쥐 모델에서 합자와 지질다당류 주입의 조합을 통한 치주염 유도
February 17th, 2023
이 연구에서는 첫 번째 상악 어금니 주위에서 14일 동안 Porphyromonas gingivalis에서 추출한 지질다당류의 유지 합자와 반복 주사의 조합을 통해 치주염 유도의 쥐 모델을 제시합니다. 결찰 및 LPS 주사 기술은 치조골 손실과 염증을 유발하는 근막염 유도에 효과적이었습니다.
이것은 합자 배치와 결합된 지질다당류 주사 기술을 기반으로 하는 실험적 치주염의 쥐 모델로, 질병 진행을 연구하고 치주염 치료법을 평가하는 효과적인 방법을 제공합니다. 두 기술을 개별 방법과 결합하면 빠른 질병 유도, 파괴적인 염증 반응 증폭 및 결합 조직 손실 및 치조골 흡수 증가로 절정에 달합니다. 이 방법은 치주염 치료의 영향을 평가할 수있는 귀중한 기회를 제공합니다.
절차를 시연하는 것은 Dr.Oscar Villa, PhD. 수술 전에 모든 수술 도구를 멸균하는 것으로 시작하십시오. PBS 또는 식염수로 희석한 케타민 1.6ml와 자일라진 1mg을 혼합하여 케타민과 자일라진의 혼합물을 준비하고 육수를 섭씨 4도에서 보관하십시오.
아티파메졸을 PBS 또는 식염수에 밀리리터당 0.25mg의 최종 농도로, 부프레노르핀을 밀리리터당 0.03mg의 최종 농도로 희석하고 주식을 섭씨 4도에 보관하십시오. 멸균 식염수에 1 밀리리터의 PG-LPS를 준비하고 섭씨 영하 20도에서 보관하십시오. 실험에 암컷과 수컷 Wistar 쥐를 사용하십시오.
적절한 환경에서 동물을 그룹으로 수용하고 음식과 표준 물을 임의로 제공하십시오. 쥐를 마취시킨 후, 동물을 가열 된 수술 플랫폼에 등을 대십시오. 열 손실을 방지하기 위해 절차 중에 동물의 몸을 덮으십시오.
작은 노즈콘을 이용하여 100% 산소를 투여하고, 맥박산소측정기로 맥박수와 산소포화도를 모니터링한다. 이제 앞니 주위에 알루미늄 입 개그를 사용하여 쥐 입을 엽니다. 그것으로 혀를 수축시키고 상악과 하악을 개방적이고 편안한 작업 자세로 안정시켜 하악 어금니에 접근 할 수 있도록합니다.
총 4개의 흡수성 종이 점 번호 30을 사용하여 GCF를 수집하고, 약간의 저항이 있을 때까지 M1의 중구개 주위의 치은 틈새에 삽입합니다. 용지 끝을 30초 동안 같은 위치에 유지한 후 즉시 제거하십시오. 수집 후 종이 포인트를 즉시 플라스틱 바이알에 옮기고 분석이 수행될 때까지 섭씨 영하 80도에서 보관합니다.
봉합사의 말단 꼬리를 치열의 구개 쪽에 놓고 M1과 두 번째 상악 어금니의 접촉 사이에 근위 부분을 삽입합니다. 골막 미세 수술 엘리베이터를 사용하여 고랑 내에 봉합사를 삽입합니다. 이 수준의 조직은 부착된 치은의 좁은 영역을 나타내므로 M1의 협측 표면 주위에 합자를 매우 조심스럽게 감쌉니다.
봉합사가 잇몸 고랑으로 들어가도록 양쪽 끝이 조여졌는지 확인합니다. 그런 다음 봉합사의 끝을 외과 의사의 매듭으로 묶고 꼬리를 가능한 한 짧게 자릅니다. 고랑에 매듭을 삽입하십시오.
