Name: 경막하 연피질검사(ECoG) 어레이 이식 및 Minipig의 장기 피질 기록 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-03-31T14:15:00.000+00:00
Duration: 8 min 30 s
Description: 학습하세요 경막하 연피질검사(ECoG) 어레이 이식 및 미니피그의 장기 피질 기록 방법을 통해 신경 장치의 안전성과 효능을 평가하는 기술을 익히세요. 이 연구는 신경공학 발전에 기여합니다.

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저자는 Bertarelli Foundation과 SNSF Sinergia 보조금 CRSII5_183519의 재정적 지원에 감사드립니다. 저자들은 또한 조직학을 위한 염색 프로토콜 개발에 도움을 준 EPFL의 Katia Galan, 제조 공정에 도움을 준 제네바에 있는 Wyss Center for Bio and Neuroengineering의 Neural Microsystems Platform 직원, 동물 관리를 위한 제네바 대학(UNIGE)의 University Medical Center(CMU)의 동물 플랫폼 직원, 미니피그의 수술 지원 및 수술 후 관리(John Diaper, Xavier Belin, Fabienne Fontao, Walid Habre), 제네바 대학교 생의학 영상 센터(CIBM) 팀원(Julien Songeon, François Lazeyras, Rares Salomir), 제네바 대학병원(HUG) 병리과 직원(Sami Schranz, Francesca Versili, 루벤 소토(Ruben Soto)와 코렐린 에거(Coraline Egger), 그리고 그르노블-알프스 대학(Université Grenobles-Alpes)의 블레이즈 이버트(Blaise Yvert)가 만성 미니피그 실험에 대한 의견을 제시하고 의견을 교환했습니다. 저자들은 제조 공정과 미니피그 실험에 도움을 준 Neurosoft Bioelectronics SA 직원들의 도움에 감사를 표합니다(Benoit Huguet 및 Margaux Roulet).

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F.F.와 S.P.L.은 연질 전극 어레이를 개발하는 Neurosoft Bioelectronics SA의 공동 설립자이자 주주입니다.

여기서는 소프트 ECoG 어레이의 장기 이식 및 평가 방법을 보고합니다. 이 연구에서 우리는 측두엽(여기서는 청각 피질을 표적으로 함)에 기능적 전극 그리드의 양측 이식을 위한 일관된 최소 침습적 수술 접근 방식을 설계했습니다. 먼저 연구 기간(6개월) 동안 유발된 전위를 성공적으로 기록하고 전극의 전기화학적 특성을 추적하여 그리드의 기능을 평가했습니다( 그림 6 참조). 둘째, MRI를 사용하고 MRI와 완전히 호환되는 시스템을 구축하여 생체 내 그리드의 생물학적 안전성을 평가하고, 조직 수집 및 면역염색을 위한 프로토콜을 설계하여 사후 검시를 평가했습니다.
침습성을 최소화하기 위해 개두술 창의 크기를 최적화했습니다. 측두엽에 위치한 청각 피질에 도달하고 측두근 절제를 피하기 위해 임플란트를 경막 아래로 밀어 넣는 기술을 개발했습니다. 이 기술을 사용하면 노출된 뇌의 표면을 크게 줄이면서도 멀리 있는 목표물에 도달할 수 있습니다. 이러한 유형의 이식은 맹목적으로 보일 수 있지만, 수술 중 평면 X-ray에서 시각화된 장치에 방사선 불투과성 마커를 구현하면 위치를 확인할 수 있으며 어레이가 경막 아래로 접히지 않도록 할 수 있습니다. 경막하 슬라이딩은 우리가 수행한 대부분의 반복에서 안전한 것으로 입증되었습니다. 또한 슬릿 접근법의 두절개술은 개두술이 열려 있는 동안 뇌 팽창을 최소화하고 염증 반응을 편향시킬 수 있는 인공 경막과 같은 추가 재료 없이 임플란트 주변의 봉합을 용이하게 합니다. 마지막으로, 이 수술적 접근법의 강점은 다른 피질 영역으로 전치할 수 있다는 것이다. 좌표, 개두술 위치 및 장치 크기를 모두 조정할 수 있으므로 이 방법은 대부분의 피질 영역을 대상으로 할 수 있습니다.
여기에 제시된 수술 방법은 시간 경과에 따른 생체 통합에 대한 기능 평가 및 조사와 함께 이 보고서에 사용된 연질 전극 기술에 국한되지 않습니다. 인간 번역을 위해 개발 중인 다른 경막하 전극은 동일한 프로토콜로 평가할 수 있습니다. 이 방법의 강점은 케이블 및 받침대와 같은 대부분의 부품이 모듈식이고 개인화가 가능하며 테스트 중인 특정 장치에 적용할 수 있다는 사실에 달려 있습니다. 또한, 피질 내 또는 심층 침투 프로브는 경막하 전극 대신 또는 경막하 전극과 함께 사용할 수도 있는데, 이는 개두술 및 두막 절개술 형상을 조정하기만 하면 되기 때문입니다. 그런 다음 장기 결과를 여기에서 수행한 것처럼 임상 결과와 비교할 수 있습니다.
제시된 방법의 주요 한계 중 하나는 미니피그에서 두개골 부비동의 존재이며, 이는12년 동안 발달합니다. 이와 관련하여 고려해야 할 중요한 측면에는 이식 연령과 동물의 크기가 포함됩니다. 성인의 두개골에 개두술을 시행하면 부비동의 무결성이 손상되고 만성 환경에서 주요 감염의 위험이 높아집니다. 이러한 부비동은 수술 전 평면 X-ray와 CT 스캔에서 볼 수 있습니다. 반면에, 너무 작은 동물에서 만성 이식을 너무 일찍 수행하는 것은 두개골이 대규모로 성장하고 리모델링되는 경우 최적이 아닙니다. 우리는 수술 후 이러한 "두개골 움직임"으로 인해 임플란트가 움직이고 접힐 수 있으며, 이는 궁극적으로 실험에 해로울 수 있다는 가설을 세웠습니다. 우리는 이식 당시 약 5-6개월(및 8kg)의 괴팅겐 미니피그가 최상의 결과를 제공해야 한다는 것을 발견했습니다.
전기생리학적 기록을 위한 이식형 ECoG의 성능을 평가하기 위해 당사는 자유롭게 움직이는 동물과 진정 상태에서 사용할 수 있는 청각 유발 전위(AEP) 기록을 위한 신속한 프로토콜을 설정했습니다. 몇 분 동안 특정 주파수에서 일련의 음향 톤 버스트를 제공하는 것으로 구성됩니다. 이러한 프로토콜의 장점은 프로브되는 주파수 수를 줄여 사용 가능한 녹음 길이에 맞게 조정할 수 있다는 사실입니다. 마취 상태에서 대뇌 피질 신호를 기록할 때 한 가지 문제는 데이터를 분석하고 비교할 때 동물의 의식 수준을 고려해야 한다는 것입니다.
관류에 대한 프로토콜은 추출된 뇌의 품질을 관찰하여 시간이 지남에 따라 조정되었습니다. 실제로, 경정맥이 아닌 경동맥에만 카테터를 삽입하는 것이 더 쉽다는 것을 알게 되었습니다. 초기에, 문헌은 노폐물을 배출하기 위해 경정맥을 카테터로 삽입하는 방법을 제시한다20. 실질적으로 이것은 뇌의 유출을 제한하고 혈액 추출과 전반적인 관류의 질을 떨어뜨립니다. 경정맥을 절단하고 동물이 누워있는 큰 용기에 액체를 빠져 나가게하면 관류 효율이 높아집니다.
당사는 염증 추적에 일상적으로 사용되는 항체와 함께 작동하는 강력한 조직 준비 방법을 개발했습니다. 돼지 뇌의 절반이 표준 현미경 슬라이드에 맞기 때문에 조직학 실험실에서 사용할 수 있는 대부분의 이미징 장비와 호환되기 때문에 실용적인 이유로 두 반구를 분리했습니다. 뇌를 여러 블록으로 자르면 뇌 전체를 더 자르거나 조직의 광범위한 부분을 다듬을 필요 없이 관심 영역에 직접 접근할 수 있습니다. 40μm의 뇌 절편은 표준 웰 플레이트에 모일 수 있으며 다른 종의 면역 염색으로 인한 주요 프로토콜 변경 없이 자유 부유 방식으로 염색할 수 있습니다. 전체 뇌 면역염색은 예를 들어, CLARITY 방법21을 사용하여 구상할 수도 있다.
전반적으로 이 프로토콜은 맞춤형 임플란트 설계부터 이식, 기능 후속 조치 및 생물 안전성 평가를 다루며 강력하고 일관성이 있습니다. 우리는 여기에서 청각 시스템을 연구할 수 있는 타당성을 입증했지만 다른 생리적 기능을 테스트하기 위해 전치할 수 있습니다. 더욱이, 우리 방법의 강점은 미니피그에만 국한되지 않고 양, 염소 또는 인간이 아닌 영장류와 같은 다른 종으로 완전히 전이될 수 있다는 사실에 있습니다. 어느 정도는 쥐에게도 쉽게 적응할 수 있습니다.

