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Limosilactobacillus reuteri DSM20016의 전기천공 및 변형 확인 방법
Limosilactobacillus reuteri DSM20016의 전기천공 및 변형 확인 방법
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JoVE Journal Bioengineering
Methods for Electroporation and Transformation Confirmation in Limosilactobacillus reuteri DSM20016

Limosilactobacillus reuteri DSM20016의 전기천공 및 변형 확인 방법

Full Text
4,965 Views
11:04 min
June 23, 2023

DOI: 10.3791/65463-v

Alexander Duggan1, David McMillen1

1University of Toronto Mississauga

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

여기에서는 리 모실락토바실러스 루테리 DSM20016 작업을 위한 프로토콜, 성장, 플라스미드 형질전환, 콜로니 PCR, 형광 리포터 단백질 측정, 제한된 플라스미드 미니 프렙, 일반적인 문제 및 문제 해결을 자세히 설명합니다. 이러한 프로토콜을 통해 DSM20016에서 리포터 단백질을 측정하거나 리포터가 관여하지 않는 경우 콜로니 PCR을 통해 확인할 수 있습니다.

L.루테리, 특히 이 균주, DSM20016는 튼튼하고 자연적인 인간 장 공생제로, 위장관 전반에 걸쳐 치료 전달 및 질병 감지에 대한 큰 가능성을 가지고 있습니다. 이 작업은 DSM20016 이러한 종류의 응용 분야를 위한 합성 생물학 섀시로 포지셔닝하는 데 도움이 될 것입니다. 락토바실란에는 특정 모델 유기체가 없습니다.

선호하는 종은 존재하지만 일반적으로 특정 연구 목표에 대한 편견으로 선택됩니다. 박테리아 계열 내의 변이로 인해 프로토콜이 단편화되었으며 일부는 출판물을 통해 반복되는 수정이 반복되었습니다. 시작하는 사람들이 유용한 것과 유용하지 않은 것을 정확히 필터링하는 것은 매우 어렵습니다.

DSM20016의 변화를 위한 하나의 논문이 존재하지만 현대적이지는 않습니다. 다른 락토바실랄 계열 구성원을 위한 현대적인 프로토콜이 존재하지만 DSM20016 않습니다. 여기서 우리는 DSM20016 electroporation을 위한 사용하기 쉽고, 중앙 집중화되고, 현대화되고, 완전한 프로토콜 세트를 제공하기 위해 노력합니다.

이 프로토콜 세트는 이전 DSM20016 탐사 프로토콜에 비해 상당한 현대화를 제공하며 일부 매달린 스레드를 설명하고 이전에는 명확하지 않았던 부분을 강조합니다. 프로토콜 세트도 완전하며, 특히 DSM20016의 경우 다른 비DSM20016 프로토콜이 완전히 호환되지 않는 변형입니다. 우리의 주요 목표 중 하나는 미생물을 저렴한 센서 및 전달 시스템으로 사용하는 것입니다.

우리는 장 질환 전문가와 협력하여 DSM20016 사용하여 위장관의 상태를 감지하고 필요에 따라 치료제를 제공하고 있습니다.

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