우울증의 쥐 모델에서 몽골 전통 의학 Zadi-5에 대한 행동 및 네트워크 약리학 기반 분석

우울증 치료에 대한 Zadi-5의 치료 효능은 행동 검사를 통해 확립할 수 있으며, 네트워크 약리학은 그 효능의 기초가 되는 잠재적 메커니즘을 예측할 수 있습니다. 네트워크 약리학은 복잡한 작용 기전을 나타내는 전통 의약품의 탐색을 지원하고 연구에 필요한 시간과 비용을 최소화할 수 있습니다. 오픈 필드 테스트, 자당 소비 테스트 및 Morris Water Maze와 같은 테스트는 신경 장애의 동물 모델에서 식욕, 동기 수준, 학습 능력 및 기억력을 평가하기 위한 황금 표준입니다.

이러한 테스트는 간단하고 객관적이며 합리적인 평가 방법입니다. 동물 모델을 확립하는 것은 우울 장애 연구에서 신약의 병리학적 메커니즘과 효과를 이해하는 데 매우 중요합니다. 좋은 우울증 모델을 확립하기 위해 연구자들은 자극 강도를 적절하게 배열하고 조정해야 합니다.

시작하려면 선택한 우울증 자극을 격리와 결합하여 대조군을 제외한 모든 쥐에게 28일 동안 적용하고 쥐를 개별 케이지에서 키웁니다. 오픈 필드 테스트를 수행하려면 블랙박스를 동일한 면적의 9개의 정사각형 영역으로 나눕니다. 상자에 비디오 추적 분석 시스템을 장착하십시오.

마지막 개비지 후 어느 날, 쥐를 중앙 사각형에 놓고 3 분 동안 수평 및 수직 활동을 기록하십시오. 그런 다음 수평 활동으로 모든 일시 중지와 교차하는 사각형 수를 점수화하고 수직 활동으로 서 있고 손질하는 것을 수직 활동으로 채점합니다. 각 테스트 후에는 후속 테스트를 위해 쥐의 냄새를 제거하기 위해 75% 알코올로 상자를 청소하십시오.

다음으로, 섭취 전후에 각 병의 무게를 측정하여 자당 소비 테스트를 수행합니다. 그리고 이 방정식을 사용하여 0일, 7일, 14일, 21일, 28일에 60분 자당 선호도를 계산합니다. Morris Water Maze Test를 수행하려면 수영장을 4개의 사분면으로 나눕니다.

사분면을 1에서 4까지 정렬하고 숨겨진 플랫폼을 수면 아래 1cm 아래의 세 번째 사분면에 배치합니다. 어느 정도의 불투명도를 위해 수영장에 우유를 추가하십시오. 그런 다음 쥐 피험자를 다른 사분면의 미로에 넣어 120초 동안 플랫폼을 찾습니다.

그리고 Morris Water Maze 비디오 트레일 분석 시스템을 사용하여 대기 시간을 기록합니다. 쥐 피험자를 수영장의 고정된 위치에 놓습니다. 피험자가 120초 안에 숨겨진 플랫폼을 찾을 수 없는 경우 지연 시간을 120초로 기록합니다.

그런 다음 플랫폼을 제거하고 쥐를 물에 넣고 120초 동안 구역 횡단 횟수를 기록합니다. 중국 전통 의학 시스템의 약리학 웹페이지를 탐색하고 약초 이름 섹션에 myristicae 정액 씨앗, al-glandia-radiks 뿌리 및 piperis longi fructus를 입력하여 화학 물질의 이름을 얻습니다. 경구 생체이용률(OB)의 약동학 지수를 30% 이상으로 설정하고 약물 유사 지수를 0.18보다 크게 설정합니다.

한약 약전에서 활성 성분을 검색하여 각 성분의 화학명을 식별합니다. 다음으로, Pub Chem에서 식별된 화학 이름을 검색하여 이성질체 스마일 또는 잉크를 찾습니다. 이성질체 스마일 또는 잉크로 SEA, Batman 및 Swiss 표적 예측을 사용하여 활성 성분의 표적 단백질을 식별하고 겹치는 단백질을 찾습니다.

