Name: 자유롭게 움직이는 마우스의 다채널 세포외 기록 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-05-26T12:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 59 s
Description: 배우세요 자유롭게 움직이는 마우스의 다채널 세포외 기록 방법을 통해 운동피질의 국소장 전위와 스파이크 활동을 분석하는 기술입니다. 이 프로토콜은 초보자도 신경 신호를 효과적으로 획득하고 분석할 수 있도록 최적화되어 있습니다.

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이 연구는 중국 국립자연과학재단(31871170, 32170950, 31970915), 광둥성 자연과학재단(2021A1515010804 및 2023A1515010899), 광둥성 자연과학재단 주요 재배 프로젝트(2018B030336001), 광둥성 보조금: 뇌질환 치료를 위한 핵심 기술(2018B030332001)의 보조금으로 지원되었습니다.

모든 마우스는 상업적으로 수득하였고, 22-25°C의 실온 및 50%-60%의 상대 습도에서 12시간 빛/12시간 어두운 주기(현지 시간 08:00에 점등)로 유지하였다. 생쥐들은 먹이와 물을 지속적으로 공급받을 수 있었다. 모든 실험은 화남사범대학의 실험동물 관리 및 사용 지침에 따라 수행되었으며 기관 동물 윤리 위원회의 승인을 받았습니다. 생후 3-5개월 된 수컷 C57BL/6J 마우스를 실험에 사용하였다.
1. 마이크로 드라이브 시스템 조립
<ol><li>이동식 마이크로 드라이브를 고정하는 나사와 두 개의 스툴을 사용하여 두 개의 컴퓨터 설계 기판을 연결하고 커넥터를 하나의 기판에 연결합니다(그림 1A, Bi-iii). 나사(0.5mm/원)를 비틀어 마이크로 드라이브를 구동합니다.</li>
	<li>마이크로 드라이브가 MC 영역의 각 측면에 대해 8개의 가이드 튜브(길이 ~3cm, 내경 ~50μm, 외경 ~125μm)로 구성된 두 세트를 운반할 수 있는지 확인한 다음 동일한 길이(최소 15mm; 그림 1Biv, v).</li>
	<li>직경 35μm의 니켈 크롬 와이어 16개(~5cm 길이)를 절단한 다음 가이드 튜브에 연속적으로 로드한 다음 접착제를 도포하여 고정합니다(그림 1Bi, vi, vii).</li>
	<li>전선 절연체를 벗겨내고 노출된 각 전선을 채널 맵을 따라 커넥터에서 각 핀에 연속적으로 꼬은 다음 기준 전극 및 접지 전극을 연달아 꼬은 다음 각 핀에 전도성 페인트를 천천히 코팅합니다(그림 1Bviii-x).</li>
	<li>에폭시 수지(그림 1Axi, xii)를 사용하여 핀을 덮은 다음 임피던스 테스터를 통해 금 도금을 수행하여 전극 팁의 임피던스를 ~350kOhm으로 줄입니다(그림 1Bxiii, xiv). 임피던스 테스터의 매개 변수를 다음과 같이 설정합니다 : 10.08mM PtCl4를 포함한 금 도금 용액으로 1 초 동안 −4μA 직류.</li>
	<li>마지막으로 나사를 돌려 마이크로 드라이브를 상단으로 이동합니다. 그림 1A 와 같이 수정된 마이크로 드라이브 시스템의 전체 크기(길이 약 15mm, 너비 10mm, 높이 20mm, 무게 ~1g)를 확인합니다. 컴퓨터로 설계된 기판 및 가동 부품의 자세한 사양은 그림 1Ai, ii에서 확인하십시오.</li>
</ol>2. 전극 어레이 이식
<ol><li>수술 키트를 소독하고, 멸균 장갑을 착용하고, 수술이 시작되기 전에 의사의 멸균 흰색 가운을 입습니다.</li>
	<li>통증을 관리하기 위해 유도 챔버에서 마우스에 멜록시캄 주사제(5mg/kg)를 피하(s.c.) 주사합니다. 그런 다음 유도 챔버18,19에서 펜토바르비탈(80mg/kg)의 복강내(ip) 주사에 의해 마우스를 마취시킨다. 발가락 꼬집 반사가 여전히 존재하는 경우 펜토바르비탈(20mg/kg/h)을 보충 투여하십시오.</li>
	<li>마우스를 입체 장치에 고정하고 온도 조절기를 사용하여 직장 온도를 37°C로 유지합니다.</li>
	<li>생쥐의 양쪽 눈에 테트라사이클린 눈 연고를 바르고 수술 전에 멸균 장갑을 다시 교체합니다.</li>
	<li>쥐의 털을 면도하고 멸균 면 팁 어플리케이터를 사용하여 중앙에서 시작하여 바깥쪽으로 동심원으로 베타딘 스크럽과 알코올을 번갈아 3회 번갈아 가며 수술 부위를 소독합니다(그림 2i, ii). 두개골을 노출시키기 위해 정중선을 작게 절개(~15mm)합니다. 즉시 통증 완화를 위해 1% 리도카인을 목 근육에 국소적으로 바르십시오. 그런 다음 가위를 사용하여 잔여 조직을 제거하고 식염수 코팅된 면봉을 사용하여 두개골을 청소합니다(그림 2iii).</li>
