Name: GMP 등급의 용해성 다공성 마이크로캐리어를 기반으로 한 대규모 셀 생산 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-07-07T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 44 s
Description: 배우세요 GMP 등급 용해성 다공성 마이크로캐리어를 활용한 대규모 부착세포 배양법입니다. 인간 중간엽줄기세포, HEK293T 및 Vero 세포를 검증하여 세포 및 유전자 치료 산업의 품질과 수량 요구를 충족합니다.

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이 연구는 미국 국립과학재단(National Science Foundation for Distinguished Young Scholars, 82125018)의 재정 지원을 받았습니다.

용해 가능한 마이크로캐리어를 기반으로 한 부착 세포의 폐쇄 시스템 생산

<ol><li>Golchin, A., Farahany, T. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+products%3A+Cellular+therapy+and+FDA+approved+products%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reviews+and+Reports%22%5BJournal%5D)">Biological products: Cellular therapy and FDA approved products.</a> Stem Cell Reviews and Reports. 15 (2), 166-175 (2019).</li>
<li>Young, C. M., Quinn, C., Trusheim, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Durable+cell+and+gene+therapy+potential+patient+and+financial+impact%3A+US+projections+of+product+approvals%2C+patients+treated%2C+and+product+revenues%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Discovery+Today%22%5BJournal%5D)">Durable cell and gene therapy potential patient and financial impact: US projections of product approvals, patients treated, and product revenues.</a> Drug Discovery Today. 27 (1), 17-30 (2022).</li>
<li>Elverum, K., Whitman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivering+cellular+and+gene+therapies+to+patients%3A+solutions+for+realizing+the+potential+of+the+next+generation+of+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Delivering cellular and gene therapies to patients: solutions for realizing the potential of the next generation of medicine.</a> Gene Therapy. 27 (12), 537-544 (2020).</li>
<li>Blache, U., Popp, G., Dünkel, A., Koehl, U., Fricke, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+solutions+for+manufacture+of+CAR+T+cells+in+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Potential solutions for manufacture of CAR T cells in cancer immunotherapy.</a> Nature Communications. 13 (1), 5225(2022).</li>
<li>Lee, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+culture+process+scale-up+challenges+for+commercial-scale+manufacturing+of+allogeneic+pluripotent+stem+cell+products%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Cell culture process scale-up challenges for commercial-scale manufacturing of allogeneic pluripotent stem cell products.</a> Bioengineering. 9 (3), 92(2022).</li>
<li>Emerson, J., Glassey, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioprocess+monitoring+and+control%3A+Challenges+in+cell+and+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Chemical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Bioprocess monitoring and control: Challenges in cell and gene therapy.</a> Current Opinion in Chemical Engineering. 34, 100722(2021).</li>
<li>Robb, K. P., Fitzgerald, J. C., Barry, F., Viswanathan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stromal+cell+therapy%3A+progress+in+manufacturing+and+assessments+of+potency%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotherapy%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stromal cell therapy: progress in manufacturing and assessments of potency.</a> Cytotherapy. 21 (3), 289-306 (2019).</li>
<li>Olsen, T. R., Ng, K. S., Lock, L. T., Ahsan, T., Rowley, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peak+MSC-Are+we+there+yet%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">Peak MSC-Are we there yet.</a> Frontiers in Medicine. 5, 178(2018).</li>
<li>Roots Analysis. Stem Cell Therapy Contract Manufacturing (CMO) Market, 2019 - 2030. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.rootsanalysis.com/reports/view_document/stem-cell-therapy-contract-manufacturing-market-2019-2030/271.html">https://www.rootsanalysis.com/reports/view_document/stem-cell-therapy-contract-manufacturing-market-2019-2030/271.html</a> (2019).</li>
<li>Elseberg, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microcarrier-based+expansion+process+for+hMSCs+with+high+vitality+and+undifferentiated+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22The+International+Journal+of+Artificial+Organs%22%5BJournal%5D)">Microcarrier-based expansion process for hMSCs with high vitality and undifferentiated characteristics.</a> The International Journal of Artificial Organs. 35 (2), 93-107 (2012).</li>
<li>de Soure, A. M., Fernandes-Platzgummer, A., Silva, da, L, C., Cabral, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scalable+microcarrier-based+manufacturing+of+mesenchymal+stem%2Fstromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Scalable microcarrier-based manufacturing of mesenchymal stem/stromal cells.</a> Journal of Biotechnology. 236, 88-109 (2016).</li>
<li>Rafiq, Q. A., Coopman, K., Nienow, A. W., Hewitt, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+microcarrier+screening+and+agitated+culture+conditions+improves+human+mesenchymal+stem+cell+yield+in+bioreactors%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Journal%22%5BJournal%5D)">Systematic microcarrier screening and agitated culture conditions improves human mesenchymal stem cell yield in bioreactors.</a> Biotechnology Journal. 11 (4), 473-486 (2016).</li>
<li>Tavassoli, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+production+of+stem+cells+utilizing+microcarriers%3A+A+biomaterials+engineering+perspective+from+academic+research+to+commercialized+products%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Large-scale production of stem cells utilizing microcarriers: A biomaterials engineering perspective from academic research to commercialized products.</a> Biomaterials. 181, 333-346 (2018).</li>
<li>Mizukami, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technologies+for+large-scale+umbilical+cord-derived+MSC+expansion%3A+Experimental+performance+and+cost+of+goods+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Engineering+Journal%22%5BJournal%5D)">Technologies for large-scale umbilical cord-derived MSC expansion: Experimental performance and cost of goods analysis.</a> Biochemical Engineering Journal. 135, 36-48 (2018).</li>
<li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dispersible+and+dissolvable+porous+microcarrier+tablets+enable+efficient+large-scale+human+mesenchymal+stem+cell+expansion%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering.+Part+C%2C+Methods%22%5BJournal%5D)">Dispersible and dissolvable porous microcarrier tablets enable efficient large-scale human mesenchymal stem cell expansion.</a> Tissue Engineering. Part C, Methods. 26 (5), 263-275 (2020).</li>
