) mouse model in autoimmune diabetes.</a> Journal of Autoimmunity. 66, 76-88 (2016).</li>
<li>Heydemann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+murine+high+fat+diet+as+a+model+for+Type+2+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Diabetes+Research%22%5BJournal%5D)">An overview of murine high fat diet as a model for Type 2 diabetes mellitus.</a> Journal of Diabetes Research. 2016, 2902351(2016).</li>
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<li>Klueh, U., Antar, O., Qiao, Y., Kreutzer, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+interleukin-1%2Finterleukin-1+receptor+antagonist+family+of+cytokines+in+long-term+continuous+glucose+monitoring+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Diabetes+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Role of interleukin-1/interleukin-1 receptor antagonist family of cytokines in long-term continuous glucose monitoring in vivo.</a> Journal of Diabetes Science and Technology. 7 (6), 1538(2013).</li>
<li>Klueh, U., Kaur, M., Qiao, Y., Kreutzer, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+role+of+tissue+mast+cells+in+controlling+long-term+glucose+sensor+function+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Critical role of tissue mast cells in controlling long-term glucose sensor function in vivo.</a> Biomaterials. 31 (16), 4540-4551 (2010).</li>
<li>Kogot-Levin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+the+metabolic+reprogramming+induced+by+sodium-glucose+cotransporter+2+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Mapping the metabolic reprogramming induced by sodium-glucose cotransporter 2 inhibition.</a> JCI Insight. , 164296(2023).</li>
</ol>

저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.

이 프로토콜은 까다로운 미세 수술이 필요하지 않고 출혈이나 마우스 취급을 포함하지 않는 마우스의 포도당 수준을 모니터링하는 간단하고 저렴한 방법을 제공합니다. 이 방법은 모든 시설에서 구현하기 쉽고 생쥐에게 사망, 통증 또는 과도한 불편을 유발하지 않습니다. 프로토콜에서 가장 중요한 단계는 포도당 센서의 캐뉼라를 마우스 피부 아래에 삽입하는 것입니다. 몇 개의 봉합사를 추가하면 캐뉼라가 더 오랫동안 제자리에 머무를 수 있습니다. 센서는 작기 때문에 마우스가 움직일 때 막히거나 잘못 배치될 수 있습니다. 센서는 내부 봉합사로 고정하고 몇 개의 봉합사로 마우스 뒷면에 부착해야 합니다. 이 프로토콜은 많은 상용 CGM 시스템에 적용할 수 있습니다.
마우스는 수술 후 체중이 감소했으며, 이는 수술 후 예상되며 수술 및 마취의 스트레스, 장치 운반 부담 및 이 연구에 사용된 특정 프로토콜에 의해 부과된 단일 하우징과 관련될 수 있습니다. CGM 장치가 점점 더 가볍고 정확해짐에 따라 이러...