	<li>잉크로 채워진 유리 미세 전극을 사용하여 이식을 위해 양측 MC의 원하는 위치를 표시합니다(그림 2iv, v). 선행 연구(20)에 기초하여, 양측 MC의 위치는 다음과 같다: 브레그마에서 0.74mm, 정중선에서 1.25mm.</li>
	<li>마이크로 드라이브 시스템을 보호하기 위해 4개의 스테인리스 스틸 나사(직경 0.8mm)를 이식한 다음 모든 나사를 기준 전극 및 접지 전극과 함께 연결한 다음 혼합 치과용 시멘트로 덮어 벽을 형성합니다(그림 2vi-xi).</li>
	<li>MC 영역에서 조정된 두개골의 왼쪽과 오른쪽 모두에 두개골 드릴로 두 개의 작은 구멍(~1.5mm2)을 조심스럽게 뚫습니다(그림 2xii). 양측 MC의 입체 좌표를 사용합니다 : 브레그마에서 전방 0.74mm, 정중선에서 측면 1.25mm, 경막에서 복부 0.5mm.</li>
	<li>미세한 집게로 구멍에서 경막을 조심스럽게 제거합니다(그림 2xiii).</li>
	<li>마이크로 매니퓰레이터를 사용하여 10μm/s의 속도로 마이크로 드라이브 시스템을 구멍 중앙에 삽입합니다(그림 2xiv-xvii).</li>
	<li>마이크로 드라이브 시스템 삽입을 마친 후 치과용 시멘트 벽에 바셀린을 채웁니다(그림 2xviii).</li>
	<li>마이크로 드라이브 시스템의 바닥판과 치과용 시멘트 벽을 혼합된 치과용 시멘트로 결합합니다(그림 2xix).</li>
	<li>절개 부위를 식염수로 씻은 후 린코마이신 염산염과 리도카인 염산염이 함유된 겔로 국소 치료를 하여 수술 후 통증을 완화합니다.</li>
	<li>이식된 마이크로 드라이브 시스템에 전도성 동박 테이프를 감습니다(그림 2xx).</li>
	<li>마우스를 31-33°C로 유지되는 케이지로 옮기고 마우스가 마취에서 회복되는지 모니터링합니다.</li>
	<li>생쥐가 별도의 먹이로 1주일 동안 회복되도록 합니다. 린코마이신 염산염과 리도카인 염산염이 함유된 겔을 3일 동안 지속적으로 도포하여 절개 부위를 확인하고 치료합니다.</li>
</ol>3. 자유롭게 움직이는 마우스의 양측 MC에서 다중 채널 기록
<ol><li>깨어 있는 쥐의 머리를 가볍고 조심스럽게 잡습니다. 최소 0.1일 전에 마이크로 드라이브 시스템의 가동 가능한 부분(그림 1Aii)에 있는 나사를 비틀어 전극 어레이(~1mm 깊이)를 아래로 이동합니다.</li>
	<li>깨어 있는 마우스의 머리를 가볍고 조심스럽게 잡습니다. 헤드스테이지의 중앙과 헬륨 풍선(약 0.02L의 헬륨으로 채워짐)을 나사산으로 연결하여 헤드스테이지와 마이크로 드라이브 시스템의 무게를 상쇄합니다(그림 3A, B).</li>
	<li>레코딩 소프트웨어에서 30kHz로 샘플링하여 레코딩 전극 및 멀티채널 시스템을 사용하여 원시 신호를 캡처한 다음 멀티채널 시스템의 디지털-아날로그(DA) 컨버터를 사용하여 디지타이징할 수 있습니다.</li>
	<li>녹음 소프트웨어에서 10kHz로 리샘플링하여 원시 데이터에서 LFP 신호를 추출한 다음 녹음 소프트웨어의 노치 필터를 사용하여 50Hz 라인 노이즈를 제거합니다.</li>
	<li>자유롭게 움직이는 마우스에서 최소 60초 동안 안정적인 상태로 원시 데이터를 기록합니다. 녹화가 끝나면 헤드스테이지와 마이크로 드라이브 시스템 사이의 연결을 천천히 제거하고 마우스를 홈 케이지로 되돌립니다.</li>
	<li>기록된 데이터를 컴퓨터에 저장하고 오프라인으로 분석합니다(그림 4 및 그림 5).</li>
	<li>실험 종료 후 연구소의 지침에 따라 안락사를 시행한 후 3V 출력의 전원을 이용하여 전극의 위치를 확인하여 1분 동안 전해 병변을 시행한 후 조직학적 분석을 실시합니다. 냉동 마이크로톰을 사용하여 쥐의 뇌를 30μm 조각으로 자르고 MC 섹션을 수집한 다음 현미경으로 이미지를 캡처합니다(그림 3C, D).</li>
</ol>4. 스파이크 분류 및 분석
<ol><li>스파이크 정렬 소프트웨어에서 파일 > 열기 > Nev 파일을 클릭하여 30kHz로 샘플링된 스파이크 데이터를 엽니다(그림 4Ai).</li>
	<li>정보를 클릭하여 정렬되지 않은 채널을 선택한 다음 정렬 > 정렬 방법 변경 > K-평균 사용을 선택합니다. Valley-Seeking Sort > K-Means Sorting 버튼을 눌러 정렬된 단위를 구합니다(그림 4Aii, iii).</li>
	<li>File(파일) > Save as(다른 이름으로 저장)를 클릭하고, 정렬된 스파이크 데이터를 .nev 파일 이름 확장자로 저장하고, File(파일 ) > Export Per-Waveform Data(파형별 데이터 내보내기 )를 선택하여 .txt 파일 이름 확장자를 가진 PCA 결과를 내보냅니다(그림 4Aiv).</li>
	<li>신경 생리학적 데이터 분석을 위한 소프트웨어에서 File(파일) > Import Data(데이터 가져오기) > Blackrock File(블랙록 파일 )을 클릭하여 정렬된 스파이크 파일을 엽니다(그림 4Bi).</li>
