Name: Dioscin In Vivo에서 B 세포 활성화를 억제하고 In vitro에서 갈락토오스 결핍 IgA1 생산을 감소시켜 IgA 신병증 완화를 중재했습니다. (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-13T14:40:00.000+00:00
Duration: 14 min 18 s
Description: 배우세요 Dioscin이 IgA 신병증 치료에서 B 세포 활성화를 억제하고 갈락토오스 결핍 IgA1 생산을 감소시키는 기전을 생쥐 모델과 DAKIKI 세포 실험을 통해 확인하는 방법입니다.

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<meta charset="utf8"></head><body>쥐 모델에서 Diosicin을 사용한 면역글로불린 A 신병증(IgAN) 치료

<ol><li>Knoppova, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+and+activities+of+IgA1-containing+immune+complexes+in+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">The origin and activities of IgA1-containing immune complexes in IgA nephropathy.</a> Frontiers in Immunology. 7, 117(2016).</li>
<li>Suzuki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+The+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of IgA nephropathy.</a> Journal of The American Society of Nephrology. 22 (10), 1795-1803 (2011).</li>
<li>He, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+double-stranded+RNA+poly%28I%3AC%29+aggravates+IgA+nephropathy+by+triggering+IgA+class+switching+recombination+through+the+TLR3-BAFF+axis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Synthetic double-stranded RNA poly(I:C) aggravates IgA nephropathy by triggering IgA class switching recombination through the TLR3-BAFF axis.</a> American Journal of Nephrology. 42 (3), 185-197 (2015).</li>
<li>Zhao, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+level+of+galactose-deficient+IgA1+in+the+sera+of+patients+with+IgA+nephropathy+is+associated+with+disease+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">The level of galactose-deficient IgA1 in the sera of patients with IgA nephropathy is associated with disease progression.</a> Kidney International. 82 (7), 790-796 (2012).</li>
<li>Xing, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C1GALT1+expression+is+associated+with+galactosylation+of+IgA1+in+peripheral+B+lymphocyte+in+immunoglobulin+a+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Nephrology%22%5BJournal%5D)">C1GALT1 expression is associated with galactosylation of IgA1 in peripheral B lymphocyte in immunoglobulin a nephropathy.</a> BMC Nephrology. 21 (1), 18(2020).</li>
<li>Qin, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((External+suppression+causes+the+low+expression+of+the+Cosmc+gene+in+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology+Dialysis+Transplantation%22%5BJournal%5D)">External suppression causes the low expression of the Cosmc gene in IgA nephropathy.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 23 (5), 1608-1614 (2008).</li>
<li>Sakai, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactobacillus+gasseri+SBT2055+induces+TGF-%CE%B2+expression+in+dendritic+cells+and+activates+TLR2+signal+to+produce+IgA+in+the+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Lactobacillus gasseri SBT2055 induces TGF-β expression in dendritic cells and activates TLR2 signal to produce IgA in the small intestine.</a> PLoS One. 9 (8), 105370(2014).</li>
<li>Gutzeit, C., Magri, G., Cerutti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+IgA+production+and+its+role+in+host-microbe+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Immunological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Intestinal IgA production and its role in host-microbe interaction.</a> Immunological Reviews. 260 (1), 76-85 (2014).</li>
<li>Serino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+a+retrospective+international+study%2C+circulating+miR-148b+and+let-7b+were+found+to+be+serum+markers+for+detecting+primary+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">In a retrospective international study, circulating miR-148b and let-7b were found to be serum markers for detecting primary IgA nephropathy.</a> Kidney International. 89 (3), 683-692 (2016).</li>
<li>Lu, F., et al. Therapeutic effect of Rhizoma Dioscoreae Nipponicae on gouty arthritis based on the SDF-1/CXCR 4 and p38 MAPK pathway: an in vivo and in vitro study. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLu%2C+F+%22Phytotherapy+research%3A+PTR%22">Phytotherapy research: PTR</a>. 28 (2), 280-288 (2014).</li>
