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DOI: 10.3791/65460-v
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이 프로토콜은 신진 효모인 맥주효모균(Saccharomyces cerevisiae)에서 네이티브 염색질 맥락에서 관심 있는 단일 복제 유전자 자리를 정제하기 위해 부위 특이적 재조합을 기반으로 하는 유전자좌 특이적 염색질 분리 방법을 제시합니다.
진핵 핵은 동시에 발생하는 많은 생물학적 과정으로 매우 붐비고 있습니다. 우리 연구의 범위는 이러한 모든 과정이 게놈 불안정성과 인간 질병으로 이어질 수 있는 큰 사고 없이 게놈에서 어떻게 조정되는지 이해하는 것입니다. 이 프로토콜을 사용하면 원래 상태에서 게놈의 특정 유전자좌를 정제할 수 있으므로 단백질 DNA 상호 작용 측정과 같은 분리된 물질의 구성 및 기능적 특성을 모두 수행할 수 있습니다.
이 프로토콜은 표적 유전자좌의 엄청난 수준의 농축을 가능하게 하여 유전자좌 특이적 염색질 분리의 많은 현재 한계를 극복합니다. 재료가 가교되지 않았습니다. 또한 in vitro transcription 또는 in vitro replication과 같은 많은 다운스트림 기능 분석이 가능합니다.
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