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혈관 및 종양 이미징을 위한 밝은 NIR-II 형광 프로브
혈관 및 종양 이미징을 위한 밝은 NIR-II 형광 프로브
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A Bright NIR-II Fluorescence Probe for Vascular and Tumor Imaging

혈관 및 종양 이미징을 위한 밝은 NIR-II 형광 프로브

Full Text
2,269 Views
05:51 min
March 17, 2023

DOI: 10.3791/64875-v

Yang Li*1,2, Xue Qiao*1, Xuechuan Hong1,2

1College of Science, Research Center for Ecology, Laboratory of Extreme Environmental Biological Resources and Adaptive Evolution,Tibet University, 2State Key Laboratory of Virology, Key Laboratory of Combinatorial Biosynthesis and Drug Discovery (MOE) and Hubei Province Engineering and Technology Research Center for Fluorinated Pharmaceuticals,Wuhan University School of Pharmaceutical Sciences

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

본 프로토콜은 NIR-II 광학 이미징 장치를 사용한 마우스의 상세한 실시간 NIR-II 형광 이미징 동작을 설명합니다.

고해상도 혈관 및 종양 영상화는 근적외선에서 형광 나노프로브에 의해 실현되어 혈관 질환 및 암을 지시하는 정확하고 효과적인 방법을 제공합니다. NIR-II 창에서 생체 내 이미징을 통해 살아있는 피사체를 깊이 들여다볼 수 있어 생물의학 연구 및 임상 응용을 위한 기회를 얻을 수 있습니다. 시중에서 판매되는 검은색 판지를 이미징 장치의 캐리어 중앙에 배치하여 근적외선 II 또는 NIR-II 이미징을 준비합니다.

그런 다음 샘플을 검은색 판지 위에 올려 캐리어 중앙에 오도록 합니다. 적절한 필터를 선택한 후 플랫폼 높이 조정을 수행합니다. 캐리어 콘솔 제어 영역의 터치스크린 인터페이스에서 플랫폼 옵션을 길게 눌러 위쪽으로 이동합니다.

그리고 플랫폼을 아래로 길게 눌러 아래쪽으로 이동합니다. NIR-II 염료 HLY1을 합성한 후, 캡슐화 매트릭스로서 DSPE-PEG-2K를 사용하여 나노침전법으로 HLY1 도트를 제조하였다. 이렇게하려면 섭씨 25도에서 초음파 처리를 위해 9 밀리리터의 물에 10 밀리그램의 DSPE-PEG-2K 용액이 들어있는 비커를 놓습니다.

그런 다음 1 밀리그램의 HLY1을 1 밀리리터의 테트라 히드로 푸란 또는 THF에 용해시킵니다. 그리고 초음파 처리를 진행하는 DSPE-PEG-2K 수용액에 용액을 천천히 첨가한다. 이어서, 투석에 의해 혼합물로부터 THF를 제거한다.

위의 용액을 7, 100G에서 10분 동안 한외여과로 원심분리하여 농축한 후 나중에 사용할 수 있도록 섭씨 4도 냉장고에 넣습니다. 생체 내 이미징을 위해 HLY1 도트를 마취된 마우스에 정맥 주사합니다. 그리고 3분 후, 광학 NIR-II 이미징 시스템을 이용하여 마우스의 전신의 혈관에 대한 NIR-II 형광 이미징을 진행하였다.

뇌 혈관 영상을 수집하기 위해 마우스의 머리에 더 초점을 맞춥니다. 광학 NIR-II 이미징 시스템의 기기 매개변수를 제곱센티미터당 90밀리와트 및 808나노미터 레이저로 설정합니다. 마우스에 HLY1 도트를 주입한 후 5분 후에 이미지를 수집하고 ImageJ 소프트웨어를 사용하여 데이터를 처리하였다.

90%의 물을 함유한 90% THF 용액에서 HLY1의 형광 강도는 THF 용액의 5배였으며, 이는 HLY1의 두드러진 응집 유도 방출 또는 AIE 특징을 나타냅니다. HLY1 도트는 1, 500 나노미터 저역 통과 또는 LP 필터 하에서 강한 형광 신호를 방출하여 NIR-IIb 이미징에 대한 적합성을 확립했습니다. HLY1 도트의 최대 흡수 및 방출 파장은 각각 740 나노 미터 및 1, 040 나노 미터였다.

또한, HLY1 도트의 유체역학적 크기는 동적 광산란에 의해 145나노미터로 결정되었습니다. HLY1 도트를 투여한 마우스에서, 뒷다리의 대뇌 혈관 및 미세 혈관은 1, 500 나노미터 LP 필터 하에서 NIR-II 이미징에 의해 명확하게 확인되었다. 또한, 종양 보유 마우스의 4개의 T1 종양도 NIR-II 영상에 의해 명확하게 볼 수 있었으며, 이는 HLY1 점의 향상된 투과성 및 보유 또는 EPR 효과를 나타냅니다.

이러한 모든 결과는 HLY1 도트가 혈관 및 종양 이미징에 적용할 수 있는 밝은 NIR-II 형광 프로브임을 시사했습니다. 생체 내 및 NIR-II 형광 이미징 하에서 물 현탁성 나노프로브의 제조는 절차의 가장 중요한 부분입니다.

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