합자 위치 지정 후 멸균 식염수에 40마이크로리터의 PG-LPS를 M1의 중구개 쪽에 있는 치은연하 조직에 양측으로 주입합니다. 합자를 검사하고 조정하려면 마취된 동물을 등에 대고 시술 중에 동물 마취 유지를 위해 1% 이소플루란과 100% 산소가 포함된 작은 노즈 콘을 사용합니다. 앞니 주위의 알루미늄 입 개그를 사용하여 랩 입을 열고 혀를 수축시키고 상악과 하악을 개방적이고 편안한 작업 자세로 안정화하여 합자에 접근할 수 있도록 합니다.
골막 미세 수술 엘리베이터를 사용하여 합자를 치은에 대고 조이고 합자의 봉합사가 삽입되어 치은 주위에 염증을 유발하는지 확인합니다. 합자 조정 후, 앞서 설명한 바와 같이 M1의 중구개 쪽에 있는 치은연하 조직에 40마이크로리터의 PG-LPS를 양측으로 주입합니다. 14 일째에 동물을 희생 한 후 앞과 같이 GCF를 수집하십시오.
종이 포인트를 즉시 플라스틱 바이알에 옮기고 분석이 수행될 때까지 섭씨 영하 80도에서 보관합니다. 상악 어금니의 치조골의 2차원 이미지는 치주염 발병 후 기저 조절에서 더 많은 뼈 부피와 더 높은 치조골 손실을 보여줍니다. 시상 이미지의 분석은 기저 대조군에 비해 치주염 확립 후 M1 및 M2의 경골 간 영역에서 더 중요한 치조골 손실을 강조합니다.
희생 후, 구개는 다른 그룹 사이에서 M1의 치은 후퇴의 차이를 나타냈다. 치주염 그룹은 기저 대조군에 비해 상악 어금니 주위의 치은 이동과 염증이 더 현저합니다. 또한, 치주염 그룹은 대조군보다 GCF로부터 전염증성 사이토카인 1L-1 베타의 방출이 유의하게 높은 것으로 나타났다.
절차의 중요한 단계는 고랑에 봉합사와 매듭을 올바르게 배치하고, 합자를 적절하게 조정하고, 14일 프로토콜 동안 정확한 지질다당류 주입입니다.
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개요
이 연구는 지질다당체 주사와 리게이처 배치를 사용한 실험적 치주염의 쥐 모델을 제시합니다. 이 방법은 질병 진행을 효과적으로 유도하여 치주염 치료법의 평가를 가능하게 합니다.
주요 연구 구성요소
과학 영역
- 신경과학
- 치과 연구
- 염증 생물학
배경
- 치주염은 치아의 지지 구조에 영향을 미치는 일반적인 염증성 질환입니다.
- 그 진행을 이해하는 것은 효과적인 치료법을 개발하는 데 중요합니다.
- 동물 모델은 질병 메커니즘과 치료 중재를 연구하는 데 필수적입니다.
- 이 연구는 치주염을 효과적으로 시뮬레이션하기 위해 쥐 모델을 활용합니다.
연구 목적
- 치주염을 연구하기 위한 신뢰할 수 있는 쥐 모델을 확립하는 것입니다.
- 질병 진행에 대한 다양한 치료법의 영향을 평가하는 것입니다.
- 치주염과 관련된 염증 반응과 조직 손실을 평가하는 것입니다.
사용된 방법
- 상악 대구치 주위에 리게이처를 배치하여 치주염을 유도합니다.
- 포르피로모나스 잉갈리스에서 유래한 지질다당체의 반복적인 주사.
- 14일 동안 치조골 손실과 염증을 모니터링합니다.
- 수술 절차를 위한 마취제의 사용.
주요 결과
- 쥐 모델에서 치주염의 성공적인 유도.
- 상당한 치조골 손실이 관찰되었습니다.
- 영향을 받은 조직에서 증가된 염증 반응이 기록되었습니다.
- 이 모델은 치료 중재를 테스트하기 위한 귀중한 플랫폼을 제공합니다.
결론
- 리게이처와 LPS 주사의 결합 사용은 치주염을 유도하는 데 효과적입니다.
- 이 모델은 치료 옵션에 대한 추가 연구를 촉진할 수 있습니다.
- 향후 연구는 이 방법론을 기반으로 질병 메커니즘을 탐구할 수 있습니다.
