تصوير الكالسيوم في شبكية العين المسطحة المحفزة كهربائيا
August 18th, 2023
الأطراف الاصطناعية للشبكية لديها القدرة على توليد تصورات بصرية. للمضي قدما في تطوير أطراف اصطناعية جديدة ، هناك حاجة إلى طرق خارج الجسم الحي لاختبار الأجهزة قبل الزرع. تقدم هذه المقالة بروتوكولا شاملا لدراسة نشاط الكالسيوم في طبقة خلايا العقدة الشبكية عند تعرضها للتحفيز الكهربائي.
على الرغم من وجود محاولات لاختبار الأجهزة القابلة للزرع في شبكية العين باستخدام طرق خارج الجسم الحي ، إلا أنه لم يكن هناك بروتوكول شامل ومفصل من مراقبة العينة إلى تحليل البيانات. من خلال هذا العمل ، نهدف إلى سد هذه الفجوة بتزويد الباحثين من خلفيات مختلفة بالأدوات اللازمة للشروع بثقة في تجارب تحفيز الشبكية العصبية. تصوير الكالسيوم هو تقنية شائعة لدراسة النشاط العصبي الذي يوفر العديد من المزايا على الطرق غير البصرية.
يوفر دقة خلوية ويمكن أن يستهدف أنواع معينة من الخلايا. وهو مفيد بشكل خاص لاختبار MEAs الجديدة لأنه يسمح بالتمييز بين الخلايا النشطة وغير النشطة عند التحفيز الكهربائي. نحن نقدم منهجية قوية لدراسة استجابات الخلايا العصبية في شبكية العين باستخدام تصوير الكالسيوم.
يمكن أن يقدم هذا النهج نظرة ثاقبة للإثارة الانتقائية للخلايا ، وهي خطوة حاسمة في تطوير بروتوكولات تحفيز أفضل ، وتحسين أداء الزرع ، وتطوير أحدث التقنيات. يركز مختبرنا على تطوير تقنيات الفحص المجهري المتقدمة. حاليا ، نحن نعمل في تسجيل ديناميات الكالسيوم في 3D للحصول على فهم أفضل للتفاعل السلبي في الأنسجة بأكملها.
نظرة عامة
تستكشف هذه الدراسة بروتوكولًا مفصلاً لفحص نشاط الكالسيوم في الخلايا العقدية الشبكية الخاضعة للتحفيز الكهربائي، وهو أمر أساسي للتقدم في الأطراف الاصطناعية للشبكية. يستخدم الباحثون التصوير الكالسيم كوسيلة للتحقيق في النشاط العصبي، مما يوفر رؤى حول الإثارة الانتقائية للخلايا العصبية الشبكية.
مكونات الدراسة الرئيسية
مجال العلوم
- علم الأعصاب
- فسيولوجيا الشبكية
- التصوير الكالسيم
الخلفية
- يمكن للأطراف الاصطناعية للشبكية توليد إدراكات بصرية.
- هناك حاجة إلى طرق خارج الجسم الحي لاختبار هذه الأجهزة بشكل فعال.
- يوفر التصوير الكالسيم دقة خلوية لدراسة النشاط العصبي.
- يعالج البروتوكول الثغرات في منهجيات الاختبار الشاملة.
هدف الدراسة
- تزويد الباحثين بمنهجية قوية لتجارب التحفيز العصبي للشبكية.
- تمكين اختبار أجهزة الأطراف الاصطناعية الجديدة للشبكية قبل الزرع.
- تعزيز فهم الاستجابات الخلوية داخل طبقة الخلايا العقدية في الشبكية.
الطرق المستخدمة
- استخدام مستحضرات الشبكية خارج الجسم الحي من الفئران المهدأة لتقييم ديناميكيات الكالسيوم.
- يتم حقن مؤشرات الكالسيوم في الزجاجي قبل 2-3 أسابيع من التصوير.
- تشمل البروتوكولات تقنيات جراحية دقيقة لاستخراج الشبكية وتثبيتها.
- يتم استخدام مجهر الفلورة لتصور النشاط العصبي أثناء التحفيز الكهربائي.
النتائج الرئيسية
- يسمح التصوير الكالسيم بالتمييز بين الخلايا النشطة وغير النشطة أثناء التحفيز.
- كشف عن علاقات بين مستويات التيار ومسافات الخلايا من أقطاب التحفيز.
- تدعم المنهجية المفصلة تقييمًا محسّنًا لاستجابات الخلايا الشبكية.
الاستنتاجات
- تؤسس الدراسة إطارًا للتحقيق في استجابات الخلايا العصبية للشبكية للتحفيز الكهربائي.
- قد تؤدي الرؤى المكتسبة إلى تحسين تصميم ووظيفة الأطراف الاصطناعية للشبكية في المستقبل.
- يعزز هذا البروتوكول فهم الآليات العصبية ذات الصلة بالبصريات الاصطناعية.