당뇨병(DM)은 고혈당을 특징으로 하는 치명적인 질병입니다. 제1형 DM은 췌장의 인슐린 생성 베타 세포에 대한 자가면역 공격의 결과일 수 있습니다. 한편, 제2형 DM과 임신성 DM은 베타 세포가 포도당 수치1의 상승에 반응하여 충분한 인슐린을 분비하지 못하는 것을 특징으로 한다. 마우스는 생리학이 비슷하고 정상 포도당 수치가 인간의 포도당 수치에 가깝기 때문에 DM을 연구하는 데 사용되는 일반적인 모델 유기체입니다. 또한, 특정 마우스 균주는 주요 신호 전달 경로의 돌연변이 또는 특정 식단에 대한 노출 후 DM이 발생할 수 있으며, 이는 질병 모델링을 가능하게 합니다 2,3,4.
혈당은 일반적으로 마우스 꼬리 끝에서 작은 방울의 혈액(1-2 μL)을 추출하여 환자를 위해 설계된 혈당계를 사용하여 마우스에서 측정됩니다. 이 방법은 스트레스를 유발하고 포도당 수치에 영향을 미치고 자유롭게 행동하는 마우스의 혈당 수치 측정을 금지하거나 연구원이5 시까 지 가까이 있지 않을 때 마우스를 다루어야합니다. 생쥐의 출혈은 근처의 생쥐, 특히 혈당이 아직 측정되지 않은 동일한 케이지의 생쥐에게 스트레스를 유발하여 결과에 영향을 미칠 수 있습니다. 마우스는 핸들러에 따라 다르게 반응하며 포도당을 측정하는 사람은 마우스의 포도당 수치에 영향을 미칠 수 있습니다. 이러한 함정은 신중한 실험 설계를 요구하며 실험 간의 불일치의 기초가됩니다.
출혈 없이 자유롭게 움직이는 마우스에서 포도당 센서를 마우스의 대동맥궁에 이식하여 최첨단 원격 측정6을 사용하여 글루코스를 측정할 수 있다. 결과 측정은 매우 우수하고 장기간에 걸쳐 지속될 수 있지만 이러한 센서를 이식하는 것은 어렵고 원격 측정 시스템은 비용이 많이 들기 때문에 이 방법론을 적당히 채택하고 비전문 실험실에서는 채택하지 않습니다. 마우스의 치수 및 이들의 생리학에 맞춰진 피하 또는 다른 글루코스 센서가 최근 몇 년 동안 개발되었지만, 이들은 다시 고도로 숙련된 전문가를 필요로 하며, 경우에 따라서는 비용이 많이 든다 6,7,8,9,10.
원래 DM 환자의 포도당 수치를 모니터링하기 위해 개발된 상업용 연속 포도당 모니터(CGM)는 이식된 프로브보다 저렴한 비용과 기술 전문 지식 요구 사항으로 자유롭게 움직이는 마우스에서 포도당을 측정할 수 있는 또 다른 옵션을 제공합니다. 이러한 프로브는 이 프로토콜을 사용한 동료를 포함하여 몇 개의 실험실(5,11,12,13,14,15)에서 기초 연구에 사용되었습니다(16). 이러한 장치에는 일반적으로 센서, 실장 장치, 수신기 및 소프트웨어 응용 제품이 포함됩니다. 센서에는 효소 글루코 센서를 안내하는 캐뉼라, 접착 테이프, 에너지원, 단기 기억 및 데이터를 저장하여 수신기로 보내는 무선 통신 모듈이 있습니다. 수신기는 현재 포도당 수준을 보여주고 데이터를 서버로 보낼 수 있습니다. 이 수신기는 휴대폰일 수 있습니다. 소프트웨어 응용 프로그램은 환자의 혈당에 대한 환자 및 의료 팀에 대한 데이터를 제공합니다. 환자의 경우 장착 장치를 사용하여 센서를 쉽게 부착할 수 있습니다. 캐뉼라는 장착 장치를 피부에 대고 눌러 피하로 삽입되고 센서는 접착 테이프를 사용하여 제자리에 고정됩니다.
이것은 마우스의 포도당 수준을 측정하기 위해 상업용 CGM 장치를 적용하기 위한 자세한 프로토콜입니다. 이 프로토콜은 포도당 센서를 외과적으로 삽입하고 마우스에 부착하는 방법을 설명합니다. 기본적인 데이터 분석 및 데이터 시각화를 위한 스크립트가 제공됩니다. 잠재적인 함정, 문제 해결 및 표준 결과의 예가 제공됩니다. 아래 프로토콜은 특정 CGM에만 해당되지만 다른 유형의 상용 CGM이 출시되면 쉽게 조정할 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>2%&nbsp; 클로르헥시딘 글루코네이트 및 70%&nbsp; 이소 프로필 알코올</td><td>3M</td><td>ID&nbsp; </td><td></td>7000136290</tr><tr><td>5% 덱스트로스와 0.45% 염화나트륨 주입, USP</td><td>Braun</td><td>L6120</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo 바늘 홀더</td><td>FST</td><td>12061-02</td><td></td></tr><tr><td>Extra Fine Bonn 가위</td><td>FST</td><td>14084-08</td><td></td></tr><tr><td>FreeStyle Libre 1 리더</td><td>Abbott</td><td>ART27543&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>FreeStyle Libre 센서</td><td>Abbott</td><td>ART36687</td><td></td></tr><tr><td>FreeStyle Libre 센서 애플리케이터</td><td>Abbott</td><td>ART36787</td><td></td></tr><tr><td>거즈 패드</td><td>Sion 의료</td><td>PC912017</td><td></td></tr><tr><td>Graefe 집게</td><td>FST</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>제모 크림</td><td>Veet</td><td>3116523</td><td></td></tr><tr><td>고지방 고자당 다이어트</td><td>Envigo Teklad 다이어트</td><td>TD.08811</td><td></td></tr><tr><td>이소플루란, USP Terrell</td><td>Piramal</td><td>26675-46-7</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam 5 mg/mL</td><td>Chanelle Pharma</td><td>08749/5024</td><td></td></tr><tr><td>MiniARCO 클리퍼 키트</td><td>Moser</td><td>CL8787-KIT</td><td></td></tr><tr><td>PROLENE 폴리프로필렌 봉합사 5-0</td><td>Ethicon</td><td>8725H</td><td></td></tr><tr><td>Puralube 안과 연고</td><td>Perrigo</td><td>574402511</td><td></td></tr><tr><td>Q-팁&nbsp;</td><td>B.H.W</td><td>271676</td><td></td></tr><tr><td>SomnoSuite 저유량 마취 시스템</td><td>Kent Scientific</td><td>SOMNO</td><td></td></tr></tbody></table>