신경 장애 및 질병은 피질 전기 검사(ECoG) 어레이를 사용하여 진단하거나 치료할 수 있습니다. 이 전극 격자는 뇌 표면에 이식되어 인간 피질(human cortex)1을 기록하거나 자극할 수 있다. 예를 들어, 약물 내성 간질의 경우, 뇌전증 부위를 절제하는 데 도움이 된다2. 뇌-컴퓨터 인터페이스와 같은 장기적인 응용 분야에서 이러한 피질 상부 전극은 뇌의 운동 의도를 기록하고 마비 환자의 로봇 팔다리를 제어하는 데 사용됩니다3. 그러나 현재의 전극 그리드는 단단한 고분자 기판에 내장된 단단한 금속 블록으로 만들어지며 고해상도 뇌 기록 및 장기 경막하 생체 통합(>30일)의 필요성에 부응하지 못합니다. 오히려, 이식된 장치의 섬유화 캡슐화로 이어지는 국소 조직 반응을 일으켜 시간이 지남에 따라 성능이 저하됩니다. 최근에, 미세 가공 기술에 의해 제조된 얇은 고분자 기판을 사용하는 유연하거나 신축성 있는 전극 어레이는 조직 반응 4,5를 제한함으로써 장기 이식에서 높은 성능을 달성하기 위해 제안되었습니다. 그러나 이러한 새로운 임플란트 기술에 대한 전임상 연구는 장기적인 기능 및 안전성 프로파일을 검증하여 인간 환자에 대한 번역을 구상할 수 있도록 해야 합니다. 이러한 맥락에서, 미니피그 및 돼지 모델은 장기 크기가 크고 동물을 쉽게 다룰 수 있기 때문에 다른 의학적 맥락(예: 심혈관, 골격 또는 위계)의 장치 개발에 일상적으로 사용됩니다 6,7,8. 그러나, 신경 생리학을 위해 뇌를 표적으로 하는 몇 가지 응용 프로그램만이 문헌에 기술되어 있는데, 이는 대부분 외과적 접근의 한계와 살아있는 동물에 대한 임플란트 시스템의 통합으로 인한것이다 9,10,11,12. 이는 예를 들어 이식 가능한 임베디드 전자 장치와 같은 복잡한 하드웨어의 개발이 필요하기 때문에 살아있는 동물의 만성 이식과 호환되지 않는 경우가 많습니다. 또한, 그들은 중개 연구의 생물학적 안전성 측면에 중요한 표적 조직에 대한 임플란트 시스템의 영향을 조사하지 않습니다. 돼지 모델은 피질 구조, 두개골 뼈 및 피부 두께13 측면에서 인체 해부학에 가깝습니다. 또한, 행동 과제를 학습하는 능력은 기능적 재활 전략이나 감각 지각을 조사하기 위한 강력한 모델이 된다14.
새로운 기술과 치료법을 인간에게 적용하기 위해서는 유능한 의료 당국의 요구에 따라 안전성과 효능에 대한 평가가 필요합니다. 이는 일반적으로 기술 문서 및 규범15에 설명되어 있지만 이러한 테스트의 통과만 요구하며 안전 연구와 병행하여 장치 이식 또는 기타 유용한 데이터 수집의 실제 효과를 조사하지 않습니다. 뇌에 대한 완전한 생물 안전성 및 성능 연구를 위해 뇌 영상 데이터, 전기 생리학적 측정, 이식된 전극의 전기화학적 특성 평가 및 돼지 모델의 사후 조직학의 종단적이고 체계적인 수집을 제시합니다. 이를 달성하기 위해서는 완전한 실험 모델을 만들기 위해 몇 가지 측면을 고려해야 합니다: (i) 전극에 연결하기 위한 기계적으로 안정적인 경피 포트와 함께 장치 이식을 위한 최소 침습적 수술 접근, (ii) 마취 및 자유롭게 움직이는 조건에서 이식된 전극에 대한 성능 출력 역할을 하는 강력한 전기생리학적 기록 패러다임, (iii) 뇌 및 임플란트의 진화를 추적하기 위한 서로 다른 시점에서의 생체 내 영상(컴퓨터 단층 촬영[CT] 및/또는 자기 공명 영상[MRI]) 및 이식된 시스템과 영상 장비의 호환성, (iv) 조직학적 분석을 위해 뇌를 추출하기 위한 조직 준비 파이프라인.
여기에서는 장기 이식 방법(6개월)과 minipig 모델(그림 1에 개략적으로 표시)에서 소프트 ECoG 어레이 평가에 대해 보고합니다. 연질 전극 어레이는 이전 보고서에서 제시되었으며 전기 트랙으로 사용되는 탄성 금 박막을 내장한 얇은 실리콘 멤브레인으로 만들어집니다(16,17). 조직과의 접촉은 뇌 조직(18)에 대한 부드럽고 효율적인 전기화학적 인터페이스를 위해 실리콘 매트릭스에 내장된 백금 나노입자의 혼합물을 통해 이루어진다. 임플란트는 두개골과 피부를 통해 관통하는 유연한 케이블을 통해 동물의 머리에 있는 커넥터를 수용하는 경피 포트에 연결됩니다. 임플란트의 크기와 모양은 대상과 연구의 필요에 따라 맞춤화할 수 있습니다. 이 연구의 현재 전극 스트립은 임상 스트립의 실제 크기를 반영합니다. 임상적으로 이용 가능한 경막하 스트립과 그리드를 동일한 접근법을 사용하여 비교기로 사용했습니다. 고분자 MRI 호환 경피 포트는 두개골에 단단히 고정하는 발판 시스템을 사용하여 두개골에 배치됩니다. 여기에서는 양쪽 반구의 경막하 이식부터 동물의 회복에 이르기까지 수술 절차에 대해 자세히 설명합니다. 우리는 청각 피질(auditory cortex)을 표적 영역의 예로 들며, 여기서 유발된 전위는 마취된 조건과 자유롭게 움직이는 조건 모두에서 음향 자극에 의해 유도됩니다. 다른 시점에서 동물의 뇌는 마취 하에 MRI(또는 임상 전극의 경우 CT)로 이미지화되고 전극의 전기화학적 특성이 측정됩니다. 전극 특성화 방법은 임플란트 및 전극-조직 계면의 진화를 추적하는 데 사용됩니다(자세한 내용은 Schiavone et al.19 참조). 여기에는 전극 접촉의 자극 능력을 조사하기 위한 크로노암페로메트리, 전극의 저항 및 용량성 구성 요소의 진화를 나타낼 수 있는 전기화학 임피던스 분광법(EIS), 밀폐 캡슐화 실패를 조사하기 위한 채널 간 저항 측정이 포함됩니다. 마지막으로, 안락사 후 뇌에 관류하고, 전극을 삽입하고, 절제하고, 다양한 염증 마커를 사용하여 조직학적 분석을 수행하는 조직 추출 파이프라인을 개발했습니다. 전반적으로, 이 방법은 뇌에 대한 새로운 기술 및 치료법의 향후 임상 번역을 위한 강력한 다중 모드 데이터 수집을 통해 전임상 연구를 가능하게 할 것입니다.

