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형광 및 공초점 이미징을 위해 횡단면을 준비하고 옥수수 잎 원시의 전체 마운트를 펼치기 위한 개선된 ...
형광 및 공초점 이미징을 위해 횡단면을 준비하고 옥수수 잎 원시의 전체 마운트를 펼치기 위한 개선된 ...
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Biology
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JoVE Journal Biology
Improved Methods for Preparing Transverse Sections and Unrolled Whole Mounts of Maize Leaf Primordia for Fluorescence and Confocal Imaging

형광 및 공초점 이미징을 위해 횡단면을 준비하고 옥수수 잎 원시의 전체 마운트를 펼치기 위한 개선된 방법

Full Text
4,418 Views
06:11 min
September 22, 2023

DOI: 10.3791/65239-v

Janlo M. Robil1,2, Cedric David T. Cortez1, Chloe Margalaux R. Villafuerte1, Edgar Daniel C. Dela Peña1, Derreck O. De Leon1, Roselle Joy R. Rioja1, Paula McSteen2

1Department of Biology, School of Science and Engineering,Ateneo de Manila University, 2Division of Biological Sciences, Interdisciplinary Plant Group, and Missouri Maize Center,University of Missouri

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study addresses the challenge of imaging maize leaf primordia, which are naturally rolled and thus difficult to study. The researchers present improved protocols for preparing transverse sections and unrolled whole mounts of these primordia, enabling enhanced fluorescence and confocal imaging.

Key Study Components

Research Area

  • Plant biology
  • Maize leaf development
  • Microscopy techniques

Background

  • Leaf primordia in maize are ensheathed and rolled, complicating their study.
  • Understanding the anatomy and development of these structures is crucial for research in plant biology.
  • Traditional imaging methods have been limited due to the morphology of the primordia.

Methods Used

  • Protocols for making transverse sections using a wire stripper.
  • Methods for unrolling whole leaf primordia with clear double-sided nanotape.
  • Fluorescence and confocal imaging techniques for visualization.

Main Results

  • Improved accuracy in transverse sectioning and unrolling of leaf primordia.
  • Findings indicated differences in primordium development related to specific genetic mutants.
  • The methods enabled systematic examination of hormone expression patterns in leaf primordia.

Conclusions

  • The study demonstrates effective techniques for visualizing and analyzing maize leaf primordia.
  • These methods are relevant for broader research in grass leaf development and anatomical studies.

Frequently Asked Questions

What are leaf primordia?
Leaf primordia are the initial stages of leaf development that are often rolled and ensheathed in grasses.
Why is imaging maize leaf primordia challenging?
Their rolled morphology prevents effective visualization using traditional microscopy techniques.
What improvements do the protocols present?
The protocols enhance the accuracy of cross-sectional analysis and allow for better visualization of developmental traits.
How does fluorescence imaging contribute to this study?
Fluorescence imaging allows the visualization of specific hormonal responses within the primordia during development.
Can these methods be applied to other grasses?
Yes, the methods are expected to be beneficial for studying leaf development in other grass species as well.
What are the potential applications of this research?
The research could aid in understanding genetic traits related to leaf development and improve agricultural practices.
What technologies are used in this study?
The study employs both confocal and fluorescence microscopy techniques for detailed imaging analyses.

옥수수 잎 primordia는 깊숙이 찢어지고 구겨져 연구하기가 어렵습니다. 여기에서 우리는 형광 및 공초점 이미징을 위해 옥수수 잎 원시의 횡단면과 펼쳐진 전체 마운트를 준비하는 방법을 제시합니다.

옥수수와 같은 풀은 싹 내에서 잎이 자라기 때문에 연구하기가 어렵습니다. 우리는 형광 및 컨포칼 이미징을 위해 옥수수 잎 횡단면과 전체 마운트를 준비하기 위한 개선된 프로토콜로 이 문제를 해결합니다. 첫 번째 프로토콜은 와이어 스트리퍼를 사용하여 오래된 잎을 절단하여 절편 전에 원시를 측정할 수 있습니다.

두 번째 프로토콜은 투명한 양면 나노 테이프를 사용하여 전체 잎 원시를 펼칩니다. 이러한 프로토콜은 횡단면의 정확도를 향상시키고 압연된 원뿔형 형태로 인해 달성하기가 매우 어려웠던 잎 원시의 롤링을 가능하게 합니다. 이 방법은 옥수수 및 기타 풀의 잎 해부학 적 및 발달 특성을 시각화하고 정량화하는 데 유용합니다.

이러한 방법을 기반으로 우리는 잔디 잎 개발의 문제를 해결하기 위해 생세포 이미징 전략을 개발할 계획입니다.

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이번 달 JoVE Issue 199 옥수수(Zea mays) 잔디 잎 원시 잎 해부학 및 발달 형광 및 컨포칼 이미징 횡단면 전체 마운트 ImageJ/FIJI 세포 이미징

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