자유롭게 움직이는 마우스의 간단한 연속 포도당 모니터링

Simple Continuous Glucose Monitoring in Freely Moving Mice

마우스는 당뇨병과 같은 대사 질환을 연구하는 데 사용되는 일반적인 모델 유기체입니다. 포도당 수치는 전형적으로 꼬리 출혈에 의해 측정되며, 이는 마우스를 다루어야하고, 스트레스를 유발하며, 어두운주기 동안 자유롭게 행동하는 마우스에 대한 데이터를 제공하지 않습니다. 생쥐의 최첨단 연속 포도당 측정에는 생쥐의 대동맥궁에 프로브를 삽입하고 특수 원격 측정 시스템이 필요합니다. 이 까다롭고 비용이 많이 드는 방법은 대부분의 실험실에서 채택되지 않았습니다. 여기에서 우리는 기초 연구의 일환으로 마우스에서 포도당을 지속적으로 측정하기 위해 수백만 명의 환자가 사용하는 상업적으로 이용 가능한 연속 포도당 모니터의 활용과 관련된 간단한 프로토콜을 제시합니다. 포도당 감지 프로브는 피부에 작은 절개를 통해 마우스 뒤쪽의 피하 공간에 삽입되고 두 개의 봉합사를 사용하여 제자리에 단단히 고정됩니다. 장치는 마우스 피부에 봉합되어 제자리에 유지되도록 합니다. 이 장치는 최대 2주 동안 포도당 수치를 측정할 수 있으며 마우스를 다룰 필요 없이 데이터를 가까운 수신기로 보낼 수 있습니다. 기록된 글루코스 수준의 기본 데이터 분석을 위한 스크립트가 제공됩니다. 수술에서 전산 분석에 이르기까지이 방법은 비용 효율적이며 대사 연구에 매우 유용합니다.

수술 결과 18주 동안 고지방 고당식이(HFHS)를 먹인 8마리의 HSD:ICR 마우스(8주령)와 5마리의 마른 HSD:ICR 마우스(12주령)의 결과가 표시됩니다. 우리가 사용한 장치는 최대 8시간 동안 데이터를 저장합니다. 지역 동물 시설에 대한 접근은 07:00-19:00로 제한되어 생쥐가 활동하는 늦은 오후 시간에는 데이터 수집이 금지되었습니다. 따라서 마우스는 수술 전 7일 동안 8시 30분에서 20시 30분 사이의 어두운 시간과 함께 역광이 있는 방에 배치되었습니다. 모든 기기나 동물 시설에 꼭 필요한 것은 아니며, 12시간 이상 정보를 저장할 수 있는 기기를 사용하는 것이 좋습니다.
수술 후 사망자는 없었습니다. 수술은 실험 시간 동안 약 10%의 체중 감소를 가져왔습니다(그림 2A). 따라서 수술 후 처음 며칠 동안 체중 감량 중에 측정 한 내용은주의해서 해석해야합니다. 체중 ...

여기에서는 환자를 위해 설계된 상업용 연속 포도당 모니터를 마우스에 이식하고 결과를 분석하기 위한 스크립트를 제공하는 간단한 방법을 설명합니다.

