PD-1/PD-L1 상호 작용의 PDL1-Vaxx 펩타이드 백신 유도 항체 봉쇄의 자기 형광 비드 기반 이중 리포터 흐름 분석
2023년 7월 7일
체크포인트 억제제는 암과의 싸움을 위한 치료법을 개발하는 데 중요한 표적입니다. 이 보고서는 PD-1/PDL1 복합체 형성을 차단하는 중화 다클론 항체 생성을 유도하는 새로운 PDL1 펩타이드 기반 암 백신인 PDL1-Vaxx를 소개합니다. 이 작업은 또한 이 활성을 분석하기 위한 형광 비드 기반 분석법의 개발 및 테스트에 대해 자세히 설명합니다.
Pravin Kaumaya 교수가 이끄는 우리의 프로젝트는 암에 대항하여 더 잘 싸우기 위해 면역 체계를 강화하는 데 사용할 수 있는 B 세포 에피토프 펩타이드 백신을 개발하는 데 중점을 두고 있습니다. 면역관문 표적을 표적으로 하는 펩타이드 백신은 환자의 예후를 개선하기 위해 다른 치료법과 결합될 수도 있다고 생각합니다. 우리는 인간 재조합 PD-L1 단백질이 MagPlex 비드에 결합된 전통적인 마이크로비드 분석에서 항 PD-L1 항체의 차단 능력을 테스트하고자 했습니다.
PD-L1이 비드에 결합되면 PD-1 리간드에 대한 결합 능력이 낮다는 것을 발견했습니다. 이로 인해 이러한 테스트 차단 방법을 사용할 수 없었습니다. 단백질을 비드에 결합하는 것이 리간드 또는 항체에 대한 결합을 억제하는 경우, 용액에서 테스트 항체로 전처리한 후 나중에 리간드 코팅 비드를 표적 차단제 혼합물에 추가하는 것이 옵션입니다.
그들의 상호 작용을 조사할 수 있습니다. 이는 동일한 표적-리간드-결합 상호작용을 연구하는 다른 경로일 수 있습니다 당사는 B-Vaxx, PD1-Vaxx, PDL1-Vaxx 및 CTLA4-Vaxx 암 백신을 개발했습니다. 이 백신은 HER2를 표적으로 하며 여러 면역 관문 마커가 다양한 형태의 암에 관여합니다.
B-Vaxx와 PD1-Vaxx는 호주와 미국에서 임상시험이 진행 중이다. 우리의 면역관문 백신이 더 많은 환자에게 도움이 되기를 바랍니다. 이전 마이크로스피어 실험에서 PD-1이 리간드 PD-L1과 잘 상호 작용한다는 것을 발견했습니다. 따라서 PD-1 태그가 부착된 MagPlex 비드를 추가하기 전에 항-PD-L1 펩타이드 항체를 비오틴화된 PD-L1 단백질에 사전 결합하여 프로토콜을 재설계했습니다.
이를 통해 항체가 PD-1/PD-L1 상호작용을 차단하는 능력을 테스트할 수 있었습니다. 앞으로도 치료 내성을 극복하는 병용 면역항암제에 주력할 것입니다. 또한 종양 성장을 더 잘 억제하고, 전이를 방지하며, 환자의 생존율을 연장할 수 있는 보다 효과적인 병용 요법을 모색하고자 합니다.
개요
본 연구는 중화 항체를 유도하여 암에 대한 면역 반응을 강화하도록 설계된 새로운 PDL1 펩타이드 기반 암 백신인 PDL1-Vaxx를 제시합니다. 또한, 본 연구에서는 PD-1/PD-L1 상호작용에 대한 이러한 항체들의 차단 활성을 분석하기 위한 형광 비드 기반 분석법을 상세히 설명합니다.
주요 연구 구성 요소
과학 분야
- 면역학
- 암 치료
- 백신 개발
배경
- 면역관문 억제제는 암 치료에 있어 매우 중요합니다.
- PD-L1은 면역관문 차단의 중요한 표적입니다.
- 펩타이드 백신은 잠재적으로 면역 반응을 강화할 수 있습니다.
- 병용 요법은 환자의 예후를 개선할 수 있습니다.
연구 목적
- PD-L1을 표적으로 하는 펩타이드 기반 백신을 개발한다.
- 항체 생성 유도에 있어 해당 백신의 효능을 평가한다.
- 항체 차단 활성을 측정하기 위한 신뢰할 수 있는 분석법을 구축한다.
사용된 방법
- PDL1-Vaxx 펩타이드 백신의 개발.
- 마이크로비드 분석법을 이용한 항-PD-L1 항체 테스트.
- 항체 테스트를 위한 재설계 프로토콜.
- 형광 강도 측정을 위한 유세포 분석.