<li>Carletti, E., Motta, A., Migliaresi, C. Scaffolds for tissue engineering and 3D cell culture. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCarletti%2C+E+%223D+Cell+Culture%3A+Methods+and+Protocols%22">3D Cell Culture: Methods and Protocols</a>. Haycock, J. W. , Humana Press. Totowa, NJ. 17-39 (2011).</li>
<li>Loh, Q. L., Choong, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+scaffolds+for+tissue+engineering+applications%3A+Role+of+porosity+and+pore+size%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering.+Part+B+Reviews%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional scaffolds for tissue engineering applications: Role of porosity and pore size.</a> Tissue Engineering. Part B Reviews. 19 (6), 485-502 (2013).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GMP-grade+microcarrier+and+automated+closed+industrial+scale+cell+production+platform+for+culture+of+MSCs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Tissue+Engineering+and+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">GMP-grade microcarrier and automated closed industrial scale cell production platform for culture of MSCs.</a> Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 16 (10), 934-944 (2022).</li>
<li>NMPA. Pharmaceutical Excipient Registration Database: Microcarrier tablets for cells. Center for Drug Evaluation. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.cde.org.cn/main/xxgk/listpage/ba7aed094c29ae314670a3563a716e">https://www.cde.org.cn/main/xxgk/listpage/ba7aed094c29ae314670a3563a716e</a> (2023).</li>
<li>List of Drug Master Files (DMFs). US Food and Drug Administration. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.fda.gov/drug-mater-files-dmfs/list-drug-master-files-dmfs">https://www.fda.gov/drug-mater-files-dmfs/list-drug-master-files-dmfs</a> (2023).</li>
<li>Beeravolu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+characterization+of+mesenchymal+stromal+cells+from+human+umbilical+cord+and+fetal+placenta%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Isolation and characterization of mesenchymal stromal cells from human umbilical cord and fetal placenta.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55224(2017).</li>
<li>Xie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+quality+evaluation+system+establishment+of+mesenchymal+stromal+cells+for+cell-based+therapy+products%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">The quality evaluation system establishment of mesenchymal stromal cells for cell-based therapy products.</a> Stem Cell Research & Therapy. 11 (1), 176(2020).</li>
<li>Maillot, C., Sion, C., De Isla, N., Toye, D., Olmos, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quality+by+design+to+define+critical+process+parameters+for+mesenchymal+stem+cell+expansion%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Advances%22%5BJournal%5D)">Quality by design to define critical process parameters for mesenchymal stem cell expansion.</a> Biotechnology Advances. 50, 107765(2021).</li>
<li>Silva Couto, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+of+human+mesenchymal+stem%2Fstromal+cells+%28hMSCs%29+in+bioreactors+using+microcarriers%3A+Lessons+learnt+and+what+the+future+holds%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Advances%22%5BJournal%5D)">Expansion of human mesenchymal stem/stromal cells (hMSCs) in bioreactors using microcarriers: Lessons learnt and what the future holds.</a> Biotechnology Advances. 45, 107636(2020).</li>
<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facile+bead-to-bead+cell-transfer+method+for+serial+subculture+and+large-scale+expansion+of+human+mesenchymal+stem+cells+in+bioreactors%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Facile bead-to-bead cell-transfer method for serial subculture and large-scale expansion of human mesenchymal stem cells in bioreactors.</a> Stem Cells Translational Medicine. 10 (9), 1329-1342 (2021).</li>
<li>Tsai, A. C., Pacak, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioprocessing+of+human+mesenchymal+stem+cells%3A+From+planar+culture+to+microcarrier-based+bioreactors%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Bioprocessing of human mesenchymal stem cells: From planar culture to microcarrier-based bioreactors.</a> Bioengineering. 8 (7), 96(2021).</li>
<li>Hewitt, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+of+human+mesenchymal+stem+cells+on+microcarriers%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Letters%22%5BJournal%5D)">Expansion of human mesenchymal stem cells on microcarriers.</a> Biotechnology Letters. 33 (11), 2325-2335 (2011).</li>
<li>Mawji, I., Roberts, E. L., Dang, T., Abraham, B., Kallos, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+and+opportunities+in+downstream+separation+processes+for+mesenchymal+stromal+cells+cultured+in+microcarrier-based+stirred+suspension+bioreactors%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Challenges and opportunities in downstream separation processes for mesenchymal stromal cells cultured in microcarrier-based stirred suspension bioreactors.</a> Biotechnology and Bioengineering. 119 (11), 3062-3078 (2022).</li>
<li>Schirmaier, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scale-up+of+adipose+tissue-derived+mesenchymal+stem+cell+production+in+stirred+single-use+bioreactors+under+low-serum+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Engineering+in+Life+Sciences%22%5BJournal%5D)">Scale-up of adipose tissue-derived mesenchymal stem cell production in stirred single-use bioreactors under low-serum conditions.</a> Engineering in Life Sciences. 14 (3), 292-303 (2014).</li>
<li>Lawson, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Process+development+for+expansion+of+human+mesenchymal+stromal+cells+in+a+50L+single-use+stirred+tank+bioreactor%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Engineering+Journal%22%5BJournal%5D)">Process development for expansion of human mesenchymal stromal cells in a 50L single-use stirred tank bioreactor.</a> Biochemical Engineering Journal. 120, 49-62 (2017).</li>
<li>Yang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+microcarrier+culture+of+HEK293T+cells+and+Vero+cells+in+single-use+bioreactors%5BTitle%5D)+AND+%22AMB+Express%22%5BJournal%5D)">Large-scale microcarrier culture of HEK293T cells and Vero cells in single-use bioreactors.</a> AMB Express. 9 (1), 70(2019).</li>
<li>Fang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+scalable+vaccinia+virus-based+vector+production+process+using+dissolvable+porous+microcarriers%5BTitle%5D)+AND+%2225th+Annual+Meeting+of+the+American+Society+of+Gene+%26+Cell+Therapy.+Molecular+Therapy%22%5BJournal%5D)">Development of scalable vaccinia virus-based vector production process using dissolvable porous microcarriers.</a> 25th Annual Meeting of the American Society of Gene & Cell Therapy. Molecular Therapy. 30, 195-196 (2022).</li>
</ol>