<table><tbody><tr><td>뼈 드릴</td><td>BBraun</td><td>Elan 4 포함&nbsp; GA861 핸드피스</td><td></td></tr><tr><td>뼈 드릴 비트</td><td>BBraun</td><td>Neurocutter GP204R</td><td></td></tr><tr><td>Bonewax</td><td>Ethicon</td><td>W31G</td><td></td></tr><tr><td>카테터</td><td>Venisystems</td><td>Abbocat스 14G</td><td></td></tr><tr><td>컨포칼 현미경</td><td>Zeiss</td><td>LSM 880</td><td></td></tr><tr><td>저온 유지 장치</td><td>Leica</td><td>CM1950</td><td></td></tr><tr><td>Gelfoam</td><td>Pfizer</td><td>Gelfoam</td><td></td></tr><tr><td>스피커 삽입</td><td>Etymotic</td><td>Etymotic ER2 이어폰 삽입</td><td></td></tr><tr><td>멀티미터</td><td>Fluke</td><td>1700</td><td></td></tr><tr><td>오실로스코프</td><td>Tektronix</td><td>MDO3014 혼합 도메인 오실로스코프</td><td></td></tr><tr><td>관류 펌프</td><td>Shenzen</td><td>LabS3/UD15</td><td></td></tr><tr><td>Potentiostat</td><td>Gamry Instruments</td><td>Reference 600</td><td></td></tr><tr><td>1차 항체 Anti-GFAP</td><td>Thermofischer</td><td>Anti-GFAP, Rat, # 13-0300</td><td></td></tr><tr><td>1차 항체 Anti-IBA1</td><td>Fujifilm</td><td>Anti IBA1, Rabbit, 019-19741</td><td></td></tr><tr><td>1차 항체 Anti-NeuN</td><td>SigmaAldrich</td><td>Anti-NeuN, GuineaPig, ABN90</td><td></td></tr><tr><td>펄스 발생기</td><td>AM 시스템</td><td>모델 2100 절연 펄스 자극기</td><td></td></tr><tr><td>기록 헤드스테이지</td><td>다중 채널 시스템</td><td>W2100-HS32</td><td></td></tr><tr><td>기록 시스템</td><td>다채널 시스템</td><td>W2100</td><td></td></tr><tr><td>스크루 드라이버</td><td>Medtronic</td><td>핸들 : 001201, 샤프트 : 8001205</td><td></td></tr><tr><td>2 차 항체 488</td><td>Thermofischer</td><td>Goat anti-Rat IgG (H + L) 교차 흡착 2 차 항체, Alexa Fluor 488, # A-11006</td><td></td></tr><tr><td>2 차 항체 555</td><td>Thermofischer</td><td>염소 항기니피그 IgG (H+L) 고도의 교차 흡착 2차 항체, Alexa Fluor 555, # A-21435</td><td></td></tr><tr><td>2차 항체 647</td><td>Thermofischer</td><td>염소 항토끼 IgG (H+L) 고도의 교차 흡착 2차 항체, Alexa Fluor 647, # A-21245</td><td></td></tr><tr><td>슬라이드 스캐너</td><td>Olympus</td><td>VS120</td><td></td></tr><tr><td>Snapfrost</td><td>Excilone</td><td>Excilone Snapfrost</td><td></td></tr><tr><td>찌르기 칼</td><td>미세 Science Tools</td><td>10316-14</td><td></td></tr><tr><td>봉합선 피부</td><td>Ethicon</td><td>Vicryl 2-0</td><td></td></tr><tr><td>봉합선 dura mater</td><td>Ethicon</td><td>Mersilk 5-0&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>카테터용 봉합선</td><td>Ethicon</td><td>Vycril 3-0 바늘</td><td></td>없음</tr><tr><td>경막 리프팅용 봉합선</td><td>Ethicon</td><td>Prolene 6-0 BV-1 바늘</td><td></td></tr><tr><td>봉합선 봉합</td>선 피하 <td>Ethicon</td><td>Vicryl 4-0</td><td></td></tr><tr><td>티타늄 브릿지</td><td>Medtronic</td><td>TiMesh 015-2001-4</td><td>필요한 크기의</td></tr><tr><td>티타늄 나사</td> 잘라내기 <td>Medtronic</td><td>9001635, 9001640</td><td></td></tr>선 <tr><td>X-ray 시스템</td><td>GE</td><td>GE OEC 9800 Plus C-Arm</td><td></td></tr></tbody></table>