<li>Wang, W., Xu, L., Zhou, L., Wan, S., Jiang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Network+pharmacology+approach+to+reveal+the+underlying+mechanisms+of+Rhizoma+Dioscoreae+Nipponicae+in+the+treatment+of+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%3A+eCAM%22%5BJournal%5D)">A Network pharmacology approach to reveal the underlying mechanisms of Rhizoma Dioscoreae Nipponicae in the treatment of asthma.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine: eCAM. 2022, 4749613(2022).</li>
<li>Tian, W. W., Wei, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Professor+TONG+Xiaolin+used+the+experience+of+Dioscoreae+Nipponicae%5BTitle%5D)+AND+%22Jilin+Journal+of+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Professor TONG Xiaolin used the experience of Dioscoreae Nipponicae.</a> Jilin Journal of Chinese Medicine. 40 (05), 589-592 (2020).</li>
<li>Rao, X. R., Bai, Y. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Das+Xiwen%27s+experience+in+treating+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Beijing+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Das Xiwen's experience in treating IgA nephropathy.</a> Beijing Journal of Traditional Chinese Medicine. 9, 691-693 (2008).</li>
<li>Si, Y., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+data+mining+study+on+the+pattern+of+medication+use+in+the+treatment+of+IgA+nephropathy+by+Professor+Zhang+Yu%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chinese+Physician%22%5BJournal%5D)">A data mining study on the pattern of medication use in the treatment of IgA nephropathy by Professor Zhang Yu.</a> Journal of Chinese Physician. 20 (01), 109-111 (2018).</li>
<li>Jiang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+the+enzymatic+extraction+technology+of+Diosgenin+from+Dioscorea+nipponica%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Traditional+Patent+Medicine%22%5BJournal%5D)">Optimization of the enzymatic extraction technology of Diosgenin from Dioscorea nipponica.</a> Chinese Traditional Patent Medicine. 39 (03), 621-624 (2017).</li>
<li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dioscin+alleviates+lipopolysaccharide-induced+inflammatory+kidney+injury+via+the+microRNA+let-7i%2FTLR4%2FMyD88+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacological+Research%22%5BJournal%5D)">Dioscin alleviates lipopolysaccharide-induced inflammatory kidney injury via the microRNA let-7i/TLR4/MyD88 signaling pathway.</a> Pharmacological Research. 111, 509-522 (2016).</li>
<li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+the+pharmacological+activities+of+Dioscin%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Recent advances in the pharmacological activities of Dioscin.</a> BioMed Research International. 2019, 5763602(2019).</li>
<li>Nal Zou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-like+receptor+4+signaling+pathway+in+the+protective+effect+of+Pioglitazone+on+experimental+immunoglobulin+A+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Medical+Journal%22%5BJournal%5D)">Toll-like receptor 4 signaling pathway in the protective effect of Pioglitazone on experimental immunoglobulin A nephropathy.</a> Chinese Medical Journal. 130 (8), 906-913 (2017).</li>
<li>Xu, S. Y., Bian, R. L., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+experiments+methodology%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Pharmacological+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Pharmacological experiments methodology.</a> Chinese Pharmacological Bulletin. 1, 19(1992).</li>
<li>Shen, J. C., Ren, Y., Rao, X. R., You, Y., Li, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Network+pharmacology%2C+molecular+docking%2C+and+in+vitro+experiments+to+explore+the+molecular+mechanism+of+Dioscorea+Nipponica+Makion+in+the+treatment+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Integrated+Traditional+and+Western+Medicine%22%5BJournal%5D)">Network pharmacology, molecular docking, and in vitro experiments to explore the molecular mechanism of Dioscorea Nipponica Makion in the treatment of IgA nephropathy.</a> World Journal of Integrated Traditional and Western Medicine. 16 (12), 2246-2254 (2021).</li>
<li>Mestecky, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IgA+nephropathy%3A+molecular+mechanisms+of+the+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">IgA nephropathy: molecular mechanisms of the disease.</a> Annual Review of Pathology. 8, 217-240 (2013).</li>
