2023년 6월 2일
여기에서 우리는 간 조직의 지질 액적 특성 분석을 위해 최적화된 BODIPY 493/503 형광 기반 프로토콜을 입증합니다. 직교 투영 및 3D 재구성의 사용을 통해 형광단은 미세소포와 대소포성 지방증 사이의 성공적인 구별을 가능하게 하고 간 지방증 평가를 위한 고전적인 조직학적 프로토콜에 대한 보완적인 접근 방식을 나타낼 수 있습니다.
이 이미징 접근법은 간 지질 액적 침착의 3차원 재구성을 가능하게 하고 미세 및 거대 소포성 지방증 사이의 성공적인 구별을 좁힌 고전적인 조직학적 염색의 주요 단점을 극복합니다. 미세소포성 지방증의 평가는 천연 지질 방울의 파괴 및 간헐적인 융합으로 인해 금본위제 조직학적 염색과 Oil Red 모두를 사용하는 경우입니다. pro-BODIPY는 지질 방울의 빠른 흡수와 효과적인 태깅을 위한 올바른 소수성으로 인해 미세소포성 간 지방증 평가를 위한 일상적인 프로토콜에 대한 대안을 제공하며, 환경 극성에 둔감할 뿐만 아니라 매우 선택적입니다.
이 이미징 접근 방식은 면역 화학 기술과 함께 더 광범위한 응용 분야를 포괄하여 미세 및 대수포성 간 지방증을 뒷받침하는 지질 방울의 생물 발생 및 역학 연구를 발전시킬 수 있는 다른 세포내 항원의 동시 검출을 가능하게 합니다.
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본 연구는 간 조직 내 지질 방울의 특성을 분석하기 위해 최적화된 BODIPY 493/503 형광 기반 프로토콜을 제시합니다. 이 방법은 3차원 재구성을 가능하게 하며 미세소포성 및 거대소포성 지방증을 효과적으로 구분할 수 있어, 기존의 조직학적 기법을 보완하는 접근 방식을 제공합니다.
간 조직 내 형광 염색된 지질 방울의 정량적 3D 분석을 통해 간 지방증을 정밀하게 평가할 수 있으며, 이는 대사성 질환 연구의 핵심 과제를 해결하는 방법입니다. 본 프로토콜은 지질 방울의 크기와 분포에 대한 견고하고 재현 가능한 측정값을 제공함으로써 초기 발견 및 타겟 검증 단계에서 예측 신뢰도를 높여줍니다. 이러한 접근 방식은 전임상 모델에서 미세소포성 지방증과 거대소포성 지방증을 신뢰성 있게 구별할 수 있게 하여, 리스크가 조정된 포트폴리오 결정을 지원합니다.
본 프로토콜은 발견부터 전임상까지의 연속 과정에 통합되어, 초기 기전 연구와 대사 질환 파이프라인의 하류 중개 연구를 모두 지원합니다.