	<li>Analysis( 분석) > Autocorrelograms(자동 코렐로그램) 를 클릭하여 선택한 단위에 대한 autocorrelogram을 구한 다음 -0.05초에서 X 최소값, 0.05초에서 X 최대값, 0.001에서 Bin 값으로 매개변수를 설정합니다(그림 4Bii, iii).</li>
	<li>정렬된 스파이크 데이터를 로드하고 분석 > 인터스파이 크 간격 히스토그램을 클릭하여 스파이크 간 간격 히스토그램을 구한 다음 0초의 최소 간격 값, 0.1초의 최대 간격 값, 0.001의 Bin 값으로 매개변수를 설정합니다(그림 4Biv, v).</li>
	<li>분석 > Crosscorrelograms를 클릭하여 정렬된 두 단위 이벤트 간의 교차 상관을 구한 다음 참조 이벤트 및 매개변수를 -0.1초에서 X 최소값, 0.1초에서 X 최대값, 0.001에서 Bin 값으로 설정합니다(그림 4Bvi, vii).</li>
	<li>Results > Numerical Results를 클릭하여 autocorrelogram, inter-spike interval histogram 및 cross-correlogram의 결과를 .xls 파일 이름 확장자로 저장합니다(그림 4Bviii, ix). 데이터를 분석하고 그래프를 그립니다.</li>
</ol>5. LFP 분석
<ol><li>신경 생리학적 데이터 분석을 위한 소프트웨어에서 File Import Data(파일 가져오기 데이터) > Blackrock File(Blackrock 파일 )을 클릭하여 10kHz로 샘플링된 연속 신호 데이터를 엽니다(그림 5Ai).</li>
	<li>연속에 대한 분석 > 스펙트럼을 클릭하여 선택한 채널에서 LFP에 대한 파워 스펙트럼을 분석합니다. 파라미터를 8,192에서의 주파수 값 수, 3-5에서의 다중 테이퍼 값, 총 전력 스펙트럼 밀도(PSD)의 백분율 정규화, 1Hz에서 100Hz까지의 주파수 범위로 설정합니다(그림 5Aii, iii).</li>
	<li>Analysis(분석) > Coherence for Continuous(연속 )를 클릭하여 MC의 왼쪽과 오른쪽에서 두 LFP의 일관성을 분석합니다. 참조 채널과 매개변수를 다음과 같이 설정합니다. 일관성 값, 8,192에서의 주파수 값 수, 3-5에서의 다중 테이퍼 값, 1Hz에서 100Hz까지의 주파수 범위(그림 5Aiv, v)입니다.</li>
	<li>클릭 분석 > Corr. with Cont. 변수를 사용하여 MC의 왼쪽과 오른쪽에서 두 LFP 간의 상관 관계를 분석합니다. 참조 채널(LFP 데이터) 및 매개변수를 다음과 같이 설정합니다. -0.1초에서 X 최소값, 0.1초에서 X 최대값, 0.001에서 Bin 값(그림 5Avi, vii)를 참조하십시오.</li>
	<li>Results > Numerical Results를 클릭하여 PSD의 결과, 일관성 및 상관 관계를 .xls 파일 이름 확장자와 함께 저장합니다(그림 5Aviii, ix).</li>
	<li>각 주파수 대역에 대해 대표 트레이스를 추출해야 하는 채널을 선택하고 Edit > Digital Filtering of Continuous Variables(연속 변수의 디지털 필터링)를 클릭하여 각 주파수 대역을 구한 다음 Filter Freq. 응답을 Bandpass로, IIR(Infinite Impulse Response) Butterworth에서 Filter Implementation, 2에서 Filter Order 값으로 파라미터를 설정합니다. 마지막으로 관심 주파수 범위를 설정합니다(그림 5Bi-iv). 참고: 여기에 사용된 주파수 범위는 델타(δ, 1-4Hz), 세타(θ, 5-12Hz), 베타(β, 13-30Hz), 낮은 감마(낮은 γ, 30-70Hz) 및 높은 감마(높은 γ, 70-100Hz) 진동입니다.</li>
	<li>데이터를 분석하고 그래프를 그립니다.</li>
</ol>6. 스파이크와 LFP의 상관관계
<ol><li>클릭 파일 > 데이터 가져 오기 데이터 > Blackrock 파일 신경 생리학 데이터 분석을 위해 소프트웨어에서 연속 신호 데이터 및 스파이크 데이터를 엽니 다.</li>
	<li>Analysis(분석) > Coherence Analysis(일관성 분석)를 클릭하여 선택한 채널의 스파이크와 LFP 간의 일관성을 분석합니다. 참조 변수(스파이크 타이밍) 및 매개변수를 다음과 같이 설정합니다. 일관성 값, 512에서 주파수 값의 수, 3-5에서 다중 테이퍼 값, 1Hz에서 100Hz까지의 주파수 범위에서 계산합니다(그림 5Ci, ii).</li>
	<li>Results > Numerical Results를 클릭하여 .xls 파일 이름 확장자를 사용하여 스파이크 필드 일관성의 결과를 저장합니다(그림 5Ciii, iv).</li>
	<li>데이터를 분석하고 그래프를 그립니다.</li>
</ol>