<li>Novak, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IgA1-containing+immune+complexes+in+IgA+nephropathy+differentially+affect+proliferation+of+mesangial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">IgA1-containing immune complexes in IgA nephropathy differentially affect proliferation of mesangial cells.</a> Kidney International. 67 (2), 504-513 (2005).</li>
<li>Nihei, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+IgA+autoantibodies+targeting+mesangial+cells+redefines+the+pathogenesis+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Identification of IgA autoantibodies targeting mesangial cells redefines the pathogenesis of IgA nephropathy.</a> Science Advances. 9 (12), (2023).</li>
<li>Raska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+CMP-NeuAc%3A+GalNAc-IgA1+alpha2%2C6-sialyltransferase+in+IgA1-producing+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of CMP-NeuAc: GalNAc-IgA1 alpha2,6-sialyltransferase in IgA1-producing cells.</a> Journal of Molecular Biology. 369 (1), 69-78 (2007).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Anti-CD20/MS4A1 항체</td><td>Boster Biotechnology Company</td><td>A03780-3</td><td></td></tr><tr><td>Antifade 장착 매체</td><td>Beyotime, Shanghai, China</td><td>P0128S</td><td></td></tr><tr><td>Balb/c 마우스</td><td>Beijing Weitong Lihua Laboratory Animal Technology Co., Ltd.</td><td></td><td></td>110322220101424000</tr><tr><td>차단 혈청</td><td>Solarbio, 베이징, 중국</td><td>SL038</td><td></td></tr><tr><td>소 감마 글로불린</td><td>ShangHai YuanYe Biotechnology Company</td><td>S12031</td><td></td></tr><tr><td>C1GALT1 다클론 항체</td><td>Proteintech Group, Inc, USA</td><td>27569-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>구연산염 항원 회수 솔루션(50&times;)</td><td>Phygene Biotechnology Company</td><td>PH0422</td><td></td></tr><tr><td>COSMC 다클론 항체</td><td>Proteintech Group, Inc, USA</td><td>19254-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>세포독성 검출 키트</td><td>Roche Company</td><td>4744926001</td><td></td></tr><tr><td>Dako REAL EnVision 검출 시스템, Peroxidase/DAB+</td><td>Dako</td><td>K5007</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>Dioscin</td><td>미국 국립식품의약국(National Institute for Food and Drug Control</td>) <td>111707-201703</td><td></td></tr><tr><td>DIO 정제</td><td>Chengdu No 1 Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>H51023866 ECL 작업 솔루션</td><td>Merck Biotechnology, Inc</td><td>WBKLS0100&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>향상된 세포 계수 키트-8</td><td>Beyotime, 상하이, 중국</td><td>C0043</td><td></td></tr><tr><td>유전자 cDNA 첫 번째 가닥 합성 프리믹스의 한 단계 제거</td><td>TIANGEN, 베이징, 중국</td><td>KR118-02</td><td></td></tr><tr><td>글리코겐 주기적 산 쉬프 (PAS) 염색 키트&nbsp;</td><td>BaSO Biotechnology Company</td><td>BA4080A</td><td></td></tr><tr><td>염소 안티 마우스 IgA-AF488</td><td>SouthernBiotech</td><td>1040-30</td><td></td></tr><tr><td>염소 안티 토끼 IgG 항체 (H + L), HRP conjugated</td><td>BeiJing Bioss Biotechnology Company</td><td>BS-0295G-HRP</td><td></td></tr><tr><td>Human Gd-IgA1 ELISA kit</td><td>IBL</td><td>27600</td><td></td></tr><tr><td>Human IgA ELISA kit</td><td>MultiSciences (LiankeBio)</td> <td>70-EK174-96</td><td></td></tr><tr><td>Pierce BCA 단백질 분석 키트</td><td>Thermo Scientific</td><td>23227</td><td></td></tr><tr><td>PMSF 솔루션</td><td>Beyotime, Shanghai, China</td><td>ST507</td><td></td></tr><tr><td>Proteinase K&nbsp;</td><td>Phygene Biotechnology Company</td><td>PH1521</td><td></td></tr><tr><td>토끼 항-CXCR5 다클론 항체&nbsp;</td><td>BeiJing Bioss Bioss Biotechnology Company</td><td>bs-23570R</td><td></td></tr><tr><td>RIPA 용해 완충액</td><td>Beyotime, Shanghai, China</td><td>P0013B</td><td></td></tr><tr><td>RNAsimple total RNA extraction kit</td><td>TIANGEN, Beijing, China</td><td>DP419</td><td></td></tr><tr><td>RPMI Medium 1640</td><td>Solarbio, Beijing, China</td><td>31800</td><td></td></tr><tr><td>Super-Bradford protein assay kit</td><td>CWBIO, Beijing, China</td><td>CW0013</td><td></td></tr><tr><td>트리톤&nbsp; X-100</td><td>Beyotime, Shanghai, China</td><td>ST795</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-Actin Rabbit mAb</td><td>Abclonal, 우한, 중국</td><td>AC026</td><td></td></tr></tbody></table>

dioscin in vivo에서 b 세포 활성화를 억제하고 in vitro에서 갈락토오스 결핍 iga1 생산을 감소시켜 iga 신병증 완화를 중재했습니다.

