제1형 당뇨병의 쥐 상처 모델을 구축하기 위한 프로토콜

제1형 당뇨병 상처 모델링 프로세스의 많은 세부 사항은 오류가 발생하기 쉽습니다. 경험 많은 연구자에게는 어려운 도전입니다. 따라서 이 프로토콜을 활용해야 합니다.

가능한 가장 간단한 방법으로 이 기술은 상처 치유 없음, 지연된 재상피화 및 혈관신생 감소와 같은 만성 당뇨병 상처의 일부 특성을 효과적으로 복제할 수 있습니다. 스트렙토 조토신 용액은 준비 직후에 사용해야합니다. 상처를 만들 때 상처의 크기와 위치를 조절해야합니다.

스트렙토 조토신 분말을 리터당 0.1 몰의 적절한 양으로 구연산 나트륨 완충액에 용해시켜 1 %의 농도를 달성하고 좋은 상자에 넣기 전에 약물 발진기를 사용하여 30 초 동안 흔들어줍니다. 1 % 스트렙토 조토신 용액의 복강 내 주사의 경우, 쥐를 잡고 주사 부위의 복부 피부를 노출시킨다. 75% 알코올에 적신 면봉을 사용하여 주사 부위를 두 번 소독하고 쥐의 머리를 복부 아래에 놓습니다.

바늘을 복부 정중선과 평행하게 45도에 삽입합니다. 그런 다음 바늘 각도를 30도까지 줄이고 2-3 밀리미터를 삽입하십시오. 면봉을 바르기 전에 바늘 플러그를 부드럽게 당기고 스트렙토 조 토신 용액을 주입하고 바늘을 빼냅니다.

3일차와 7일차 오전 9:00에 인과 혈당 수치를 측정하려면 꼬리 정맥의 위치를 찾으십시오. 꼬리 정맥에 구멍을 뚫어 출혈을 유도하기 전에 75% 알코올을 사용하여 쥐 꼬리를 두 번 소독하고 혈당계를 사용하여 혈당을 측정합니다. 완료되면 면봉으로 출혈을 멈춥니다.

상처 모델링 하루 전에 전기 면도기로 쥐의 등쪽에 있는 5 x 5cm 영역을 면도합니다. 면도한 부위를 따뜻한 생리식염수로 닦고 건조시켜 제모 크림을 5분 동안 바릅니다. 거즈로 해당 부위를 청소하고 따뜻한 생리 식염수로 잔여 제모 크림을 씻으십시오.

그런 다음 요오드에 적신 면봉을 사용하여 등쪽 피부를 두 번 소독하고 대체 라운드에서 75% 알코올을 사용합니다. 건조 후 직경 20mm의 원형 생검 펀치로 피부를 자릅니다. 집게로 피부를 관리한 다음 수술용 가위를 사용하여 펀치 컷 마크를 따라 피부의 전체 두께를 제거합니다.

완료되면 생리 식염수 면봉으로 출혈을 멈춥니다. 바셀린 거즈를 사용하여 상처를 덮으십시오. 당뇨병은 스트렙토조토신 주사 3일 후에 모든 래트에서 유도되었으며, 혈당 수준은 리터당 16.7밀리몰 이상이었다.

포도당 수준은 유도 5주 후에 안정화되었다. 당뇨병 그룹의 체중은 스트렙토 조토신 주사 후 점차 증가했다. 체중은 3주차에 감소했다가 4주차부터 다시 서서히 증가했습니다.

대조적으로, 정상 그룹 쥐의 체중은 꾸준히 증가하였다. 당뇨병 유도 3일 후의 평균 체중은 당뇨병 그룹보다 높았다. 상처 후 7 일과 14 일에 수행 된 거시적 분석은 재 상피화가 당뇨병 그룹보다 정상 그룹의 쥐에서 더 두드러지는 것으로 나타났습니다.

7일차와 14일차의 정량적 결과는 당뇨병 환자군에서 정상군보다 상처 치유율이 현저히 낮은 것으로 나타났다. 그러나 14일째 되는 날에는 당뇨병 환자군에서 상처 치유율이 90%를 상회하였다. 당뇨병 상처는 눈에 보이는 모세혈관이 더 적은 모낭과 피지선의 부분적인 손실을 보여주었습니다.

CD31 면역염색에 의해 분석된 상처 혈관신생에서, CD31 발현의 평균 광학 밀도는 상처 부위에서의 혈관신생이 당뇨병 환자군에서보다 정상군에서 유의하게 더 높은 것으로 나타났다. 상처를 모델링할 때 표피, 진피 및 피하 조직을 포함하여 전방 두께의 피부가 제거되었는지 확인합니다.