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인간 유도 만능 줄기 세포 유래 심근 세포에서 칼슘 및 수축성 매개변수의 실시간 측정
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JoVE Journal Biology
Real-Time Measurements of Calcium and Contractility Parameters in Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes

인간 유도 만능 줄기 세포 유래 심근 세포에서 칼슘 및 수축성 매개변수의 실시간 측정

Full Text
3,593 Views
06:42 min
May 26, 2023

DOI: 10.3791/65326-v

Rafeeh Dinani1,2, Emmy Manders1,2,3, Michiel Helmes1,2,3, Lili Wang4, Bjorn C. Knollmann4, Diederik W. D. Kuster1,2, Jolanda van der Velden1,2

1Division of Physiology, Amsterdam UMC,Vrije University, 2Heart Failure & Arrhythmias,Amsterdam Cardiovascular Sciences, 3CytoCypher BV, 4Division of Clinical Pharmacology,Vanderbilt School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study introduces a user-friendly method to measure the contractility and calcium handling of human-induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes (hiPSC-CMs). The approach allows researchers to rapidly assess the effects of genetic mutations and pharmacological interventions, demonstrating its utility in drug screening and understanding cellular mechanisms.

Key Study Components

Research Area

  • Cardiomyocyte function
  • Drug interventions
  • Cellular pathophysiology

Background

  • hiPSC-CMs are valuable for studying cardiac diseases.
  • Understanding contraction and calcium dynamics is crucial for characterizing cardiomyocyte function.
  • A reproducible measurement platform is necessary for effective experimentation.

Methods Used

  • Optics-based measurement system for contractility and calcium measurements
  • Human-induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes
  • Pixel correlation techniques and cytosolver analysis

Main Results

  • The method successfully captured synchronized contraction and relaxation along with calcium transients.
  • Application of beta-adrenergic receptor agonist iso increased beat frequency and improved contractile kinetics.
  • Data was efficiently analyzed using the Cytosolver program.

Conclusions

  • This method enhances the ability to study cardiac function at a cellular level.
  • It supports the development of therapeutic strategies through preclinical drug screening.

Frequently Asked Questions

What is the significance of using hiPSC-derived cardiomyocytes?
They provide a patient-specific model to study cardiac diseases and drug responses.
How does the measurement platform ensure reproducibility?
The platform standardizes conditions and measurement protocols, reducing variability.
What role does the calcium sensitive FloA-PhoR play in the experiment?
It allows for real-time measurements of intracellular calcium transients during contractions.
Can this method be applied to other cell types?
While designed for cardiomyocytes, the platform may be adaptable to other cell types with similar contractility features.
How does the platform contribute to drug screening?
It enables the rapid evaluation of drug effects on cardiac function, facilitating preclinical assessments.
What parameters are analyzed in the study of contractility?
Key parameters include resting frequency, time to peak contractility, and time to baseline contractility.
Is the method suitable for high-throughput screening?
Yes, the platform supports multiple plate formats for high-throughput applications.

여기서, 광학 기반 플랫폼을 사용하여 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 심근 세포에서 수축성 및 칼슘 측정을 수행하는 확립된 방법이 설명되어 있습니다. 이 플랫폼을 통해 연구자들은 돌연변이의 효과와 다양한 자극에 대한 반응을 빠르고 재현 가능한 방식으로 연구할 수 있습니다.

인간 유도 만능 줄기 세포 유래 심근 세포는 심근 세포 기능의 돌연변이 매개 변화를 연구하고 스트레스 요인 및 약물 개입의 효과를 정의하기 위한 강력한 도구입니다. 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 심근 세포의 수축성 및 칼슘 취급을 사용자 친화적이고 재현 가능한 방식으로 측정할 수 있는 플랫폼이 필요합니다. 이 방법을 통해 연구자들은 픽셀 상관관계를 통해 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 심근 세포의 수축성을 연구하고 칼슘 민감성 형광단으로 세포를 로딩하여 세포 내 칼슘 과도 현상을 동시에 측정할 수 있습니다.

이 플랫폼을 사용하면 잘 보존된 온도 환경과 다양한 플레이트 형식에서 쌍을 이루는 측정을 수행하고 데이터에 즉시 액세스할 수 있습니다. 이 방법은 세포 병리학 기전의 연구를 가능하게 하고 전임상 약물 스크리닝 과정에 도움이 될 수 있는 화합물의 효과와 인간 iPSC 유래 심근 세포의 기능을 평가합니다.

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생물학 문제 195

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