Dioscin Mediated IgA Nephropathy Alleviation by Inhibiting B Cell Activation In Vivo and Decreasing Galactose-Deficient IgA1 Production In Vitro

IgAN 마우스 모델에서 DIO가 신장 조직에 미치는 영향
대조군과 비교했을 때, 점막 면역 유도 IgAN 마우스 모델(모델 그룹)은 단백뇨가 유의하게 증가하였고(보충 그림 2), IgA 침착은 간막 영역에서 볼 수 있었으며, 형광은 전체 간막 영역에 걸쳐 군집으로 균일하게 분포되어 있었으며 (그림 1A), 신장 조직의 PAS 염색은 간막 세포 증식 및 기질 증식을 보여주었습니다 (그림 1B), 이는 DIO gavage 그룹(DIO group)에서 감소되었다.
Peyer's patch의 B 림프구에 대한 DIO의 효과
Peyer's patch는 B 림프구가 IgA 분비 세포로 전환되는 주요 부위입니다. B 세포 마커 CD20 및 CXCR5의 발현을 감지하여 DIO가 B 림프구에 미치는 영향을 관찰하기 위해 Peyer의 패치를 연구 대상으로 삼았습니다. 면역조직화학적 결과는 CD20 및 CXCR5의 발현이 대조군에 비해 모델군에서 유의하게 높았다는 것을 보여주었다. DIO는 위의 분자 마커의 발현을 억제할 수 있습니다(그림 2A,B).
DAKIKI 셀에 대한 DIO의 안전한 농도 범위
LDH는 원형질막 무결성의 지표이자 세포 사멸의 지표이며, LDH 방출률이 높을수록 세포 손상이 더 심각함을 나타냅니다. LDH 방출 분석은 DIO의 안전한 농도 범위를 결정하는 데 사용되었습니다. DIO의 최대 안전 농도는 LDH 방출률이 10% 미만일 때 측정하였다. 결과(그림 3)는 0.25 - 1.0 μg/mL 농도에서 DIO에 의해 유도된 유의미한 세포독성을 보여주지 않았습니다. 따라서 다음 연구에서는 0.25, 0.5 및 1.0 μg/mL DIO를 투여 수준으로 사용했습니다.
DIO가 DAKIKI 세포 증식에 미치는 영향
실험 결과(그림 4)는 모델 그룹(LPS 자극 그룹)과 비교하여 DIO가 농도 의존적 방식으로 LPS 유도 DAKIKI 세포 증식을 억제한다는 것을 보여주었습니다. 0.5 및 1.0 μg/mL 농도의 DIO는 LPS 유도 DAKIKI 세포 증식을 유의하게 억제했습니다(P &lt; 0.01).
DIO가 DAKIKI 세포의 분비 기능에 미치는 영향
Gd-IgA1 수치는 IgAN의 병리학적 과정과 밀접한 관련이 있으며, 총 IgA는 세포 분비 기능의 지표로 함께 검사됩니다. ELISA 분석을 사용하여 DAKIKI 세포 배양의 상층액에서 IgA 및 Gd-IgA1 함량을 검출했습니다. 그 결과(그림 5A, B) LPS에 의해 자극된 DAKIKI 세포는 대조군에 비해 더 많은 IgA를 분비하는 것으로 나타났습니다(P &lt; 0.01). 이에 비해 DIO는 DAKIKI 세포가 농도 의존적 방식으로 IgA(P &lt; 0.01)를 분비하는 것을 유의하게 억제했습니다. 대조군에 비해 LPS에 의해 자극된 DAKIKI 세포는 통계적 경향(P &lt; 0.10)으로 Gd-IgA1을 더 많이 분비하였고, DIO는 LPS 자극 DAKIKI 세포에서 Gd-IgA1 분비를 농도 의존적으로 억제하였으며(P &lt; 0.05, P &lt; 0.01), 그 중 1.0 μg/mL의 DIO는 25%의 억제율로 Gd-IgA1의 분비를 유의하게 억제하였다.