주요 결과
- PDL1-Vaxx는 중화 항체를 성공적으로 유도하였습니다.
- 마이크로비드 분석을 통해 항체의 차단 능력을 입증하였습니다.
- 재설계된 프로토콜을 통해 테스트 정확도를 향상시켰습니다.
- 효능 강화를 위해 병용 요법이 탐색되고 있습니다.
결론
- PDL1-Vaxx는 암 백신으로서 가능성을 보여줍니다.
- 형광 비드 분석법은 항체 상호작용을 분석하는 데 효과적입니다.
- 병용 요법을 최적화하기 위한 추가 연구가 필요합니다.
자주 묻는 질문
산업적 관련성 요약
면역 관문 억제제는 면역 항암 요법의 핵심으로 남아 있으나, 환자마다 반응이 다양하게 나타나기 때문에 기전적으로 검증된 새로운 치료제에 대한 필요성이 대두되고 있습니다. PDL1-Vaxx로 유도된 항체 차단을 위한 이중 리포터 자성 비드 분석법은 발견 및 전임상 단계의 접점에서 면역 관문 억제 효과를 평가할 수 있는 정량적이고 재현 가능한 플랫폼을 제공합니다. 이 워크플로우는 항체 기능에 대한 예측 신뢰도를 높이며, 차세대 면역 요법의 포트폴리오 분류에 필요한 정보를 제공합니다.
바이오 제약 R&D에서의 전략적 응용
초기 발견 및 타겟 검증
- 항체 매개 PD-1/PD-L1 경로 차단을 직접적으로 분석할 수 있습니다.
- 기능적 항체 억제 정도를 정량화하여 기전적 리스크를 감소시킬 수 있습니다.
- 면역 관문 백신 후보 물질의 타겟 검증을 용이하게 합니다.
- 추가 개발을 위한 리드 항체 우선순위 선정에 필요한 데이터를 제공합니다.
스크리닝 및 분석법 개발
- PD-L1에 대한 항체 스크리닝을 위한 표준화된 정량 분석법을 제공합니다.
- 항체 후보군 전반에 걸쳐 차단 효능의 재현 가능한 측정을 가능하게 합니다.
- 면역 관문 억제제의 고처리량 스크리닝을 위한 확장성을 지원합니다.
- 후보 항체와 대조군의 상호 비교를 위한 강력한 데이터를 생성합니다.
중개 및 전임상 연구
- 중개 연구의 연속성을 위해 in vitro 차단 데이터와 전임상 효능 모델을 일치시킵니다.
- 백신 유도 항체의 동물 실험 진입에 있어 위험 조정된 추진을 지원합니다.
- 병용 면역 요법 전략을 수립하는 데 필요한 기전적 근거를 제공합니다.
- 질환 모델과 관련된 항체 기능의 정량적 평가를 가능하게 합니다.
파이프라인 및 워크플로 통합
이 이중 리포터 비드 분석법은 면역 관문 백신 프로그램의 초기 발견, 리드 물질 발굴 및 전임상 검증 단계를 연결합니다.
- 발견 생물학: PD-1/PD-L1의 항체 차단 능력을 정량화하여 가설 기반의 표적 검증을 지원합니다.
- 스크리닝: 항체 효능 평가를 위한 재현 가능하고 정량적인 판독값을 제공합니다.
- 분석: 후보 물질 간의 억제 백분율 및 결합 신호를 직접 비교할 수 있게 합니다.
- 중개 연구: in vitro 차단 효과를 전임상 모델의 in vivo 효능과 연결합니다.
- 기업 내 재사용: 다른 체크포인트 표적 및 항체 양상에도 적용 가능한 플랫폼 분석법을 구축합니다.
운영 및 기업 영향
- 과학적 가치: 항체 기능 및 표적 결합에 대한 예측 신뢰도를 높임.
- 운영적 가치: 재현성과 확장성을 위해 차단 평가를 표준화함.
- 전략적 가치: 체크포인트 백신 후보 물질 및 병용 요법의 진행 여부(go/no-go) 결정에 정보를 제공함.
- 포트폴리오 영향: 개발 추진을 위한 항체 리드 물질의 위험 조정 우선순위 선정을 가능하게 함.
실행 시 고려 사항
- 면역 분석법 개발 및 유세포 분석에 대한 전문 지식이 필요합니다.
- 이중 리포터 유세포 분석 장비 및 자성 비드 플랫폼의 사용 권한이 필요합니다.
- 분석 재현성을 위해 팀 간의 엄격한 표준화가 요구됩니다.
- 프로토콜 최적화를 통해 다양한 항체 소스 및 체크포인트 표적에 적용 가능합니다.
- 신뢰할 수 있는 해석을 위해 검증된 시약과 정량적 대조군이 필요합니다.