Y.D.는 과학 고문이며, H.X., Y.Z., L.G., M.L., Y.Y., W.L. 및 X.Y.는 Beijing CytoNiche Biotechnology Co. Ltd.의 직원입니다. 다른 저자는 이 문서에 설명된 제품이나 회사에 대해 상업적, 독점적 또는 재정적 이해관계가 없습니다. 다른 모든 저자는 경쟁 이익이 없음을 선언합니다.

면역 요법과 줄기 세포 요법 모두 살아있는 세포를 약물로 사용합니다. 그러나 최종 제품은 저분자 또는 바이러스와 같은 방식으로 정제하거나 멸균해서는 안 됩니다. 그러므로, QbD(Quality by Design)의 원칙은 항상 염두에 두어야 하며, 셀 생산 중 화학 제조 및 제어(CMC) 공정에 실질적으로 적용되어야 한다23. 완전 폐쇄형 세포 배양 시스템, 처리 시스템 및 충전 시스템은 요구 사항을 충족하는 것으로 우선적으로 고려됩니다. 이 연구에서는 GMP 등급, 용해성 및 다공성 3D 마이크로캐리어를 기반으로 하는 ACISCP 플랫폼을 활용하여 hMSC의 2계층 확장을 수행하기 위한 프로토콜을 제시했습니다. 일부 연구자들은 시험관 내에서 hMSC를 확장하기 위해 마이크로캐리어와 함께 바이오리액터를 사용하는 타당성을 탐구했지만, 보고된 연구의 대다수는 규모가 증가하면 hMSC 수율이 감소하여 100mL의 작업 부피에서 6.1 x 10 5 cells/mL 또는 12.5...