생쥐의 운동 피질에서 세포외 전기생리학적 기록

<ol><li>Buzsáki, G., Anastassiou, C. A., Koch, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+of+extracellular+fields+and+currents--EEG%2C+ECoG%2C+LFP+and+spikes%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The origin of extracellular fields and currents--EEG, ECoG, LFP and spikes.</a> Nature Reviews Neuroscience. 13 (6), 407-420 (2012).</li>
<li>Singer, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synchronization+of+cortical+activity+and+its+putative+role+in+information+processing+and+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Synchronization of cortical activity and its putative role in information processing and learning.</a> Annual Review of Physiology. 55, 349-374 (1993).</li>
<li>Arroyo-García, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+spike-gamma+coupling+of+area+CA3+fast-spiking+interneurons+as+the+earliest+functional+impairment+in+the+App%28NL-G-F%29+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Impaired spike-gamma coupling of area CA3 fast-spiking interneurons as the earliest functional impairment in the App(NL-G-F) mouse model of Alzheimer's disease.</a> Molecular Psychiatry. 26 (10), 5557-5567 (2021).</li>
<li>Ozawa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experience-dependent+resonance+in+amygdalo-cortical+circuits+supports+fear+memory+retrieval+following+extinction%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Experience-dependent resonance in amygdalo-cortical circuits supports fear memory retrieval following extinction.</a> Nature Communications. 11 (1), 4358(2020).</li>
<li>Vinck, M., Batista-Brito, R., Knoblich, U., Cardin, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arousal+and+locomotion+make+distinct+contributions+to+cortical+activity+patterns+and+visual+encoding%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Arousal and locomotion make distinct contributions to cortical activity patterns and visual encoding.</a> Neuron. 86 (3), 740-754 (2015).</li>
<li>Beck, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((long-term+dopamine+depletion+causes+enhanced+beta+oscillations+in+the+cortico-basal+ganglia+loop+of+parkinsonian+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">long-term dopamine depletion causes enhanced beta oscillations in the cortico-basal ganglia loop of parkinsonian rats.</a> Experimental Neurology. 286, 124-136 (2016).</li>
<li>Magill, P. J., Bolam, J. P., Bevan, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+of+activity+in+the+subthalamic+nucleus-globus+pallidus+network+to+cortical+electroencephalogram%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Relationship of activity in the subthalamic nucleus-globus pallidus network to cortical electroencephalogram.</a> Journal of Neuroscience. 20 (2), 820-833 (2000).</li>
<li>Magill, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+functional+connectivity+within+the+rat+striatopallidal+axis+during+global+brain+activation+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Changes in functional connectivity within the rat striatopallidal axis during global brain activation in vivo.</a> Journal of Neuroscience. 26 (23), 6318-6329 (2006).</li>
<li>Rapeaux, A. B., Constandinou, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implantable+brain+machine+interfaces%3A+First-in-human+studies%2C+technology+challenges+and+trends%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Implantable brain machine interfaces: First-in-human studies, technology challenges and trends.</a> Current Opinion in Biotechnology. 72, 102-111 (2021).</li>
<li>Tort, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+cross-frequency+couplings+of+local+field+potential+oscillations+in+rat+striatum+and+hippocampus+during+performance+of+a+T-maze+task%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Dynamic cross-frequency couplings of local field potential oscillations in rat striatum and hippocampus during performance of a T-maze task.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (51), 20517-20522 (2008).</li>
<li>Yamamoto, J., Wilson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+chronically+implantable+precision+motorized+microdrive+array+for+freely+behaving+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Large-scale chronically implantable precision motorized microdrive array for freely behaving animals.</a> Journal of Neurophysiology. 100 (4), 2430-2440 (2008).</li>
<li>Chang, E. H., Frattini, S. A., Robbiati, S., Huerta, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Construction+of+microdrive+arrays+for+chronic+neural+recordings+in+awake+behaving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Construction of microdrive arrays for chronic neural recordings in awake behaving mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (77), e50470(2013).</li>
<li>Vandecasteele, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+recording+of+neurons+by+movable+silicon+probes+in+behaving+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Large-scale recording of neurons by movable silicon probes in behaving rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (61), e3568(2012).</li>
<li>Lansink, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+split+microdrive+for+simultaneous+multi-electrode+recordings+from+two+brain+areas+in+awake+small+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A split microdrive for simultaneous multi-electrode recordings from two brain areas in awake small animals.</a> Journal of Neuroscience Methods. 162 (1-2), 129-138 (2007).</li>
<li>Sato, T., Suzuki, T., Mabuchi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+multi-electrode+array+design+for+chronic+neural+recording%2C+with+independent+and+automatic+hydraulic+positioning%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A new multi-electrode array design for chronic neural recording, with independent and automatic hydraulic positioning.</a> Journal of Neuroscience Methods. 160 (1), 45-51 (2007).</li>
<li>van Daal, R. J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implantation+of+Neuropixels+probes+for+chronic+recording+of+neuronal+activity+in+freely+behaving+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Implantation of Neuropixels probes for chronic recording of neuronal activity in freely behaving mice and rats.</a> Nature Protocols. 16 (7), 3322-3347 (2021).</li>
<li>Unakafova, V. A., Gail, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparing+open-source+toolboxes+for+processing+and+analysis+of+spike+and+local+field+potentials+data%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroinformatics%22%5BJournal%5D)">Comparing open-source toolboxes for processing and analysis of spike and local field potentials data.</a> Frontiers in Neuroinformatics. 13, 57(2019).</li>
<li>Mao, L., Wang, H., Qiao, L., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disruption+of+Nrf2+enhances+the+upregulation+of+nuclear+factor-kappaB+activity%2C+tumor+necrosis+factor-alpha%2C+and+matrix+metalloproteinase-9+after+spinal+cord+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mediators+of+Inflammation%22%5BJournal%5D)">Disruption of Nrf2 enhances the upregulation of nuclear factor-kappaB activity, tumor necrosis factor-alpha, and matrix metalloproteinase-9 after spinal cord injury in mice.</a> Mediators of Inflammation. 2010, 238321(2010).</li>
<li>Jin, Z., Zhang, Z., Ke, J., Wang, Y., Wu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise-linked+irisin+prevents+mortality+and+enhances+cognition+in+a+mice+model+of+cerebral+ischemia+by+regulating+Klotho+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Oxidative+Medicine+and+Cellular+Longevity%22%5BJournal%5D)">Exercise-linked irisin prevents mortality and enhances cognition in a mice model of cerebral ischemia by regulating Klotho expression.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2021, 1697070(2021).</li>
<li>Ding, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spreading+of+TDP-43+pathology+via+pyramidal+tract+induces+ALS-like+phenotypes+in+TDP-43+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica+Communications%22%5BJournal%5D)">Spreading of TDP-43 pathology via pyramidal tract induces ALS-like phenotypes in TDP-43 transgenic mice.</a> Acta Neuropathologica Communications. 9 (1), 15(2021).</li>
<li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gamma+oscillation+dysfunction+in+mPFC+leads+to+social+deficits+in+neuroligin+3+R451C+knockin+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Gamma oscillation dysfunction in mPFC leads to social deficits in neuroligin 3 R451C knockin mice.</a> Neuron. 97 (6), 1253-1260 (2018).</li>
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자유롭게 움직이는 마우스의 다중 채널 기록은 신경 과학 연구에서 유용한 기술로 간주되어 왔지만 초보자가 신호를 기록하고 분석하는 것은 여전히 매우 어렵습니다. 본 연구에서는 마이크로 드라이브 시스템을 만들고 전극 이식을 수행하기 위한 간단한 지침과 스파이크 분류 소프트웨어 및 신경 생리학적 데이터 분석을 위한 소프트웨어를 통해 전기 신호를 캡처하고 분석하는 간단한 절차를 제공합니다.
맞춤형 마이크로 드라이브 시스템의 품질이 자유롭게 움직이는 마우스(14,15,16,17)에서 안정적이고 정성적인 신호의 획득에 크게 기여한다는 점을 감안할 때, 본 연구에서는 마이크로 드라이브 시스템을 위해 보다 견고하고 가벼운 구조를 설계하고 사용했으며, ...

