2023년 8월 4일
여기에서 우리는 배양에서 특정 시상하부 세포 아형을 성장시키기 위한 프로토콜을 제시합니다. 세포는 적절한/고유한 막 마커를 기반으로 선택할 수 있으며 면역형광, 전기생리학 및 생화학적 분석을 포함한 많은 응용 분야에서 사용할 수 있습니다.
본 연구의 범위는 시상하부 기능 장애와 관련된 대사 장애를 연구하는 것입니다. 우리는 표적 1차 포유류 시상하부 뉴런, 특히 렙틴 수용체를 발현하는 뉴런의 생화학적 및 세포 메커니즘을 연구하는 데 관심이 있습니다. 시상 하부는 수유, 수면, 동기 부여 및 신진 대사의 유지를 포함하는 복잡한 뇌 영역입니다.
그리고 이것은 매우 다양한 신경 공동체를 의미합니다. 이 집단 중 소수만이 철저히 연구되었으며 다른 대부분의 다른 집단은 추가 조사가 필요하고 세포 메커니즘이 추가로 설명되어야 합니다. 시상하부 뉴런과 그 기능은 주로 전기생리학, 화학유전학 및 광유전학으로 조사됩니다.
그리고 이러한 기술은 동물의 행동과 뇌 회로를 이해하는 것과 관련하여 매우 유익합니다. 그러나 이러한 행동을 유도하는 세포 및 분자 메커니즘에 대해서는 알려진 바가 거의 없습니다. 그리고 세포 수준을 더 깊이 들여다보아야만 이 격차를 해결할 수 있습니다.
본 연구는 시상하부 기능 장애와 관련된 대사 질환에서의 역할을 조사하기 위해, 특히 렙틴 수용체를 발현하는 특정 시상하부 뉴런 하위 유형을 배양하는 상세한 프로토콜을 제시합니다. 해당 방법에는 심층적인 세포 및 분자 분석을 위한 면역형광법, 전기생리학적 분석 및 생화학적 분석과 같은 다양한 응용법이 포함됩니다.
MACS를 이용한 표적 시상하부 뉴런의 분리는 대사 조절에 관여하는 뉴런 하위 유형의 정밀한 분석을 가능하게 하며, 이는 대사 질환 연구에서 초기 단계의 타겟 검증 및 기전적 리스크 감소를 지원합니다. 이러한 역량은 뉴런 기능과 내분비 및 대사 표현형 간의 연결에 대한 예측 신뢰도를 높여, 신약 발견 및 전임상 단계의 포트폴리오 결정에 유용한 정보를 제공합니다. 이 접근법은 바이오 제약 R&D와 관련된 복잡한 시상하부 기능의 근저에 있는 세포 메커니즘을 분석하기 위한 재현 가능한 플랫폼을 제공합니다.
이 MACS 기반의 신경세포 분리 방법은 발견부터 전임상 단계까지의 연속 과정에 통합되어, 생체 내(in vivo) 모델링 이전에 강력한 타겟 검증 및 기능 연구를 가능하게 합니다.