CGT 산업은 지난 20년 동안 기하급수적으로 확장되었습니다. 차세대 의약품의 발전은 수많은 난치성 질환을 치료하고 완치할 것으로 예상됩니다1. 2017년 미국 식품의약국(FDA)이 CGT 제품인 킴리아(Kymriah)를 최초로 승인한 이후, 전 세계적으로 CGT 관련 연구 개발은 빠른 속도로 계속 성장하고 있으며, FDA는 CGT에 대한 활발한 임상시험용 신약 신청이 2018년에 500건으로 증가했다고 밝혔다2. 2030년까지 미국에서 CGT 제품의 승인 건수는 54-74건이 될 것으로 예측되었다2.
CGT 연구 및 혁신의 급속한 성장은 흥미진진하지만, 저렴한 비용으로 필요한 만큼 많은 환자에게 도달할 수 있는 유망한 의약품을 제공할 수 있는 실험실 연구와 산업 규모 제조 사이에는 여전히 큰 기술 격차가 있습니다. 이러한 임상시험에 채택된 현재 공정은 소규모 실험을 위해 실험실에서 확립되었으며, CGT 제조를 개선하고 혁신하기 위해서는 상당한 노력이 필요하다3. CGT 제품에는 여러 유형이 있으며, 대부분은 동종 세포, 자가 세포, 엔지니어링 또는 천연 세포를 기반으로 합니다. 이러한 살아있는 약물은 저분자 개체나 생물학적 제제보다 훨씬 더 복잡하기 때문에 대규모 제조는 중요한 과제입니다 4,5,6. 이 연구에서는 CGT에 널리 적용되는 3개의 앵커리지 의존성 세포에 대한 대규모 세포 생산 프로토콜을 시연합니다. 여기에는 세포 기반 치료에 사용되어 온 인간 중간엽 줄기/기질 세포(hMSC)와 최종 치료 세포 산물의 유전 공학을 위한 바이러스 생산에 사용되는 HEK293T 세포 및 Vero 세포가 포함됩니다. 앵커리지 의존성 세포는 일반적으로 수동 처리가 필요한 평면 시스템에서 배양됩니다. 그러나 수동 배양 방법은 상당한 노동력이 필요하고 오염되기 쉬워 최종 제품의 품질을 저하시킬 수 있습니다. 또한 인라인 공정 제어가 없어 배치 간에 상당한 품질 변동이 발생합니다7. 줄기세포 치료제를 예로 들면, 200개 이상의 줄기세포 치료제 후보 물질로 구성된 유망한 파이프라인을 통해 임상 응용 분야의 수요를 충족하려면 연간 300조 개의 hMSC가 필요할 것으로 추정됩니다8. 따라서, 치료용 세포의 대규모 제조는 이러한 높은 세포 요구량으로 이러한 치료적 개입을 수행하기 위한 전제조건이 되었다9.
평면 시스템의 차질을 배제하기 위해, 종래의 비용해성 마이크로캐리어(10,11,12,13)를 사용하여 교반 탱크 바이오리액터에서 대규모 제조 공정을 개발하기 위한 노력이 이루어졌지만, 이들은 복잡한 준비 절차와 낮은 세포 수확 효율 14로 어려움을 겪고 있다 . 최근에, 우리는 줄기세포 확장을 위한 용해성 마이크로캐리어를 혁신하였는데, 이는 종래의 비용해성 상용 마이크로캐리어(15)로부터의 세포 수확의 문제를 회피하는 것을 목표로 한다. 이 새로운 상용 GMP 등급 3D 용해성 다공성 마이크로 캐리어인 3D TableTrix는 대규모 셀 생산에 대한 큰 잠재력을 보여주었습니다. 실제로, 이러한 다공성 마이크로캐리어를 기반으로 한 3D 배양은 세포 부착, 증식, 이동 및 활성화를 촉진하기 위해 유리한 생체 모방 미세환경을 잠재적으로 재현할 수 있습니다16. 마이크로캐리어의 다공성 구조 및 상호 연결된 공극 네트워크는 더 큰 세포 접착 영역을 생성하고 산소, 영양소 및 대사 산물의 교환을 촉진하여 시험관 내 세포 확장을 위한 최적의 기질을 생성할 수 있다17. 이러한 GMP 등급 3D 용해성 다공성 마이크로캐리어의 높은 다공성은 hMSC의 대규모 팽창을 가능하게 하고, 세포가 완전히 용해될 수 있는 능력은 이러한 팽창된 세포의 효율적인 수확을 가능하게 한다18. 또한 GMP 등급 제품이며 중국 약물 평가 센터(출원 번호: F20210000003 및 F20200000496)19 및 미국 FDA(FDA, USA; 약물 마스터 파일 번호: 35481)20.
여기에서, 우리는 hMSC, HEK293T 셀 및 Vero 셀 증식을 위해 이들 분산성 및 용해성 다공성 마이크로캐리어를 사용하는 자동화된 폐쇄형 산업 규모 셀 생산(ACISCP) 시스템(18)을 예시한다. 당사는 5L 바이오리액터에서 15L 바이오리액터로 hMSC의 2단계 확장(9일 동안 누적 128배 팽창)을 성공적으로 달성했으며, 최종적으로 단일 생산 배치에서 최대 1.1 x 1010 hMSC를 얻었습니다. 세포는 마이크로캐리어를 완전히 용해시켜 수거하고, 농축하고, 세척하고, 연속흐름 원심분리기 기반 세포 처리 시스템으로 제형화한 후, 세포 충전 시스템으로 분주하였다. 또한 hMSC 제품의 품질을 평가하여 규정 준수를 확인했습니다. 또한 CGT 산업에서 광범위하게 적용되는 두 가지 다른 유형의 앵커리지 셀인 HEK293T 셀과 Vero 셀의 스케일 업 생산을 위한 이러한 용해성 마이크로캐리어의 적용을 시연했습니다. HEK293T 세포의 피크 세포 밀도는 1.68 x 10 7 cells/mL에 도달한 반면, Vero 세포의 피크 밀도는 1.08 x 107 cells/mL에 도달했습니다. ACISCP 시스템은 다양한 부착 세포를 배양하는 데 적용할 수 있으며, CGT의 산업화를 가속화하는 데 기여하는 강력한 플랫폼이 될 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>0.25% 트립신 EDTA</td><td>BasalMedia</td><td>S310JV</td><td>는 2D 세포 수확에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix Digest</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>R001-500</td><td>이것은 3D TableTrix 마이크로캐리어를 특이적으로 용해시키는 시약입니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix MSC 무혈청 배지</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>RMZ112</td><td>2D 평면 배양에서 중간엽 줄기 세포 확장 및 유지 및 3D TableTrix 마이크로캐리어에서 3D 배양을 위한 무혈청, 무동물 배지입니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix 일회용 여과 모듈</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>R020-00-10</td><td>이 모듈에는 0.22 &mu; M 캡슐 필터는 배양 배지 및 소화 용액의 여과에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix 일회용 보관 백(10L)</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>R020-00-03</td><td>5L 생물반응기용 사료 백으로 사용됩니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix 일회용 보관 백(3L)</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>R020-00-01</td><td>세포 파종 또는 전사 백으로 사용됩니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix 일회용 보관 백(50L)</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>R020-00-04</td><td>15L 생물반응기용 사료 백으로 사용됩니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix vivaPACK 일회용 채우기 및 마감 소모품 키트</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>PACK-01-01</td><td>이것은 3D vivaPACK 충전 및 마감 시스템에 적합한 표준 키트입니다.