세포외 신호의 중요한 구성 요소인 국소전위(LFP)는 여러 행동에 대한 신경 코드를 형성하는 대규모 뉴런 집단의 시냅스 활동을 반영합니다1. 신경 활동에 의해 생성된 스파이크는 LFP에 기여하는 것으로 간주되며 신경 코딩에 중요합니다2. 스파이크와 LFP의 변화는 알츠하이머병과 같은 여러 뇌 질환과 두려움 등의 감정을 매개하는 것으로 입증되었습니다.3,4. 많은 연구에서 동물의 스파이크 활동이 깨어 있는 상태와 마취된 상태 간에 유의한 차이가 있음을 강조했다는 점은 주목할 가치가 있다5. 마취된 동물에서의 기록은 고도로 정의된 피질 동기화 상태에서 최소한의 인공물로 LFP를 평가할 수 있는 기회를 제공하지만, 결과는 깨어 있는 피험자에서 발견될 수 있는 것과는 어느 정도 다르다 6,7,8. 따라서 뇌에 이식된 전극을 이용하여 각성 뇌 상태에서 각종 질환의 장시간 규모와 넓은 공간적 규모에 걸친 신경 활동을 검출하는 것이 더 의미가 있다. 이 원고는 기록 및 분석을 시작하기 위해 빠르고 간단한 방법으로 스파이크 및 LFP 신호를 계산하기 위해 공통 소프트웨어를 사용하여 마이크로 드라이브 시스템을 만들고 매개변수를 설정하는 방법에 대한 초보자를 위한 정보를 제공합니다.
두피에서 기록된 뇌전도(EEG) 및 사건 관련 전위(ERP)를 사용하는 것과 같은 뇌 기능의 비침습적 기록은 인간 및 설치류 연구에서 광범위하게 사용되어 왔지만, EEG 및 ERP 데이터는 공간적, 시간적 특성이 낮기 때문에 특정 뇌 영역 내에서 근처의 수지상 시냅스 활동에 의해 생성된 정확한 신호를 감지할 수 없습니다1. 현재, 의식이 있는 동물에서 다채널 기록을 이용함으로써, 여러 행동 테스트 중에 영장류나 설치류의 뇌에 마이크로 드라이브 시스템을 이식하여 뇌의 더 깊은 층의 신경 활동을 만성적이고 점진적으로 기록할 수 있습니다 1,2,3,4,5,6,7,8,9 . 간단히 말해서, 연구자들은 뇌의 다른 부분들을 표적으로 삼기 위해 전극 또는 사극의 독립적인 포지셔닝에 사용될 수 있는 마이크로-드라이브 시스템을 구성할 수 있다(10,11). 예를 들어, Chang et al.은 가볍고 컴팩트한 마이크로-드라이브(12)를 조립함으로써 마우스에서 스파이크 및 LFP를 기록하는 기술을 기술하였다. 또한, 맞춤형 액세서리 구성 요소를 갖는 미세 가공된 실리콘 프로브는 행동 작업 동안 설치류에서 다수의 단일 뉴런 및 LFP를 기록하기 위해 상업적으로 이용 가능하다(13). 마이크로 드라이브 시스템을 조립하기 위해 다양한 설계가 사용되었지만 전체 마이크로 드라이브 시스템의 복잡성과 무게 측면에서 여전히 제한적인 성공을 거두었습니다. 예를 들어, Lansink 등은 단일 뇌 영역(14)으로부터 기록하기 위한 복잡한 구조를 갖는 다중채널 마이크로-드라이브 시스템을 보여주었다. Sato et al.은 자동 유압 포지셔닝 기능(15)을 표시하는 다채널 마이크로 드라이브 시스템을 보고하였다. 이러한 마이크로 드라이브 시스템의 주요 단점은 마우스가 자유롭게 움직이기에는 너무 무겁고 초보자가 조립하기 어렵다는 것입니다. 다채널 세포외 기록은 행동 테스트 중 신경 활동을 측정하는 데 적합하고 효율적인 기술임이 밝혀졌지만, 초보자가 복잡한 마이크로 드라이브 시스템에서 획득한 신호를 기록하고 분석하는 것은 쉽지 않습니다. 자유롭게 움직이는 마우스(16, 17)에서 다채널 세포외 기록 및 데이터 분석의 전체 동작 과정을 시작하는 것이 어렵다는 점을 감안할 때, 본 논문은 일반적으로 이용 가능한 구성요소 및 설정을 사용하여 마이크로-드라이브 시스템을 만드는 상세한 과정을 소개하기 위한 단순화된 가이드라인을 제시한다; 빠르고 간단한 방법으로 스파이크 및 LFP 신호를 계산하기 위한 공통 소프트웨어의 매개변수도 제공됩니다. 또한 이 프로토콜에서 마우스는 헬륨 풍선을 사용하여 자유롭게 움직일 수 있으며, 이는 헤드스테이지 및 마이크로 드라이브 시스템의 무게를 상쇄하는 데 기여합니다. 일반적으로 본 연구에서는 마이크로 드라이브 시스템을 쉽게 구축하고 기록 및 데이터 분석 프로세스를 최적화하는 방법을 설명합니다.