경막하 연피질검사(ecog) 어레이 이식 및 minipig의 장기 피질 기록

Subdural Soft Electrocorticography (ECoG) Array Implantation and Long-Term Cortical Recording in Minipigs

신경 장애 및 질병은 피질 전기 검사(ECoG) 어레이를 사용하여 진단하거나 치료할 수 있습니다. 약물 내성 간질에서 이들은 절제할 간질 부위를 묘사하는 데 도움이 됩니다. 뇌-컴퓨터 인터페이스와 같은 장기 응용 분야에서 이러한 피질 상부 전극은 뇌의 운동 의도를 기록하고 마비 환자의 로봇 팔다리를 제어하는 데 사용됩니다. 그러나 현재의 뻣뻣한 전극 그리드는 고해상도 뇌 기록 및 장기 생체 통합의 필요성에 부응하지 못합니다. 최근에는 고성능으로 장기간의 임플란트 안정성을 달성하기 위해 순응 가능한 전극 어레이가 제안되고 있다. 그러나 이러한 새로운 임플란트 기술에 대한 전임상 연구는 인간 환자에게 적용하기 위한 장기적인 기능 및 안전성 프로파일을 검증하기 위해 필요합니다. 이러한 맥락에서 돼지 모델은 장기 크기가 크고 동물을 쉽게 다룰 수 있기 때문에 의료 기기 개발에 일상적으로 사용됩니다. 그러나 문헌에는 몇 가지 뇌 응용 분야만 설명되어 있으며, 대부분 수술의 한계와 살아있는 동물에 대한 임플란트 시스템의 통합으로 인해 설명됩니다.
여기에서는 장기 이식(6개월) 방법과 minipig 모델에서 소프트 ECoG 어레이의 평가를 보고합니다. 이 연구는 먼저 전기생리학 기록을 위한 계측 커넥터를 수용하는 자기공명영상(MRI) 호환 고분자 경피 포트와 통합된 연질 미세 가공 전극 어레이로 구성된 임플란트 시스템을 제시합니다. 그런 다음 연구는 경막하 이식에서 동물 회복에 이르는 수술 절차를 설명합니다. 우리는 청각 자극에 의해 유발된 전위가 유도되는 표적 영역의 예로서 청각 피질에 초점을 맞춥니다. 마지막으로 전체 뇌의 MRI, 임플란트 전기화학적 특성 분석, 수술 중 및 자유롭게 움직이는 전기생리학, 추출된 뇌의 면역조직화학 염색을 포함하는 데이터 수집 시퀀스를 설명합니다.
이 모델은 피질 보철물의 새로운 디자인의 안전성과 기능을 조사하는 데 사용할 수 있습니다. 인간 환자에 대한 번역을 구상하기 위한 필수 전임상 연구.