</td></tr><tr><td>세포용 3D FloTrix vivaPACK 충진 및 마감 시스템</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>vivaPACK</td><td>이 시스템은 자동 혼합 및 가스 배기 기능을 갖춘 폐쇄형 액체 처리 장치입니다. 동결 보존 버퍼에 재현탁된 세포는 배치당 20개의 백으로 빠르고 균일하게 분주될 수 있습니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix vivaPREP PLUS 세포 처리 시스템</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>vivaPREP PLUS</td><td>이 시스템은 연속 흐름 원심분리기 기반 장치입니다. 세포는 완전히 폐쇄된 절차로 농축, 세척 및 재현탁할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix vivaPREP PLUS 일회용 세포 처리 키트</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>PREP-PLUS-00</td><td>3D vivaPREP PLUS 세포 처리에 적합한 표준 키트입니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix vivaSPIN&nbsp; 생물반응기 15 L</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>FTVS15</td><td>이 생물반응기 제품은 컨트롤러, 15 L 유리 교반 탱크 용기 및 평가를 사용합니다. 특수 관류 튜브를 사용할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix vivaSPIN&nbsp; 생물반응기 5 L</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>FTVS05</td><td>이 생물반응기 제품은 컨트롤러, 5 L 유리 교반 탱크 용기 및 평가를 사용합니다. 특수 관류 튜브를 사용할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix vivaSPIN 폐쇄 시스템 소모품 팩(10/15L)</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>R020-10-10</td><td>샘플링 백이 포함된 3D vivaSPIN 생물반응기 15 L에 적합한 표준 튜빙 키트입니다.</td></tr><tr><td>3D FloTrix vivaSPIN 폐쇄 시스템 소모품 팩(2/5L)</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>R020-05-10</td><td>샘플링 백이 포함된 3D vivaSPIN 바이오리액터 5 L에 적합한 표준 튜빙 키트입니다.</td></tr><tr><td>3D TableTrix 마이크로캐리어 G02</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>G02-10-10g</td><td>이 다공성 및 분해성 마이크로캐리어는 HEK293T세포 배양에 적합합니다. 생물 반응기의 튜브에 용접하기 위해 C-Flex 튜브와 함께 10g/병으로 사전 멸균 상태로 제공됩니다.</td></tr><tr><td>3D TableTrix 마이크로캐리어 V01</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>V01-100-10g</td><td>이 다공성 및 분해성 마이크로캐리어는 부착성 세포 배양에 적합하며, 사용하기 전에 PBS에서 고압멸균해야 하는 비멸균 마이크로캐리어로 제공됩니다. 특히 백신 생산에 적합합니다.</td></tr><tr><td>3D TableTrix 마이크로캐리어 W01</td><td>CytoNiche Biotech</td><td>W01-10-10g(일회용 패키징); W01-200 (정제)</td><td>이 다공성 및 분해성 마이크로캐리어는 부착성 세포 배양, 특히 최종 산물로 수확해야 하는 세포에 적합합니다. 생물 반응기의 튜브에 용접하기 위해 C-Flex 튜브와 함께 10g/병으로 사전 멸균 상태로 제공됩니다. 이 제품은 CDE로부터 제약 부형제에 대한 2가지 자격을 획득했으며 등록 번호는 [F20200000496; F20210000003]입니다. 또한 FDA로부터 제약 부형제에 대한 DMF 자격을 받았으며 등록 번호 [DMF:35481]</td></tr><tr><td>APC anti-human CD45 Antibody</td><td>BioLegend</td><td>368512</td><td>MSC 동일성 평가를 위한 유세포 분석에 사용</td></tr><tr><td>Calcein-AM/PI 이중 염색 키트</td><td>Dojindo</td><td>C542</td><td>Calcein-AM/PI Double Staining Kit는 생존 세포와 죽은 세포의 동시 형광 염색에 사용됩니다. 이 키트에는 생존 세포와 사멸 세포를 각각 염색하는 Calcein-AM 및 Propidium Iodide(PI) 용액이 포함되어 있습니다.</td></tr><tr><td>EZ Top 용기 마개용 캡 NALGENE-containers(500mL)</td><td>Saint-Gobain</td><td>CAP-38</td><td>브랜드 및 카탈로그 번호는 예를 들어 다양한 공급업체에서 유사한 제품을 구입할 수 있으며 동일한 기능을 제공하는 한 다른 브랜드로 대체할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>C-Flex 튜빙, 제형 374 (0.25 in x 0.44 in)</td> <td>Saint-Gobain</td><td>374-250-3</td><td>튜브 용접 및 분리에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>CryoMACS 냉동 백 50</td><td>Miltenyi Biotec&nbsp;</td><td>200-074-400</td><td>3D FloTrix vivaPACK 일회용 채우기 확장에 사용됩니다. 마감 소모품 키트.</td></tr><tr><td>디메틸 설페이트 (DMSO)&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>D2650-100mL</td><td>동결 보존 용액의 제조에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)</td><td>BasalMedia</td><td>L120KJ</td><td>HEK293T 및 Vero 세포의 배양에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>DURAN Original GL 45 Laboratory bottle (2 L)</td><td>DWK 생명 과학</td><td>218016357</td><td>5 L 생물 반응기에서 폐기물을 수거하는 데 사용됩니다.</td></tr><tr><td>DURAN Original GL 45 Laboratory bottle (5 L)</td><td>DWK 생명 과학</td><td>218017353</td><td>15 L 생물 반응기에서 폐기물을 수거하는 데 사용됩니다.