데이터를 Excel 파일로 복사합니다. 다음으로 GeneCards, DisGeNET 및 DrugBank에서 우울증 및 우울 장애라는 키워드를 사용하여 우울증에 대한 잠재적 단백질 표적을 검색하고 식별합니다. 데이터를 Excel 파일로 복사합니다.

벤 다이어그램을 탐색하고 목록 1에 있는 우울증의 대상을 업로드합니다. 그런 다음 목록 2에서 Zadi-5의 활성 구성 요소에 대한 표적을 업로드하고 제출하십시오. 벤 다이어그램을 가져와서 겹치는 대상 후보를 필터링합니다.

네트워크라는 스프레드시트를 구성합니다. 또한 type이라는 스프레드시트를 구성합니다. 시트를 Cytoscape로 내보내 네트워크, Zadi-5 허브 성분 질병 표적을 구축합니다.

문자열 데이터베이스에서 공통 대상을 설정하여 상호 작용을 분석합니다. 단백질 유형을 호모사피엔스로 설정합니다. 교호작용 임계값을 0.9로 설정하여 실험적으로 검증된 유형만 선택하고 외로운 섬 노드를 표시하지 않습니다.

DAVID 도구를 열고 Zadi-5의 86가지 잠재적 항우울제 표적을 시작 분석 브래킷에 붙여넣어 관련 신호 경로를 연구합니다. 케그 경로 문서를 다운로드하십시오. 농축 분석에서 PI3k-AKT 경로의 유전자를 선택하고 스프레드시트에 붙여 넣어 유형 및 네트워크 문서를 구성합니다.

네트워크 문서 유형을 Cytoscape로 내보내 PI3K-AKT 시각화 화합물 표적 경로 네트워크를 생성합니다. 실험한 동물군은 만성적으로 예측되지 않은 경미한 스트레스 또는 CUMS 자극 전에는 유의한 차이를 보이지 않았다. CUMS 모델을 설정한 후 그룹의 수직 및 수평 점수는 대조군보다 낮았습니다.

모델 그룹과 비교했을 때, 양성 대조군과 Zadi-5 그룹의 수직 및 수평 점수가 유의하게 높았다. 0일째에, 피실험군은 자당 소비에 유의한 차이가 없었다. 28일째 Zadi-5 및 양성 대조군은 모델 그룹보다 높았습니다.

Morris Water Maze에서 플랫폼을 찾기 위한 모델 그룹의 대기 시간은 대조군과 비교할 때 훨씬 더 높았습니다. 양성 대조군과 Zadi-5 그룹의 잠복기는 모델 그룹보다 낮았습니다. 구역 교차 횟수와 관련하여 모델 그룹은 대조군보다 교차 횟수가 적었습니다.

양성 대조군과 Zadi-5 그룹은 모델 그룹보다 더 많은 교차를 보였다. 벤 다이어그램 분석 결과, 1000개의 우울증 관련 단백질 표적 중 86개의 중복 표적이 Zadi-5의 중요한 우울증 관련 표적인 것으로 나타났다. 이러한 결과를 바탕으로 Zadi-5 허브 성분 질병 표적 및 표적 후보물질의 단백질-단백질 상호작용 네트워크 분석을 구축했습니다.

KEG 경로 분석에 따르면 PI3K-AKT 신호 경로는 7위를 차지했습니다. 그것은 많은 신호 경로와 관련이 있었습니다. 따라서, PI3K-AKT 경로는 다른 농축 경로보다 상대적으로 더 중요한 것으로 간주되었다.

이 시술을 시도하는 동안, 같은 종류의 자극을 연속으로 반복하지 않는 것이 중요하다. 온라인 데이터베이스에서 Zadi-5의 구성 요소를 분석한 후 액체 크로마토그래피, 질량 분석법 및 핵 자기 공명 분광법을 통해 검증 품질을 보장할 수 있습니다.