장치의 배치(그림 3A) 및 기능을 확인하기 위해 받침대 배치 후 수술 중 전기생리학적 기록이 수행됩니다. 기준선 신호는 기초 활동의 제어로 자극 없이 2분 동안 먼저 획득됩니다. 둘째, 동물은 서로 다른 주파수(500-20,000Hz)에서 톤 버스트로 음향적으로 자극되고, 원시 데이터는 자극 기간 동안 평균화되어 어레이 전체에 걸쳐 청각적 유발 전위를 매핑합니다(예: 기준선과 비교하여 800Hz에서; 그림 3B). 여기에 표시된 데이터는 처리되지 않았지만 노이즈가 너무 많으면 노치 및 대역 통과 필터를 적용할 수 있습니다. 수술실의 일반적인 소음원에는 가열 패드, 막힌 드릴, 흡입 또는 소작기(그 중에서도)가 포함되며 획득 전에 제거해야 합니다. 깨어 있는 녹음에서는 더 깨끗한 데이터 세트를 위해 씹는 것과 같이 머리 주위의 큰 근육 움직임을 피해야 합니다.
이 프로토콜은 모든 녹화 시점에 적용되었으며 단일 채널의 신호를 시간 경과에 따라 비교할 수 있었습니다. 한 가지 예는 그림 3C에 나와 있으며, 반응의 견고성과 진화를 보여줍니다. 실험의 시간 경과에 따른 각 접촉의 기록 용량은 모든 시점에서 기준선 신호의 표준 편차를 계산하여 평가할 수 있습니다(그림 3D). 이 연구에서 신호 대 잡음비는 기록 기간(즉, 2분)의 제한된 기간으로 인해 약간의 변동성에도 불구하고 0일과 6개월 사이에 감소하고 안정되었습니다. 이것은 전극 임피던스와 더 관련이 있을 수 있습니다.
생체 내 영상은 뇌 상태와 임플란트 위치를 평가하기 위해 수술 후 수행됩니다. 프로토콜의 첫 번째 반복에서는 수술 중 X-ray가 수행되지 않아 T1 가중 MRI 시퀀스의 그림 4A에서 볼 수 있듯이 접힌 장치가 발생했습니다(그림 4B 참조). 동물에서 행동 변화는 관찰되지 않았지만 시간이 지남에 따라 임플란트 위치 주변의 뇌의 거시적 압축으로 인해 장치 주위에 섬유화 캡슐화가 발생했습니다(그림 4C). 이 경험 후, 그림 4D와 같이 수술 중 X-ray가 도입되었으며, 방사선 불투과성 마커(삽입된 그림 4D의 임플란트에 보이는 검은색 막대)가 잘 배치되어 있는 것으로 나타났습니다. 뇌의 표면은 그림 4E의 수술 후 MRI에서 관찰할 수 있듯이 손상되지 않습니다. 전반적으로 이 임플란트와 받침대 시스템을 사용하면 전뇌 영상이 가능합니다. 관상면(coronal plane)의 상이한 서열은 해부학적 구조를 볼 수 있게 해준다(그림 4F,G; T1 및 T2 MRI 시퀀스) 또는 임플란트 주변에 액체와 혈액이 존재하는지(그림 4H; TSE 가중 MRI 시퀀스). 받침대 시스템은 티타늄 나사 주위에 검은색 대비가 되는 작은 공극을 제외하고는 아티팩트가 거의 발생하지 않습니다(그림 4G 참조). 또한 이 연구에서는 임상 전극을 비교기로 사용하지만 가열 및 안전 문제로 인해 MRI에서 이미징할 수 없습니다. 따라서 그림 4I와 같이 이러한 동물에 대한 CT 스캔을 획득합니다. 전극이 선명하게 보이고 받침대 시스템이 이미지 품질에 영향을 미치지 않습니다.
이식 기간이 지나면 동물을 관류하고 뇌를 적출합니다. 이 연구에서 염증 반응 분석은 각 반구에서 독립적으로 수행됩니다. 뇌를 반으로 자르는 것은 절편 전에 조직을 준비하는 데 더 쉬우며, 단면을 표준 현미경 슬라이드에 장착할 수 있다는 장점이 있습니다. 뇌 샘플의 한 가지 예는 블록을 절단하기 전(그림 5A)과 후(그림 5B)입니다. 임플란트의 윤곽이 선명하게 보이며 뇌에 작은 움푹 들어간 곳이 생겼습니다. 평행 평면에서 절단하면 조직이 이미 저온 유지 장치에 정렬되어 있으며 트리밍을 위한 조직 손실 없이 단면을 쉽게 절단할 수 있습니다(그림 5C). 염색 후 전체 조직 절편을 이미지화하며(그림 5D), 예를 들어 뉴런 층을 자세히 볼 수 있습니다(NeuN 마커 참조). 전체 절편은 깨지기 쉽고 때로는 약간의 조직 손실로 이어질 수 있지만(그림 5D 하단 참조) 관심 영역은 손상되지 않습니다. 40x에서 컨포칼 현미경 이미징을 통해 자세히 보면 세포가 명확하게 정의되고 염증 마커 등을 정밀하게 조사할 수 있습니다(그림 5E). 대조군과 이식된 반구 간의 염증을 비교하기 위해 추가 정량화 분석을 수행할 수 있습니다. 그림 6은 이식된 전극의 전기화학적 특성을 보여줍니다. 임피던스 탄성률 및 위상을 갖는 연질 전극 어레이의 시험관 내 전기화학 임피던스 분광법은 그림 6A에 나와 있고 이식 6개월 동안 1kHz에서의 임피던스 계수는 그림 6B에 나와 있습니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64997/64997fig01.jpg"> 그림 1: 실험 개략도. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64997/64997fig01large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64997/64997fig02.jpg"> 그림 2: 뇌에 연약한 ECoG를 최소 침습적으로 이식한 경우. (A) 브레그마의 징후가 있는 두개골에 대한 외과적 접근. (B) 눈에 보이는 경막을 이용한 양측 개두술. (C) 첫 번째 반구의 슬릿 듀로토미. (D) 연질 ECoG 및 경막 폐쇄의 경막하 이식. (E) 두 번째 반구의 슬릿 듀로토미. 티타늄 브릿지를 사용한 첫 번째 반구에 뼈 플랩 고정. (F) 제2반구 및 경막 폐쇄에 연질 ECoG 이식. (G) 두 번째 반구에 뼈 플랩 고정. (H) 두개골의 발판 위치. (I) 발판에 받침대 고정. (J) 받침대 바닥 주변의 피부 폐쇄. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64997/64997fig02large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64997/64997fig03.jpg"> 그림 3: 청각 유발 전위 기록 . (A) 측두엽 표면의 전극 배치 개략도. (B) 800Hz 톤 버스트 자극(보라색 트레이스)에 대한 반응으로 기준 활동(회색 트레이스)과 청각 유발 전위의 대표 매핑. 각 평균은 소프트 ECoG 어레이의 한 채널에 해당합니다. 평균화는 소리 자극의 아날로그 입력 신호에서 트리거됩니다. "ON" 및 "OFF" 음향 자극 기간은 왼쪽 하단의 한 채널에 표시됩니다. (C) 음향 자극 후 단일 채널 응답의 시간 경과(0일, 2개월 및 5개월)에 따른 진화를 자극이 없는 경우의 기준선 신호와 비교하여 (회색). 