</td></tr><tr><td>DURAN Original GL 45 Laboratory bottle (500 mL)</td><td>DWK 생명 과학</td><td>218014459</td><td>0.1 M NaOH의 보조 병에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>NALGENE-containers(500mL)용 EZ Top Container ClosuresSaint-Gobain</td><td></td> <td>EZ500 ML-38-2</td><td>브랜드 및 카탈로그 번호는 예를 들어 다양한 공급업체에서 유사한 제품을 구입할 수 있으며 동일한 기능을 제공하는 한 다른 브랜드로 대체할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>소태아혈청(FBS) 우수한 품질의</td><td>Wisent</td><td>086-150</td><td>HEK293T세포 배양에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>FITC anti-human CD14 Antibody</td><td>BioLegend</td><td>301804</td><td>MSC 동정 평가를 위한 유세포 분석에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>FITC anti-human CD34 Antibody</td><td>BioLegend</td><td>343504</td><td>MSC 동정 평가를 위한 유세포 분석에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>FITC anti-human CD90 (Thy1) 항체</td><td>BioLegend</td><td>328108</td><td>MSC 동정 평가를 위한 유세포 분석에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>유세포 분석</td><td>Beckman Coulter</td><td>CytoFLEX</td><td>세포 식별 평가에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>형광 세포 분석기</td><td>Alit 생명 과학</td><td>Countstar Rigel S2</td><td>세포 계수에 사용됩니다. 세포 생존율은 AO/PI 염료로 염색하여 계산할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>GL 45 멀티포트 커넥터 스크류 캡, 2 포트&nbsp;</td><td>DWK 생명 과학</td><td>292632806</td><td>브랜드 및 카탈로그 번호는 예를 들어 다양한 공급 업체에서 유사한 제품을 구입할 수 있으며 동일한 기능을 가진 한 다른 브랜드로 대체 될 수 있습니다.</td></tr><tr><td>혈당 측정기</td><td>Sinocare</td><td>6243578</td><td>세포 배양 배지 및 상등액에서 포도당 농도를 감지하는 데 사용됩니다.</td></tr><tr><td>칼슘과 마그네슘이 함유된 Hank's Balanced Salt Solution(HBSS)</td><td>Gibco</td><td>14025092</td><td>소화 용액 준비에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>인간 알부민 20% Behring (HSA)</td><td>CSL Behring</td><td>N/A</td><td>세척 완충액의 준비를 위해 사용하는.</td></tr><tr><td>도립 형광 현미경</td><td>OLYMBUS</td><td>CKX53SF</td><td>brifgt 필드 및 형광 관찰 및 이미징에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>Nalgene 측정 실린더 (500 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>3662-0500PK</td><td>연동 펌프의 액체 처리 체적 속도를 교정하는 데 사용됩니다.</td></tr><tr><td>신생아 송아지 혈청(NBS) 초미세</td><td>MINHAI BIO</td><td>SC101.02</td><td>Vero 세포의 배양에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>OriCell 인간 중간엽 줄기세포 지방생성 분화 및 특성화 키트</td><td>Cyagen</td><td>HUXUC-90031</td><td>hUCMSC의 삼중 계통 분화에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>OriCell 인간 중간엽 줄기 세포 연골 형성 분화 및 특성화 키트</td><td>Cyagen</td><td>HUXUC-90041</td><td>hUCMSC의 삼중 계통 분화에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>OriCell 인간 중간엽 줄기세포 골형성 분화 및 특성화 키트</td><td>Cyagen</td><td>HUXUC-90021</td><td>hUCMSC의 삼중 계통 분화에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>PE anti-human CD105 Antibody</td><td>BioLegend</td><td>800504</td><td>MSC 동일성 평가를 위한 유세포 분석에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>PE anti-human CD19 Antibody</td><td>BioLegend</td><td>302208</td><td>MSC 동정 평가를 위한 유세포 분석에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>PE anti-human CD73 (Ecto-5'-nucleotidase) 항체</td><td>BioLegend</td><td>344004</td><td>MSC 동일성 평가를 위한 유세포 분석에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>PE anti-human HLA-DR 항체</td><td>BioLegend</td><td>307605</td><td>MSC 동일성 평가를 위한 유세포 분석에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수(PBS)</td><td>Wisent</td><td>311-010-CL</td><td>유리 용기 및 V01 마이크로캐리어의 오토클레이빙 및 배양 배지 교체에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>Sani-Tech 플래티넘 경화 위생 실리콘 튜빙 (0.13 인치 x 0.25 인치)</td> <td>Saint-Gobain</td><td>ULTRA-C-125-2F</td><td>연동 펌프로 구동되는 용액 전송에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>멸균 식염수</td><td>Hopebiol</td><td>HBPP008-500</td><td>세척 완충액 제조에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>Trypzyme 재조합 Trypsin</td><td>BasalMedia</td><td>S342JV</td><td>이 시약은 HEK293T 및 Vero 세포의 bead-to-bead 전달에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>튜브 실러</td><td>Yingqi Biotech</td><td>Tube Sealer I</td><td>이 실러는 C-Flex 튜빙 및 PVC 튜빙과 모두 호환됩니다.</td></tr><tr><td>PVC 튜빙 용 튜브 용접기</td><td>Chu Biotech</td><td>Tube Welder Micro</td><td>PVC 튜브 용접에 사용했습니다.</td></tr><tr><td>TPE 튜빙용 튜브 용접기</td><td>Yingqi Biotech</td><td>튜브 용접기 I-V2</td><td>TPE 튜빙 용접에 사용됩니다.</td></tr><tr><td>ViaStain AO / PI Viability Stains</td><td>Nexcelom</td><td>CS2-0106-25mL</td><td>이중 형광 생존도는 아크리딘 오렌지(AO) 및 프로피듐 요오드화물(PI)을 사용하여 PBMC와 같은 일차 세포 및 파편이 포함된 샘플의 줄기 세포의 정확한 생존도 분석에 권장되는 방법입니다.</td></tr></tbody></table>