Mice are a common model organism used to study metabolic diseases such as diabetes mellitus. Glucose levels are typically measured by tail-bleeding, which ...

우리의 프로토콜은 생쥐의 포도당 수치를 모니터링하는 간단하고 저렴한 방법을 제공합니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 까다로운 미세 수술이 필요하지 않으며 출혈이나 마우스 취급을 포함하지 않는다는 것입니다. 이 방법은 비만 및 당뇨병의 마우스 모델에서 파악하기 어려운 포도당 관리 표현형을 식별하는 데 사용할 수 있습니다.이 프로토콜을 시도하는 동안 가장 중요한 단계는 캐뉼라를 피부 아래에 삽입하고 캐뉼라를 제자리에 유지하기 위해 내부 봉합사를 조이는 것입니다. 마취 된 마우스 뒤쪽의 정중선을 면도하기 시작하고 제모 크림을 사용하여 완전한 제모를 보장합니다. 센서를 열고 로드합니다.그런 다음 센서를 센서 장착 장치에 장착하여 센서의 테이프와 캐뉼라 쪽을 노출시킵니다. 캐뉼라는 바늘에서 비어 있습니다. 캐뉼라 양쪽의 테이프에 두 개의 5-0 테이퍼 포인트 봉합사를 봉합합니다.등 피부 준비를 위해 날카로운 가위를 사용하여 척추 위의 면도 부위 중앙에 2mm 절개를하십시오. 캐뉼라가 주머니에 쉽게 삽입 될 수 있도록 피부 아래에 뭉툭한 가장자리가있는 작은 집게를 짧게 삽입하여 작은 피하 주머니를 만듭니다. 절개 부위의 양쪽에 있는 피부를 통해 봉합사를 통과시킵니다.센서 삽입의 경우 센서 장착 장치에서 센서를 완전히 제거하고 집게로 센서를 잡아 주변 테이프가 달라붙지 않도록 합니다. 캐뉼라를 피하 주머니에 조심스럽게 삽입하십시오. 양쪽의 봉합사를 당기고 조이고 묶어 센서를 제자리에 단단히 부착합니다.이렇게하면 시간이 지남에 따라 접착 테이프가 느슨해지면 캐뉼라가 피하 주머니에서 빠져 나가는 것을 방지하고 봉합사의 끝을 잘라내어 버립니다. 센서를 둘러싼 접착 테이프를 부착하고 센서 주위에 8개의 불연속 봉합사를 만들어 센서의 테두리를 피부에 테이프로 붙입니다. 센서를 활성화합니다.캐뉼라가 삽입되고 CGM이 성공적으로 활성화되면 수신기를 사용하여 데이터를 수집합니다. 제공된 코드를 사용하여 단일 마우스에서 3일 동안의 원시 출력 데이터가 여기에 표시됩니다. 축 매개변수 및 기타 모든 매개변수는 코드에서 변조할 수 있습니다.여기서는 명확성을 위해 3일 동안의 데이터가 표시됩니다. 피하 주머니를 만들고 몇 개의 봉합사를 추가하면 센서의 캐뉼라가 더 오랫동안 제자리에 머무를 수 있습니다. 이 기술을 사용하여 얻은 지속적인 데이터를 통해 특정 마우스 균주에서 파악하기 어려운 대사 표현형을 밝힐 수 있었습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

인슈린 과다 - euglycemic 클램프, 또는 인슐린 클램프는 인슐린 행동을 평가하기위한 황금...

의식 억제 마우스에 인슈린 과다 - euglycemic 클램프

이 비디오는 실험실 마우스에서 경구 포도당 내성 검사를 수행하는 방법을 소개합니다.

구강 포도당 내성 검사(OGTT): 마우스의 포도당 대사 측정

이 비디오는 쥐의 소변을 채취하여 포도당 수치를 평가하는 절차를 보여줍니다. 포도당 수치를 평가하려면 효소와 발색 염료로 코팅된 테스트 스트립을 샘플에 담그고 포도당 수치를 나타내는 색상 변화를 시작합니다. 소변 포도당 수치를 정량화하려면 포도당 농도가 상승하는 멀티웰 플레이트에 소변 샘플을 도입하고 반응 혼합물을 첨가한 다음 배양합니다. 흡광도를 측정하여 표준 곡선을 만들고 시료 흡광도를 기반으로 포도당 수치를 계산합니다.