평균화는 소리 자극의 아날로그 입력 신호에서 트리거됩니다. "ON" 및 "OFF" 자극 기간은 하단에 표시됩니다. "ON" 자극의 유발 전위는 화살표로 표시됩니다. (D) 기준선 기록의 시점당 채널당 표준 편차(컬러 도트). 중앙값은 굵은 파란색으로 표시됩니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64997/64997fig03large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64997/64997fig04.jpg"> 그림 4: 뇌와 이식된 전극의 생체 내 이미징 . (A) 관상면의 수술 후 T1 가중 MRI. 화살표는 접힌 임플란트를 나타냅니다. (B) 임플란트의 접힘으로 인해 뇌에 움푹 들어간 곳이 생기는 A의 확대된 부분. (C) 이식 1개월 시 T1 가중 MRI, C와 동일한 위치에서 뇌의 섬유화 캡슐화로 인한 뇌 압박 표시. (D) 방사선 불투과성 마커 배치로 관찰된 바와 같이 임플란트 배치 및 접힘 없음을 확인하는 수술 중 평면 X-레이. 삽입 사진: 방사선 불투과성 마커가 보이는 임플란트 사진. (E) 최적의 임플란트 배치가 있는 관상면에서의 수술 후 T1 가중 MRI. (F) 이식 1개월 시 T1 가중 MRI. (G) 이식 1개월 시 T2 가중 MRI. 화살표는 두개골의 발판을 제자리에 고정하는 티타늄 나사의 이미징 아티팩트를 보여줍니다. (H) 이식 1개월 시 TSE 가중 MRI. (I) 임상 전극을 이식한 동물의 CT 스캔. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64997/64997fig04large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64997/64997fig05.jpg"> 그림 5: 장기 이식 후 뇌의 조직학 분석 . (A) 이식 및 관류된 뇌-좌반구의 사진. (B) 동결 단계 전에 블록으로 절단된 관류된 뇌. (C) 저온 유지 장치의 전체 블록 절편 설정 그림; 전체 "사전 절단 블록"을 절단할 수 있습니다. (D) 전체 반구의 면역염색 이미징(슬라이드 스캐너, 20x 대물렌즈) 및 (E) 신경교세포, 성상교세포 및 뉴런을 보여주는 피질의 첫 번째 층 확대(공초점 이미징, 40x 대물렌즈). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64997/64997fig05large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64997/64997fig06.jpg"> 그림 6: 이식된 전극의 전기화학적 특성. (A) 임피던스 모듈러스(상단) 및 위상(하단)이 있는 연질 전극 어레이(각 채널의 작은 회색 선, 빨간색의 평균)의 체외 전기화학 임피던스 분광법. (B) 이식 6개월 동안 1kHz에서 임피던스 모듈러스의 진화(평균은 파란색, 회색 선은 개별 채널, 시험관 내 측정은 빨간색으로 참조). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64997/64997fig06large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
보충 그림 1: MRI 호환 받침대. (A) 연질 전극 어레이에 접근하기 위한 만성 MRI 호환 경피 연결 시스템(받침대). (B) 두개골 고정을 위해 발판에 전극이 장착된 받침대. 삽입 사진: 발판의 세부 사항. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64997/FigS1_Pedestal.pdf" target="_blank">이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>
보충 그림 2: 뇌의 최적 관류를 위한 외과적 접근. (A) 피부 절단 및 경동맥 및 경정맥 위치에 대한 접근. (B) 혈관 주변 조직의 해부. (씨,디) 경동맥과 경정맥 주변 조직의 식별 및 해부. (E) 아래 조직에서 경동맥의 분리. (F) 아래 조직에서 경정맥의 분리. (G) 경동맥(봉합사 1 및 봉합사 2)과 경정맥(봉합사 3) 주위에 봉합사 와이어 배치. (H) 혈관을 여는 동안 출혈을 피하기 위해 경동맥(심장 쪽)의 기저부에서 봉합사 3을 봉합합니다. (I) H의 반대쪽에 있는 경동맥의 클램핑. (J) 경동맥 절개. (K) J의 개구부에 삽입된 카테터. 삽입물: 주사기에서 카테터 팁으로 식염수를 세척하는 프라이밍된 카테터. (L) 카테터를 제자리에 유지하고 동맥을 따라 유지하기 위한 봉합사 2의 폐쇄. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64997/FigS2_Catheter.pdf" target="_blank">이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>
보충 파일 1: 각각 T1-(1-2페이지), T2-(3-4페이지) 및 TSE 가중(5-6페이지) MRI 시퀀스에 대한 매개변수. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64997/Supplementary%20File%201_MRIparameters.pdf" target="_blank">이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>
보충 파일 2: 염색된 뇌 절편의 전체 슬라이드 이미징을 위한 슬라이드 스캐너용 메타데이터. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64997/Supplementary%20File%202_Metadata%20Slide%20Scanner%20(1).pdf" target="_blank">이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>
보충 파일 3: 염색된 뇌 절편의 확대된 부분의 컨포칼 이미징을 위한 메타데이터. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64997/Supplementary%20File%203_Original%20Metadata%20-%20confocalsettings.pdf" target="_blank">이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>