<table><tbody><tr><td>2.54mm 핀 헤더</td><td>YOUXIN Electronic Co., Ltd.</td><td>1 x 5</td> 그루<td>터기에서 미끄러질 수 있는 이동식 마이크로 드라이브를 신청합니다.</td></tr><tr><td>어도비 일러스트레이터 CC 2017</td><td>어도비</td><td>N/A</td><td>GraphPad에서 이미지를 최적화합니다.</td></tr><tr><td>BlackRock Microsystems</td><td>Blackrock Neurotech</td><td>Cerebus</td><td>이 시스템에는 헤드새지, DA 변환, 증폭기 및 컴퓨터가 포함됩니다.</td></tr><tr><td>황동 너트</td><td>Dongguan Gaosi Technology Co., Ltd.</td><td>M0.8 황동 너트</td><td>너트는 나사의 위치를 고정합니다.</td></tr><tr><td>황동 나사</td><td>Dongguan Gaosi Technology Co., Ltd.</td><td>M0.8 x 11mm 황동 나사</td><td>이동식 마이크로 드라이브를 고정하는 나사.</td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>광동 Zhiyuan 생물 의학 기술 Co., LTD.</td><td>N/A</td><td>생후 12주.</td></tr><tr><td>원심분리기 튜브</td><td>Biosharp</td><td>15 mL; BS-150-M</td><td>자당 sulutions를 가진 쥐 두뇌를 저장하기 위하여.</td></tr><tr><td>전도성 페인트</td><td>구조 프로브, Inc.</td><td>7440-22-4</td><td>커넥터 핀과 Ni-와이어 사이의 리드 연결 품질을 향상시킵니다.</td></tr><tr><td>전도성 동박 테이프</td><td>3M</td><td>1181</td><td>간섭을 줄이기 위해.</td></tr><tr><td>커넥터</td><td>: YOUXIN Electronic Co., Ltd.</td><td>2 x 10P</td><td>헤드를 연결하려면tage를 마이크로 드라이브 시스템에 연결합니다.</td></tr><tr><td>DC 전원 공급 장치</td><td>Maisheng</td><td>MS-305D</td><td>전기 병변에 대한 전원 장치.</td></tr><tr><td>치과 시멘트</td><td>Shanghai New Century Dental Materials Co., Ltd.</td><td>N/A</td><td>이식을 마친 후 마우스의 두개골에 전극 배열을 고정합니다.</td></tr><tr><td>디지털 아날로그 컨버터</td><td>Blackrock</td><td>128-Channel</td><td>디지털 데이터를 아날로그 신호로 변환하는 장치입니다.</td></tr><tr><td>에폭시 수지</td><td>Alteco</td><td>N/A</td><td>핀을 덮습니다.</td></tr><tr><td>엑셀</td><td>Microsoft</td><td>N/A</td><td>분석 후 데이터를 요약합니다.</td></tr><tr><td>눈 가위</td><td>JiangXi YuYuan 의료 기기 Co., Ltd.</td><td>N/A</td><td>수술 또는 Ni-chrome 와이어 절단용.</td></tr><tr><td>정밀한 겸자</td><td>JiangXi YuYuan 의료 기기 Co., 주식 회사.</td><td>N/A</td><td>수술용.</td></tr><tr><td>겸자</td><td>JiangXi YuYuan 의료 기기 Co., Ltd.</td><td>N/A</td><td>수술 또는 mirco-drive 시스템 조립용.</td></tr><tr><td>냉동 마이크로톰</td><td>Leica</td><td>CM3050 S</td><td>&nbsp; 마우스를 잘라라' s 뇌를 조각으로 융합</td></tr><tr><td>실리카 모세관 튜브</td><td>Zhengzhou INNOSEP Scientific Co., Ltd.</td><td>TSP050125</td><td>To&nbsp;는 Ni-chrome 와이어의 가이드 튜브 역할을 합니다.</td></tr><tr><td>유리 미세 전극</td><td>Sutter Instrument Company</td><td>BF100-50-10</td><td>채워진 잉크를 사용하여 원하는 이식 위치를 표시합니다.</td></tr><tr><td>GraphPad Prism 7</td><td>GraphPad 소프트웨어</td><td>N/A</td><td>결과를 분석하고 시각화합니다.</td></tr><tr><td>가이드 튜브</td><td>Polymicro 기술</td><td>1068150020</td><td>Ni-chrome 와이어를 로드합니다.</td></tr><tr><td>헤드스테이지</td><td>블랙록</td><td>N/A</td><td>신호 전송 도구.</td></tr><tr><td>헬륨 풍선</td><td>Yili 축제 제품 Co., Ltd.</td><td>24 인치</td><td>헤드의 무게를 상쇄합니다.tage 및 마이크로 드라이브 시스템.</td></tr><tr><td>잉크</td><td>세일러 펜 Co., LTD.</td><td>13-2001</td><td>이식을 위해 원하는 위치를 표시합니다.</td></tr><tr><td>요오드 팅크</td><td>Guangdong Hengjian Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>N/A</td><td>쥐의 두피를 소독합니다.</td></tr><tr><td>염산염 및 리도카인의 린코마이신&nbsp; 염산염 겔</td><td>Hubei kangzheng pharmaceutical co., ltd.</td><td>10g</td><td>염증을 줄이는 데 사용되는 약물.</td></tr><tr><td>Meloxicam</td><td>Vicki 생물공학 Co., 주식 회사.</td><td>71125-38-7</td><td>생쥐의 수술 후 통증을 감소시킵니다.</td></tr><tr><td>Micromanipulators</td><td>Scientifica</td><td>Scientifica IVM Triple</td><td>전극 어레이 이식용.</td></tr><tr><td>현미경&nbsp;</td><td>니콘</td><td>이클립스 Ni-E</td><td>&nbsp; 뇌 절편</td></tr><tr><td>nanoZ 임피던스 테스터</td><td>Plexon</td><td>nanoZ</td>의 이미지를 캡처<td>하여 임피던스를 측정하거나 다채널 미세 전극 어레이에 대한 전극 임피던스 분광법(EIS)을 수행합니다.</td></tr><tr><td>NeuroExplorer</td><td>Plexon</td><td>NeuroExplorer</td><td>전기생리학적 데이터를 분석하기 위한 도구입니다.</td></tr><tr><td>뉴로익스플로러&nbsp;</td><td>Plexon, 미국</td><td>N/A</td><td>소프트웨어.</td></tr><tr><td>니켈 크롬 와이어</td><td>California Fine Wire Co.</td><td>M472490</td><td>35 &mu; m 니켈 크롬 와이어.</td></tr><tr><td>오프라인 분류기(Offline Sorter</td>) <td>플렉슨</td><td>오프라인 분류기(Plexon Offline Sorter</td><td>) 기록된 다중 단위를 분류하기 위한 도구입니다.</td></tr><tr><td>PCB 보드</td><td>Hangzhou Jiepei Information Technology Co., Ltd.</td><td>N/A</td><td>컴퓨터 설계 보드.</td></tr><tr><td>펜토바르비탈</td><td>시그마</td><td>P3761</td><td>생쥐를 마취합니다.</td></tr><tr><td>펜토바르비탈 나트륨</td><td>시그마</td><td>57-33-0</td><td>마우스를 마취합니다.</td></tr><tr><td>연동 펌프</td><td>더 긴</td><td>BT100-1F</td><td>관류에 사용되는</td></tr><tr><td>장치 폴리포름알데히드&nbsp;</td><td>Sangon Biotech</td><td>A500684-0500</td><td>쥐 뇌 고정을 위한 고정 용액의 주요 구성 요소&nbsp;</td></tr><tr><td>PtCl4</td><td>Tianjin Jinbolan 정밀한 화학 Co., 주식 회사.</td><td>13454-96-1</td><td>금도금 액체의 제조.</td></tr><tr><td>식염수</td><td>Guangdong Hengjian 제약 Co., Ltd.</td><td>N/A</td><td>마우스의 두개골을 청소합니다.</td></tr><tr><td>실버 와이어</td><td>쑤저우 Xinye 전자 Co., Ltd.</td><td>2mm 직경</td><td>접지 및 기준 전극에 적용됩니다.</td></tr><tr><td>두개골 드릴</td><td>RWD Life Science</td><td>78001</td><td>마우스의 두개골에 두 개의 작은 구멍을 조심스럽게 뚫습니다.</td></tr><tr><td>스테인레스 스틸 나사</td><td>YOUXIN Electronic Co., Ltd.</td><td>M0.8 x 2</td><td>마이크로 드라이브 시스템을 보호하고 접지 및 기준 전극을 연결합니다.</td></tr><tr><td>입체 운동 장치</td><td>RWD Life Science</td><td>68513</td><td>양측 운동 피질의 입체 좌표를 수행합니다.</td></tr><tr><td>설탕</td><td>Damao</td><td>57-50-1</td><td>관류 후 쥐의 뇌를 탈수시킵니다.</td></tr><tr><td>슈퍼 접착제</td><td>Henkel AG & Co.</td><td>PSK5C</td><td>가이드 튜브와 Ni-chrome 와이어를 고정합니다.</td></tr><tr><td>온도 조절기</td><td>Harvard Apparatus</td><td>TCAT-2</td><td>마우스의 직장 온도를 37°C로 유지합니다. C</td></tr><tr><td>Tetracycline 눈 연고</td><td>Guangdong Hengjian Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>N/A</td><td>수술 중 마우스의 눈을 보호하기 위해.</td></tr><tr><td>스레드</td><td>Rapala</td><td>N/A</td><td>발론과 헤드 스테이지를 연결합니다.</td></tr><tr><td>Vaseline</td><td>Unilever plc</td><td>N/A</td><td>전극 어레이와 마우스의 두개골 사이의 틈을 커버합니다.</td></tr></tbody></table>

