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DOI: 10.3791/65265-v
Kaede Saito1,2, Yuta Hiraike1,2,3, Misato Oguchi2, Toshimasa Yamauchi2
1Division for Health Service Promotion,The University of Tokyo, 2Department of Diabetes and Metabolic Diseases, Graduate School of Medicine,The University of Tokyo, 3The University of Tokyo Excellent Young Researcher Program,The University of Tokyo
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study focuses on the semi-automated isolation of the stromal vascular fraction (SVF) from murine adipose tissue, with the aim of obtaining preadipocytes and promoting adipocyte differentiation in vitro. A novel protocol utilizing a tissue dissociator for collagenase digestion is presented, which enhances reproducibility and reduces experimental variation.
이 프로토콜은 지방전구세포를 얻고 시험관 내에서 지방세포 분화를 달성하기 위해 쥐 지방 조직에서 기질 혈관 분획(SVF)의 반자동 분리를 설명합니다. 콜라게나제 분해를 위해 조직 해리제를 사용하면 실험 변동이 줄어들고 재현성이 높아집니다.
우리는 열의 형태로 에너지를 발산하는 갈색 및 베이지색 지방세포의 아형에 관심이 있는 반면, 백색 지방세포는 일반적으로 에너지 섭취를 억제하는 것이 아니라 에너지 소비를 촉진하여 비만과 당뇨병에 대한 새로운 치료법을 개발하는 것이 목표입니다. 우리는 전사 인자인 NFI를 게놈 차원의 개방형 염색질 분석에 의해 갈색 지방세포 분화의 중요한 조절자로 확인했습니다. NFI와 지방 생성의 마스터 전사 조절자인 PPAR-감마는 갈색 지방 특이적 강화제로 공동 국소화됩니다.
마우스 지방 조직으로부터 기질 혈관 분획을 분리하는 과정에서, 지방 조직의 수동 다짐 및 콜라게나제 소화는 실험적 가변성 및 오염을 초래할 수 있다. 우리의 방법은 콜라게나제 소화를 위해 조직 해리제를 사용하여 SVF 분리를 용이하게 하고 실험 가변성과 오염을 줄이며 재현성을 향상시킵니다. 개별적으로 분화된 지방세포를 이용한 실험은 본 분야의 연구에 빠뜨릴 수 없습니다.
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