여기에서는 수술 방법 및 도구, 수술 후 자기 공명 영상, 청각 피질의 전기 생리학, 임플란트의 전기 화학적 특성 및 사후 면역 화학을 설명하는 minipig 모델에서 연질 경막하 전극 어레이의 장기 성능 및 안전성 평가 방법을 제시합니다.

경막하 연피질검사(ECoG) 어레이 이식 및 Minipig의 장기 피질 기록

Neurological impairments and diseases can be diagnosed or treated using electrocorticography (ECoG) arrays. In drug-resistant epilepsy, these help ...

이 모델은 생체 적합성, 분해능 및 신호 품질 측면에서 만성 피질 장치에 대한 안전성 및 효능 검증의 표준이 될 수 있습니다. 당사의 절차는 장치 안전성 및 효능에 대한 장기 추적 관찰을 수행하기 위한 재현 가능하고 확장 가능한 방법을 설명합니다. 여기에는 시간 경과에 따른 신경 모니터링과 in vivo 및 ex vivo 이미징이 포함됩니다.우리의 방법은 감각 및 운동 피질 신경 보철물의 발달에 도움이 될 것입니다. 대규모 대뇌 피질 네트워크 활동을 이해하는 도구입니다. 이 방법은 기초 신경 과학에서 다양한 피질 영역에 대한 기능적 연결성을 조사하는 데 사용할 수 있습니다.다른 대형 동물 모델에도 적용할 수 있습니다. 수술적 접근법은 약간의 연습이 필요하며, 먼저 시체나 급성 실험에서 습득할 수 있습니다. 그러면 측정이 매우 간단해야 합니다.시작하려면 정중선을 따라 메스 나이프로 마취 된 동물의 피부를 절개하십시오. 근육과 골막을 뼈에서 분리하고 최적의 접근을 위해 스프레더를 배치합니다. 개두술을 수행하려면 X-레이에서 측정한 두개골의 두께를 고려하여 둥근 절단 비트가 있는 뼈 드릴을 사용하여 윤곽을 뚫습니다.뼈가 과열되지 않도록 식염수로 드릴링 위치를 관개하십시오. 경막에 도달할 때까지 윤곽선을 균일하게 조심스럽게 뚫습니다. 첫 번째 돌파구에서 윤곽선이 거의 뚫릴 수 있을 만큼 얇아질 때까지 드릴링을 마칩니다.그런 다음 평평한 주걱을 사용하여 개두술 가장자리를 지렛대로 사용하여 뼈 피판을 한 조각으로 부러뜨립니다. 자궁 절개술을 수행하려면 6 oh 봉합사 키트의 바늘을 사용하여 개두술의 앞쪽 또는 뒤쪽 끝, 내측과 측면 사이의 중간에 있는 경막을 조심스럽게 뚫고 들어 올리고 찌르는 칼로 절개의 시작을 만듭니다. 그런 다음 경막하 공간에 삽입된 작고 평평한 주걱을 사용하여 피질을 보호하는 절단 베이스 역할을 합니다.두 도구를 동시에 전진시켜 경막에 전후 슬릿을 만듭니다. 슬릿이 임플란트 너비보다 약간 큰지 확인하십시오. 임플란트를 경막 슬릿 위에 놓고 작은 집게를 사용하여 각 가장자리를 순차적으로 밀어 장치를 경막하로 삽입합니다.삽입을 방해하는 장력이 발생하지 않도록 장치의 받침대 끝을 조심스럽게 잡고 임플란트와 함께 전진합니다. 커넥터 가장자리가 슬릿 위에 있을 때 삽입을 중지합니다. 임플란트를 제자리에 고정하려면 개두술의 가장자리 또는 고정 날개에 케이블 위에 티타늄 브리지를 놓고 적절한 드라이버를 사용하여 하나 또는 두 개의 티타늄 나사로 고정합니다.그런 다음 임플란트 케이블 주위에 경막을 조심스럽게 봉합합니다. 3 oh 흡수성 봉합사와 작은 바늘 홀더를 사용하여 봉합사로 얇은 막을 찢지 않고 두 개의 경막 가장자리를 최대한 함께 가져옵니다. 뼈 피판 배치를 수행하려면 티타늄 나사를 사용하여 각 뼈 피판의 앞쪽과 뒤쪽 부분에 티타늄 브리지를 고정합니다.티타늄 브릿지의 끝을 두개골에 나사로 고정합니다. 다음으로, 모든 다리가 두개골에 나사로 고정될 수 있도록 발판의 방향을 계획합니다. 그런 다음 제자리에 단단히 고정될 때까지 발판의 티타늄 나사를 조여 발판을 고정합니다.그런 다음 받침대를 발판에 나사로 고정합니다. 3mm 간격의 봉합사가 있는 4oh 비흡수성 봉합사 와이어로 피하 봉합사를 만듭니다. 받침대에서 시작하여 절개 양쪽에서 받침대쪽으로 이동합니다.다음으로, 6oh 비흡수성 봉합사 와이어를 사용하여 피부를 봉합하여 진피층을 닫습니다. 5mm 간격으로 봉합사. 받침대에서 시작하여 절개 양쪽에서 받침대쪽으로 이동합니다.공극을 피하기 위해 두 피부 플랩 사이와 받침대 가장자리 근처에 조직이 잘 배치되도록 주의하십시오. 동물을 안거나 간식으로 먹이를 주어 주의를 산만하게 하는 동물에 무선 헤드 스테이지를 연결한 후 깨어 있는 뇌 신호를 기록합니다. 신호를 녹음하는 동안 liifier 안테나와 외부 스피커를 돼지 우리 가까이에 두십시오.800Hz 톤 버스트 자극에 대한 반응으로 소리 자극 및 청각 유발 전위가 없는 기준선 활동을 전극 어레이에 매핑할 수 있습니다. 단일 전극 채널에서 청각 유발 전위는 시간이 지남에 따라 온" 응답을 표시하는 화살표로 표시되고 기준선 활동은 비교로 표시됩니다. 뇌 상태와 임플란트 위치를 평가하기 위해 수술 중 및 수술 후 생체 내 이미징을 수행했습니다.수술 중 평면 X-레이로 임플란트 배치를 확인했으며 방사선 불투과성 마커 배치에서 관찰된 접힘 없음. 뇌의 표면은 수술 후 MRI에서 관찰할 수 있듯이 온전합니다. 전반적으로 이 임플란트 및 받침대 시스템을 사용하면 이식 기간 동안 전뇌 영상을 통해 해부학적 구조나 임플란트 주변의 액체와 혈액의 존재를 볼 수 있습니다.또한 이 연구에서는 임상 전극을 비교기로 사용하지만 가열 및 안전 문제로 인해 MRI에서 이미징할 수 없으며 CT 스캔이 필요합니다. 제시된 파이프라인은 전체 뇌 추출 및 절편을 통해 전체 반구를 이미지화할 수 있습니다. 전체 조직 절편의 이미징은 명확한 뉴런 층을 보여주었습니다.세포는 20x에서 컨포칼 이미징에서 명확하게 정의되며 염증 마커를 정밀하게 조사할 수 있습니다. 장치의 전기화학적 특성화는 임피던스 계수 및 체외 위상을 추출하는 데 사용되었으며, 이는 이식 6개월 동안 1킬로헤르츠에서 시간이 지남에 따라 추적되었습니다. 수술 중 부비동이 열리지 않도록 동물의 나이와 크기를 신중하게 선택하는 것이 중요합니다.이것은 만성적인 실험을 손상시킬 것입니다. 경막에 접근하거나 임플란트를 삽입할 때 출혈을 피하는 것이 중요합니다. 이렇게 하면 추가 합병증과 염증 반응을 피할 수 있습니다.이 모델이 구축되면 미니 돼지에서 자유롭게 행동하는 전기 생리학을 수행하고 대뇌 피질 관심 영역의 활동을 기록하는 데 사용할 수 있습니다. 이 방법은 인간에게 번역될 새로운 신경 보철물을 개발할 때 임상 시험 제출을 위한 생물 안전성 데이터 수집에 적용할 수 있습니다.