자유롭게 움직이는 마우스의 다채널 세포외 기록

Multichannel Extracellular Recording in Freely Moving Mice

이 프로토콜은 전기생리학적 신호를 자발적 및/또는 특정 행동과 연관시킴으로써 특정 작업을 수행하는 마우스에서 신경 세포 발화 및 네트워크 국소장 전위(LFP)의 특성을 밝히는 것을 목표로 합니다. 이 기술은 이러한 행동의 기초가 되는 뉴런 네트워크 활동을 연구하는 데 유용한 도구입니다. 이 논문은 자유롭게 움직이는 의식이 있는 마우스에서 전극 이식 및 그에 따른 세포외 기록에 대한 상세하고 완전한 절차를 제공합니다. 이 연구에는 미세 전극 어레이를 이식하고, 다중 채널 시스템을 사용하여 운동 피질(MC)에서 LFP 및 신경 세포 스파이크 신호를 캡처하고, 후속 오프라인 데이터 분석을 위한 자세한 방법이 포함됩니다. 의식이 있는 동물에서 다중 채널 기록의 장점은 더 많은 수의 스파이킹 뉴런과 뉴런 아형을 얻고 비교할 수 있어 특정 행동과 관련 전기생리학적 신호 간의 관계를 평가할 수 있다는 것입니다. 특히, 본 연구에서 기술한 다채널 세포외 기록 기법 및 데이터 분석 절차는 행동하는 마우스에서 실험을 수행할 때 다른 뇌 영역에도 적용될 수 있다.

고역 통과(250Hz) 필터를 적용하여 원시 신호에서 다중 단위 스파이크를 추출했습니다(그림 6A). 또한, PCA에 의해 정렬된 일반 마우스의 MC에서 기록된 단위를 검증하고(그림 7A-D), 마우스의 MC에 있는 단위의 밸리 폭과 파형 지속 시간을 기록했습니다. 그 결과, 생쥐에서 MC 추정 피라미드 뉴런(Pyn)의 밸리 폭과 파형 지속 시간이 추정 인터뉴런(IN)보다 높다는 것을 보여주었습니다(그림 7E,F; 두 개의 샘플 Mann-Whitney 테스트; 밸리 폭의 경우, 추정 Pyn: 0.636ms ± 0.004ms, 추정 IN: 0.614ms ± 0.001ms, p = 0.002; 파형 지속 시간, 추정 Pyn: 0.095 ms ± 0.004 ms, 추정...

이 프로토콜은 자유롭게 움직이는 의식이 있는 마우스의 세포외 전기생리학적 특성을 밝히기 위해 운동 피질(MC)에서 세포외 기록 방법론을 설명하고, 관심 행동의 기저에 있는 네트워크 신경 활동을 평가하는 데 유용한 국소전위(LFP) 및 스파이크의 데이터 분석을 설명합니다.

The protocol aims to uncover the properties of neuronal firing and network local field potentials (LFPs) in behaving mice carrying out specific tasks by ...

우리는 전기 생리학적 신호를 행동과 연관시킴으로써 특정 작업을 수행하는 쥐의 행동에서 신경 발화 및 네트워크 국소 필드 전위의 특성을 밝히는 것을 목표로 합니다. 마이크로 드라이브 시스템에 의한 다중 채널 세포 외 기록은 행동 테스트 중 신경 활동에 적합하고 효율적인 기술인 것으로 나타났습니다. 자유롭게 움직이는 마우스의 다중 채널 기록은 신경 과학 연구에서 유용한 기술로 간주되어 왔지만 초보자가 신호를 수집하고 분석하는 것은 여전히 매우 어렵습니다.보다 안정적이고 가벼운 마이크로 드라이브 시스템을 사용하여 자유롭게 움직이는 마우스에서 다중 채널 세포 외 기록을 수행하고 초보자를 위해 기록 및 데이터 분석 프로세스를 최적화하는 방법을 소개했습니다. 새 버전에서는 채널 수를 늘리고 마이크로 드라이버 시스템의 볼륨을 줄일 예정입니다.

multichannel-extracellular-recording-in-freely-moving-mice

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 문서에서는, 우리는 수술 절차를 설명하고 마우스 모델에서 고밀도 encephalography (EEG)의 취득에 마우스 두개골에 울트라 얇은 polyimide 기반 microelectrode 배열 (PBM - 배열)의 주입을위한 도움말을 취급.