gmp 등급의 용해성 다공성 마이크로캐리어를 기반으로 한 대규모 셀 생산

Large-Scale Cell Production Based on GMP-Grade Dissolvable Porous Microcarriers

세포 및 유전자 치료(CGT) 산업의 연구자들은 세포의 효율적이고 대규모적인 확장이라는 만만치 않은 과제에 오랫동안 직면해 왔습니다. 2차원(2D) 평면 배양 시스템의 주요 단점을 해결하기 위해 인간 중간엽 줄기/기질 세포(hMSC), HEK293T 세포 및 Vero 세포를 포함한 부착 세포의 3D 배양을 위한 GMP 등급의 용해성 다공성 마이크로캐리어를 기반으로 하는 자동 폐쇄형 산업 규모 세포 생산(ACISCP) 플랫폼을 혁신적으로 개발했습니다. 대규모 확장을 달성하기 위해 5L 및 15L 교반 탱크 바이오리액터로 2단계 확장을 수행하여 9일 이내에 전체 128배 팽창으로 1.1 x 1010 hMSC를 생산했습니다. 세포는 마이크로캐리어를 완전히 용해시켜 수거하고, 농축하고, 세척하고, 연속 흐름 원심분리기 기반 세포 처리 시스템으로 제형화한 다음, 세포 충전 시스템으로 분주하였다. 2D 평면 배양과 비교했을 때, 3D 배양에서 채취한 hMSC의 품질에는 큰 차이가 없습니다. 우리는 또한 이러한 용해성 다공성 마이크로캐리어를 CGT 부문의 다른 인기 있는 세포 유형에도 적용했습니다. 구체적으로, HEK293T 세포 및 Vero 세포는 각각 1.68 x 10 7 cells/mL 및 1.08 x 107 cells/mL의 피크 세포 밀도로 배양되었습니다. 이 연구는 부착 세포의 산업 규모 제조를 달성하기 위해 GMP 등급 용해성 마이크로캐리어 및 고급 폐쇄 장비의 특성을 활용하는 바이오프로세스 엔지니어링 플랫폼을 사용하기 위한 프로토콜을 제공합니다.

ACISCP 플랫폼은 확장 확장을 위한 일련의 교반 탱크 바이오리액터, 자동화된 세포 수확 및 제형을 위한 세포 처리 시스템, 세포 주입 시스템을 사용하는 완전 폐쇄형 시스템입니다(그림 1). 부착 세포는 다공성 마이크로 캐리어에 부착되어 생물 반응기로 분산될 수 있으므로 부착 세포의 부유 배양을 달성할 수 있습니다.
설명된 프로토콜에 따라, 10g의 W01 마이크로캐리어가 포함된 2.5 x 108 hMSC를 초기 팽창을 위해 5L 교반 탱크 바이오리액터에 먼저 접종했습니다. 약 2.9 x 10 9 세포를 농축하여 4일째에 세포 처리 시스템에 의해 세척하고, 그 중 1.0 x 109 수거된 세포를 2단계 배양을 위해 40g의 W01 마이크로캐리어와 함께 15L 교반 탱크 바이오리액터로 통과시켰다. 최종적으로 1.1 x 10 10 MSC를 수확하여 제형화한 후 9일째에<...

여기에서는 GMP 등급의 용해성 마이크로캐리어를 기반으로 하는 완전 폐쇄형 시스템을 통해 부착 세포의 대규모 제조를 달성하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 인간 중간엽 줄기 세포, HEK293T 세포 및 Vero 세포의 배양은 검증되었으며 세포 및 유전자 치료 산업의 수량 요구와 품질 기준을 모두 충족했습니다.

GMP 등급의 용해성 다공성 마이크로캐리어를 기반으로 한 대규모 셀 생산

Researchers in the cell and gene therapy (CGT) industry have long faced a formidable challenge in the efficient and large-scale expansion of cells. To ...

세포 및 유전자 치료 산업은 지난 20년 동안 기하급수적으로 확장되었습니다. 그러나 실험실 연구와 산업 기술 제조 사이에는 큰 기술적 격차가 존재합니다. 규제 정책을 준수하고 CGT 산업의 친환경 요구를 충족하기 위해 세포 치료제를 생산하기 위해 자동 폐쇄 시스템이 채택되었습니다.부착 세포의 경우, 확장 가능한 교반 탱크 바이오리액터에서 마이크로캐리어를 사용하여 배양하는 것이 유망한 방법입니다. 종래, 상용화된 마이크로캐리어는 바람직하지 않다. 트립신화를 사용한 세포 수확과 크기에 따른 마이크로캐리어 저장은 비효율적이고 까다로울 뿐만 아니라 세포 품질에 영향을 미치고 안전 문제를 야기합니다.이 연구에서 우리는 자동화된 폐쇄형 시스템에서 GMP 등급 3D TableTrix 용해성 마이크로캐리어를 기반으로 대규모 셀 생산을 성공적으로 달성했습니다. 110억 개 이상의 인간 중간엽 줄기세포가 9일 이내에 2단계 증식으로 수율되었습니다. 또한 HEK293T 세포와 Vero 세포의 고밀도 배양을 시연했는데, 두 세포 모두 밀리리터당 1,000만 개 이상의 세포에 도달했습니다.이 고급 바이오 제조 플랫폼을 사용하면 부착 세포를 효과적으로 확장하고 자동화되고 폐쇄된 방식으로 완전히 수확할 수 있습니다. 당사의 프로토콜은 CGT 제품의 산업 규모 제조에서 생산 효율성을 높이고 품질 관리를 개선할 수 있는 기회를 제공합니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

세포 및 입자의 관성 주문과 monodisperse 드롭 생성을 결합하여, 우리는 kHz에서 속도에서 한 방울의 세포 또는 입자의 원하는 숫자를 캡슐하는 방법을 설명합니다. 우리는 두 번 단일 및 이중 입자 술을 정렬되지 않은 캡슐 분들을 초과 효율성을 보여줍니다.