subdural-soft-electrocorticography-ecog-array-implantation-long-term

Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

우리는 만성 신경 기록 전극을 이온 주입하는 과정을 배우고있는 외과의에 대한 유용한 정보를 제공합니다. 관통 및 표면 양쪽 전극 시스템을위한 기술은 쥐 동물 모델에 설명되어 있습니다.

단일 유닛 활동과 Electrocorticographic 신호를 녹음하기 위해 만성 신경 전극 외과 이식

이 비디오는 코필린 발현을 표적으로 하고 조작하는 아데노 관련 바이러스에 대한 반응으로 전기 신호를 기록하기 위해 쥐의 대뇌 피질에 전기 피질 측정 전극을 이식하는 프로토콜을 보여줍니다.

전기 피질 기록을 위한 마우스 피질에 전극 이식

이 비디오는 미니피그에서 부드러운 피질 검사 배열의 이식과 장기 피질 기록을 보여줍니다. 이 연구는 미니피그의 청각 피질에 배열을 외과적으로 이식하고 기준선 및 소리 자극으로 유발된 뉴런 활동 전위를 모두 기록하는 데 필요한 단계를 간략하게 설명합니다.

Minipigs의 피질 전기생리학 기록을 위한 소프트 전기 피질 판독 어레이의 경막하 이식

이 논문은 침술, 간질 모델 및 설치류의 수면 분석의 성능을 보여줍니다. 침술 절차와 경혈의 식별에 대해 설명합니다. 필로카르핀 또는 펜틸레네테트라졸(PTZ)은 간질을 유발하는 데 사용됩니다. 피질전도(ECoG), 근전도(EMG), 뇌 온도 및 운동 활동 기록이 수면 분석에 사용됩니다.

침술에 의해 쥐와 마우스에서 간질 Electrocorticograms (ECoGs)의 조작 및 절전

이 상세한 프로토콜 transcranial 전기 자극 자유롭게 이동 하는 쥐에서의 단기 및 장기 효과 조사 하기 위하여 측 뼈에 transcranial 자극 전극 배치를 설명 합니다.

만성 Transcranial 전기 자극 및 쥐 Intracortical 녹음

이 연구에서는 piglets. 에서 신경 전달 물질 활동 vivo에서 효소 기반 microelectrode 배열 (MEA) 기술의 새로운 사용 가설 그 조미료 dysregulation 마 취 neurotoxicity의 메커니즘에 기여 했다. 여기, 우리 마 취 유도 neurotoxicity의 메커니즘 연구 나 기술에 맞게 프로토콜을 제시.

마 취 유도 Neurotoxicity 그대로 돼지 뇌에서의 연구에 대 한 Microelectrode 배열 기술의 적응

여기, 우리의 현재 프로토콜 기록 telemetric 심장학 (EEGs) 진정 제를 사용 하지 않고 pigpen에서 직접 piglets를 자유롭게 이동에서 파열 일반적인 뇌 파 패턴을 기록 중 비-REM 수 면, 스핀 들 처럼 하 수 있습니다.

자유롭게 이동 Piglets에서 비 침 투 적인 뇌 파 기록

우리는 지속적으로 피 질 측 두 엽에 후 두 극과 정면 기둥에서의 거의 전체 측면 표면 커버 일반적인 마모 셋에 대 한 전체 피 질 electrocorticographic 배열을 개발 했습니다. 이 프로토콜의 비단 뇌 경 막 외 공간에 배열의 만성 이식 절차를 설명합니다.

일반적인 마모 셋에 전체 피 질 Electrocorticographic 배열의 만성 이식

이 연구는 돼지 모델에서 반복되는 만성 피질 기록에 대한 확장 가능하고 신뢰할 수 있으며 재현 가능한 방법을 제시합니다. 이 방법은 통증 연구 및 신경 질환 진단을 포함한 다양한 신경 과학 분야에 응용되고 있습니다.

돼지의 마취 중 반복적인 피질 기록을 위한 만성 두개골 창 기술

여기에서는 쥐와 생쥐의 고밀도 마이크로 전기 피질 검사(μEcoG) 기록을 위한 수술, 이식 및 기록 방법을 포함한 두 가지 프로토콜을 제시합니다. μECoG 기록은 쥐의 청각 피질에서 층류 다원(laminar polytrode) 기록 또는 쥐의 체성 감각 피질(somatosensory cortex)에서 신경 활동의 광유전학적 조작과 함께 수행됩니다.

설치류의 미세 전기 피질 조영술과 층류 폴리트로드 및 광유전학을 통합하여 피질 처리의 멀티스케일 조사

학습하세요 경막하 연피질검사(ECoG) 어레이 이식 및 미니피그의 장기 피질 기록 방법을 통해 신경 장치의 안전성과 효능을 평가하는 기술을 익히세요. 이 연구는 신경공학 발전에 기여합니다.

경막하 연피질검사(ECoG) 어레이 이식 및 Minipig의 장기 피질 기록

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