Polyimide 기반 Microelectrode를 사용하여 자유롭게 이동 마우스의 고밀도 뇌파 레코딩

이 비디오는 단일 뉴런 수준에서 안정적인 장기 기록을 위해 메쉬 전자 프로브를 마우스 뇌에 주입하는 방법을 보여줍니다. 두개골이 노출된 마취된 쥐는 입체택시 프레임에 고정되고 프로브의 메쉬 장치 영역은 뚫린 구멍을 통해 뇌에 주입됩니다. 프로브의 입력-출력 패드는 회로에 연결되며 기록은 데이터 수집 시스템을 사용하여 얻습니다.

마우스 뇌에서 안정적인 단일 뉴런 기록을 위한 주입 가능한 메시 전자 장치

이 비디오는 청각 자극을 처리하는 마우스 뇌의 특정 영역에서 신경 세포 활동에 대한 연구를 보여줍니다. 이 기술은 억제성 신경 전달 차단제를 적용하고 약물이 국소 뇌 영역에 적용되기 전과 후의 청각 자극에 대한 신경 반응을 비교하는 것을 포함합니다.

억제성 신경전달물질 차단제가 있는 상태에서 깨어 있는 쥐의 청각 신경 반응 조사

이 프로토콜은 경보를 발하는 쥐의 피질하 뇌 구조에서 신경 세포 활동을 모니터링하기 위한 머리 억제 메커니즘의 설계 및 외과적 이식을 설명합니다.  이 책은 병치세포 구성에서 단일 뉴런을 분리하고 해부학적 위치를 효율적으로 식별하는 절차를 설명합니다.

경고, 헤드 억제 쥐의 하위 대뇌 피질의 뇌 구조 내에서 Juxtacellular 모니터링 및 현지화 단일의 뉴런

이 방법은 탐색 및 동물의 머리의 확고한 고정을 필요로 미세한 영상 또는 단일 세포 전기 생리학 녹음하는 동안 탐험하는 마우스 유형, 친숙한 환경을 만듭니다.

평면 바닥의 공기 해제 플랫폼 : 새로운 방법이 깨어에 현미경 또는 전기 생리학과 행동을 결합하여 자유롭게 설치류 이동

깨어 있는 쥐의 기록 부위 부근에서 세포 외 신경 활동을 동시에 기록하고 여러 신경 활성 물질을 방출하는 전극 구성 방법을 제시합니다. 이 기술을 사용하면 관심 있는 뉴런에 대한 추정 국소 시냅스 입력값을 자세히 분석할 수 있습니다.

깨어 마우스의 신경 활성 물질의 Microiontophoretic 응용 프로그램과 결합하여 신경 활동의 세포 외 기록

무선, 멀티 채널 신경 녹음 및 자유롭게 쥐 행동에 자극에 대 한 양방향 시스템 도입. 시스템은 가볍고 콤팩트, 따라서 animal´s 행동 레 퍼 토리에 최소한의 영향을 미치고. 또한,이 양방향 시스템 두뇌 활성화 패턴 및 행동 간의 인과 관계를 평가 하는 정교한 도구를 제공 합니다.

무선, Vivo에서 녹음 하 고 자유롭게 행동 하는 쥐에서 신경 활동의 자극에 대 한 양방향 인터페이스

여기, 선물이 두뇌를 기록 하 고 동시 비디오를 사용 하 여 마우스에 바이오 신호를 심장에 프로토콜 electroencephalography (뇌 파), 그리고 심전도 (ECG). 우리는 또한 발작, 뇌 파 스펙트럼 전력, 심장 기능, 그리고 심장 박동의 변화에 대 한 결과 뇌 파 ECG 기록 분석 하는 방법을 설명 합니다.

동시 비디오-뇌 파-ECG 모니터링 Neurocardiac 부전 간 질 마우스 모델에서을 식별 하

밀리미터 크기의 코일과 결합된 저비용 뇌파 기록 시스템은 생체 내에서 마우스 뇌의 경두개 자기 자극을 유도하기 위해 제안되었습니다. 맞춤형의 유연한 다중 전극 어레이 기판이 있는 기존의 나사 전극을 사용하여 경두개 자기 자극에 대한 반응으로 마우스 뇌에서 다중 부위 기록을 수행할 수 있습니다.

생체 내에서 마우스 뇌를 경두개로 자극하기 위해 밀리미터 크기의 코일과 결합된 저비용 뇌파 기록 시스템

이 프로토콜은 자유롭게 움직이는 설치류 EEG를 기록하기 위한 안정적이고 쉽게 접근할 수 있는 시스템을 만들기 위해 개발되었습니다.

자유롭게 움직이는 마우스의 만성 다중 사이트 뇌파 기록을 위한 비용 효율적이고 최소 침습적 프로토콜

이 프로토콜은 쥐에서 크고 재밀봉 가능한 경막 보존 두개골 창을 만들기 위한 2단계 수술 방법을 설명합니다. 이 기술은 기본 모드 네트워크와 같은 분산된 심부 뇌 네트워크에서 몇 주에 걸쳐 만성적이고 다중 모달 전기생리학적 기록을 가능하게 합니다.

마우스 기본 모드 네트워크의 종단적이고 다중 모드 전기생리학 기록을 가능하게 하는 대형 재밀봉 가능한 두개골 창을 위한 수술 프로토콜

배우세요 자유롭게 움직이는 마우스의 다채널 세포외 기록 방법을 통해 운동피질의 국소장 전위와 스파이크 활동을 분석하는 기술입니다. 이 프로토콜은 초보자도 신경 신호를 효과적으로 획득하고 분석할 수 있도록 최적화되어 있습니다.

자유롭게 움직이는 마우스의 다채널 세포외 기록

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