높은 처리량 마이크로 캡슐 단일 셀 및 다중 셀

조직 특이 적 세포 외 기질 (ECM)는 세포 기능의 중요한 매개체이다. 이 문서에서는 순수 ECM 파생 폼 및 체외 세포 배양 모델에서 고급 3D 애플리케이션 또는 프로 재생 bioscaffolds 화학적 가교 결합을위한 필요없이 문화에 안정 마이크로을 합성하는 방법을 설명합니다.

조직 특이 적 세포 배양 및 전달 플랫폼과 같은 세포 외 기질 유래 거품과 마이크로 담체의 제조

우리는 macroporous microcarriers에 셀 확장 프로토콜 및 decellularized 조직 매트릭스를 시드하 관류 생물에서 배달 시스템으로 그들의 사용을 제안 합니다. 우리는 또한 세포 증식 및 microcarriers에 경작 하는 세포의 생존 능력을 결정 하기 위해 다른 기술을 포함 합니다. 또한, 생물 반응 기 배양 후 세포의 기능을 설명합니다.

재조합 콜라겐 나 세포 확장과 생물에 셀 납품 시스템으로 그들의 잠재적인 사용에 대 한 펩 티 드 Microcarriers 모델

여기에서는 3D 바이오리액터를 이용하여 활액 중간엽 줄기세포로부터 다수의 GMP급 엑소좀을 생산하는 프로토콜을 제시합니다.

3D 생물반응기 배양에 의한 활액 중간엽 줄기세포 유래 엑소좀의 대규모 제조

하이드로겔 마이크로캐리어의 시공을 가능하게 하는 점성 관성력을 번갈아 가며 구동되는 온화한 3D 프린팅 기술이 여기에 제시되어 있다. 수제 노즐은 유연성을 제공하므로 다양한 재료와 직경을 쉽게 대체할 수 있습니다. 직경 50-500 μm의 세포 결합 마이크로 캐리어는 추가 배양을 위해 얻어서 수집할 수 있습니다.

점성-관성 포스 제팅을 번갈아 가며 생체외 하이드로겔 마이크로캐리어의 3D 프린팅

본 프로토콜은 단일 에멀젼 제형 기반 facile 미세 유체 기술을 통해 폴리 (락틱-코-글리콜 산) 기반 고도로 개방 된 다공성 미세 구체 (HOPM)의 제조를 설명합니다. 이 마이크로스피어는 조직 공학 및 약물 스크리닝에 잠재적으로 응용될 수 있습니다.

미세유체 기술을 통한 고도로 개방된 다공성 마이크로스피어(HOPM) 제작

이 연구는 새로운 κ-carrageenan 서브 마이크로겔 현탁액 수조를 소개하여 놀라운 가역적 재밍-언재밍 전이 특성을 보여줍니다. 이러한 특성은 임베디드 3D 바이오프린팅에서 생체 모방 조직 및 장기를 구성하는 데 기여합니다. 고해상도와 세포 성장으로 심장/식도 유사 조직의 성공적인 프린팅은 고품질 바이오프린팅 및 조직 공학 응용 분야를 보여줍니다.

κ-Carrageenan Sub-Microgel Medium을 사용한 조직 유사 구조의 임베디드 바이오프린팅

고정 의존 세포의 마이크로캐리어-미생물반응기 생성에 관한 프로토콜이 잠재적인 세포 기반 치료법으로 설명되어 있습니다. 급성 호흡곤란 증후군의 사용 사례를 목표로 하며, 플라스크 기반 공정 조건에 비해 유사한 세포 수율과 유리한 유전자 발현을 보여줍니다. 이 프로토콜은 다른 앵커리지 의존성 세포 및 표적 적응증에도 확장 가능합니다.

급성 호흡곤란 증후군에 준비된 앵커리지 의존 중간엽 기질 세포의 미생물반응기 기반 생성

이 프로토콜은 기체 투과성 급속 증식(G-Rex) 장치를 사용하여 채택 세포 치료(ACT) 제품인 키메라 항원 수용체(CAR)-T 세포와 사이토카인 유도 킬러(CIK) 세포의 확장 가능성을 설명하며, 임상적으로 중요한 환경에서 효율적이고 견고한 성장을 입증합니다.

GMP 확장 가능한 장치에서 CAR-T 및 사이토카인 유도 킬러 세포의 효율적이고 빠른 생성

MSC 및 기타 세포 유형으로부터 세포외 소포를 생산하기 위한 3D 관류 중공 섬유 바이오반응기 설치 및 사용법도 제공됩니다. 이 프로토콜은 중공 섬유 바이오리액터에서 세포 밀도를 조절하면서 고농도로 연속적으로 세포외 소포를 생산하는 방법을 설명합니다.

중공 섬유 관류 생물반응기에서 고밀도 3D 세포 배양을 통한 세포외 소포의 대규모 생산

배우세요 GMP 등급 용해성 다공성 마이크로캐리어를 활용한 대규모 부착세포 배양법입니다. 인간 중간엽줄기세포, HEK293T 및 Vero 세포를 검증하여 세포 및 유전자 치료 산업의 품질과 수량 요구를 충족합니다.

GMP 등급의 용해성 다공성 마이크로캐리어를 기반으로 한 대규모 셀 생산

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