마우스 소변 포도당 농도의 정성적 및 정량적 평가를 위한 분석

이 비디오는 쥐의 뇌에 지속적으로 약물을 주입하는 것이 혈당 수치에 미치는 영향을 보여줍니다. 포도당 대사는 공복 한 쥐의 꼬리에서 혈액을 채취하고 경구 포도당 투여 전후의 포도당 수치를 측정하여 평가합니다. 인슐린 내성은 특정 간격으로 포도당 수치를 기록하여 마우스에 인슐린을 주입하여 평가합니다.

말초 포도당 수치에 대한 마우스 뇌에 대한 지속적인 약물 주입의 효과 평가

이 프로토콜의 목표는 이식 가능한 무선 원격 측정 장치를 사용하여 의식이 있고 자유롭게 움직이는 마우스의 전신 혈압을 평가하는 것입니다.

텔레 메 트리를 사용하여 자유롭게 이동 마우스의 장기 혈압 측정

이 프로토콜은 길 항 근, 메트로CCL5, 마이크로 삼 투 펌프 뇌 주입 시스템을 사용 하 여 쥐의 뇌에 전달 하 여 시상 하 부에 chemokine (C C 모티브) ligand 5 (CCL5)의 역할을 연구 합니다. 이 일시적인 억제 CCL5 활동의 중단 hypothalamic 인슐린 신호, 포도 당 옹 졸 및 주변 조직의 인슐린 감도.

쥐의 뇌에 지속적인 약물 주입 시스템 주변 포도 당 옹 졸 Hypothalamic 인슐린 신호를 공부

현재 문서 생성 및 다이어트 유발 된 인슐린 저항 및 비만 모델 높은 지방 다이어트를 먹이 쥐의 대사 특성에 설명합니다. 그것은 더 상세한 프로토콜 경구 포도 당 내성 검사 및 포도 당 물질 대사에서 vivo에서의 전신 변경 모니터링 인슐린 내성 검사 수행을 갖추고 있습니다.

높은 지방 다이어트를 먹이 쥐 경구 포도 당 내성 검사 (OGTT)과 인슐린 내성 검사 (ITT)를 사용 하 여 포도 당 대사 Vivo에서 의 연구

이 기사에서는 생쥐의 뇌척수액(CSF)에서 포도당 농도를 증가시키기 위한 자세한 프로토콜을 설명합니다. 이 접근법은 높은 CSF 포도당이 생쥐의 신경변성, 인지 및 말초 포도당 대사에 미치는 영향을 연구하는 데 유용할 수 있습니다.

마우스 뇌척수액의 포도당 농도 증가를 위한 삼투압 미니펌프 이식

고혈당 클램프는 더 높은 혈당 농도를 유지하면서 인슐린 방출을 측정하는 데 사용됩니다. 저혈당 클램프는 역조절 반응에 의해 유도된 포도당 생성을 측정하기 위한 것입니다. 두 방법 모두 동일한 수술 절차를 사용합니다. 여기에서는 전신 포도당 대사를 평가하기 위한 클램프 기술을 제시합니다.

의식이 있는 쥐의 고혈당 클램프 및 저혈당 클램프

여기에서는 세포질 내 정자 주입(ICSI)-배아 이식(ET) 마우스 모델을 확립하기 위한 프로토콜을 제시하여 ICSI에 기인할 수 있는 포도당 대사의 연령 관련 변화를 관찰하고 인간 발달에 대한 잠재적인 장기적 영향에 대한 통찰력을 제공합니다.

세포질 내 정자 주입 후 생쥐 자손의 혈당 모니터링

학습하세요 마우스에서 연속 혈당 모니터링을 위한 간단한 CGM 이식법을. 비만 및 당뇨병 모델에서 포도당 관리 표현형을 식별하는 데 활용할 수 있는 이 방법은 복잡한 수술 없이 장기간 데이터 수집이 가능합니다.

자유롭게 움직이는 마우스의 간단한 연속 포도당 모니터링

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