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형광 리포터 및 ChIP(Chromatin Immunoprecipitation)를 사용한 예쁜꼬마선충(C. elegans )의 ...
형광 리포터 및 ChIP(Chromatin Immunoprecipitation)를 사용한 예쁜꼬마선충(C. elegans )의 ...
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JoVE Journal Genetics
Analysis of Transgenerational Epigenetic Inheritance in C. elegans Using a Fluorescent Reporter and Chromatin Immunoprecipitation (ChIP)

형광 리포터 및 ChIP(Chromatin Immunoprecipitation)를 사용한 예쁜꼬마선충(C. elegans )의 세대 간 후성유전학적 유전 분석

Full Text
4,421 Views
10:28 min
May 5, 2023

DOI: 10.3791/65285-v

Chengyin Li*1, Phoebe A. W. Bhagoutie*1, Victor Lao1, Arneet L. Saltzman1

1Department of Cell and Systems Biology,University of Toronto

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

이 프로토콜은 예쁜꼬마선충(C. elegans)에서 RNAi 유도 침묵 및 관련 염색질 변형의 후성유전학적 유전을 연구하기 위한 RNA 간섭 및 ChIP 분석을 설명합니다.

Transcript

우리 실험실의 연구는 염색질 관련 단백질, 히스톤 변형 및 작은 RNA 경로 요인이 발달 및 세대 간 후성 유전 유전의 맥락에서 어떻게 함께 작동하는지 조사합니다. GFP 리포터를 사용하는 RNA 유전 분석은 매우 강력한 도구가 되었습니다. 이 프로토콜은 웜의 준비, 채점 및 패싱을 표준화하는 방법과 재현 가능한 결과를 생성하는 데 도움이 될 수 있는 ChIP 샘플의 준비를 설명합니다.

생식세포 발현 전이유전자를 연구할 때 실험적 과제 중 하나는 동물의 생식세포에서 효과를 분리하는 것입니다. 우리는 현재 ChIP에 전체 동물을 사용하고 있지만 미래에는 특히 생식세포에서 염색질을 검사하기 위한 분석을 개발하고자 합니다. 우리 실험실은 히스톤 메틸화와 이러한 표시를 인식하는 단백질에 관심이 있습니다.

앞으로 우리는 전이유전자에서의 RNAi 유전과 내인성 서열의 조절의 맥락에서 이러한 염색질 리더와 작은 RNA 경로 사이의 상호 작용을 조사하고자 합니다.

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세대 간 후성 유전 유전 C. elegans 형광 리포터 염색질 면역 침전 RNA 간섭 (RNAi) 유전 비 코딩 RNA 염색질 변형 생식 세포 유전자 침묵 염색질 서명 녹색 형광 단백질 (GFP) 리포터 이중 가닥 RNA 동기화 된 발달 현미경 염색질 면역 침전 (ChIP) 정량적 중합효소 연쇄 반응 (qPCR) 히스톤 변형 농축

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