DIO의 기전은 DAKIKI 세포에 의한 Gd-IgA1 분비를 억제합니다
DAKIKI 세포에 의한 과도한 Gd-IgA1 분비를 억제하는 DIO의 가능한 메커니즘을 추가로 조사하기 위해 DAKIKI 세포의 glycosylated transferase C1GALT1 및 chaperone protein Cosmc mRNA의 수준을 qRT-PCR로 검출했으며, 그 결과(그림 6A, B)에서 C1GALT1 및 Cosmc의 상대적 mRNA 발현이 대조군에 비해 모델 그룹의 DAKIKI 세포에서 하향 조절되었음을 보여주었습니다(P &lt; 0.01)입니다. DIO는 C1GALT1와 Cosmc의 상대적 mRNA 발현을 모델 그룹에 비해 다른 정도로 상향 조절했으며, DIO 1.0μg/mL는 C1GALT1 및 Cosmc의 상대적 mRNA 발현을 유의하게 상향 조절했습니다(P &lt; 0.05).
동시에 WB 방법을 사용하여 DAKIKI 세포에서 C1GALT1 및 Cosmc의 단백질 발현에 대한 DIO의 효과를 검출했습니다. 대조군과 비교했을 때, 모델군의 DAKIKI 세포에서 C1GALT1와 Cosmc의 단백질 발현은 뚜렷하게 감소하였다(P &lt; 0.05). 모델 그룹과 비교하여, DIO 중재 후 C1GALT1 및 Cosmc의 단백질 발현은 상향 조절되었습니다. C1GALT1 및 Cosmc의 단백질 발현은 1.0μg/mL(P &lt; 0.05)의 농도에서 DIO에 의해 유의하게 상향 조절되었습니다(그림 7A-C).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig1.jpg"> 그림 1: 신장의 조직병리학. (A) 면역형광 현미경. 각 그룹의 마우스의 신장 절편을 항-IgA(녹색) 및 DAPI(파란색)로 염색했습니다. 위의 그림 눈금 막대 = 200μm. 아래 그림 눈금 막대 = 50μm. n = 그룹당 6. (B) 대조군, 모델 및 DIO 그룹의 마우스에서 신장 조직의 PAS 염색을 대표하는 사진. 눈금 막대 = 30 μm. 아래쪽 화살표는 간막 세포를 나타내고 위쪽 화살표는 기질을 나타냅니다. 눈금 막대 = 30 μm. n = 그룹당 6. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig2.jpg"> 그림 2: B 림프구 마커에 대한 DIO의 효과. (A) Peyer's patch에서 CD20의 발현. 스케일 바 = 200 μm. n = 그룹당 6. (B) Peyer's patch에서 CXCR5의 발현. 축척 막대는 이미지의 오른쪽 아래 모서리에 있습니다. 스케일 바 = 200 μm. n = 그룹당 6. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig3.jpg"> 그림 3. DAKIKI 세포에 대한 DIO의 안전한 농도 스크리닝. 통계적 값은 3개의 독립적인 실험에서 얻은 평균 ± SD로 표현됩니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig4.jpg"> 그림 4. 다양한 농도의 DIO는 DAKIKI 세포의 증식에 영향을 미칩니다. 데이터는 평균 ±SD로 표현되었다. 대조군과 비교했을 때, **P &lt; 0.01; 모델 그룹과 비교했을 때, #P &lt; 0.05' ##P &lt; 0.01; 모든 실험의 결과를 3회 반복하였다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig5.jpg"> 그림 5. DIO는 DAKIKI 세포에 의한 IgA 및 Gd-IgA1 분비를 억제합니다. (A) ELISA 방법은 각 그룹에서 IgA의 발현을 검출하였다. (B) ELISA 방법은 각 그룹에서 Gd-IgA1의 발현을 검출하였다. 데이터는 평균 ± SD로 표현되었다. 대조군과 비교했을 때, **P &lt; 0.01; 모델 그룹과 비교하여 #P &lt; 0.05, ##P &lt; 0.01; 모든 실험 결과를 3회 반복하였다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig6.jpg"> 그림 6. DIO의 기전은 DAKIKI 세포에 의한 과도한 Gd-IgA1 분비를 억제합니다. (A) QRT-PCR은 C1GALT1의 mRNA 발현을 검출하였다. (B) QRT-PCR은 Cosmc의 mRNA 발현을 검출하였다. 데이터는 평균 ± SD로 표현되었다. 대조군과 비교했을 때, **P&lt;0.01; 모델 그룹과 비교하여 #P &lt; 0.05, ##P &lt; 0.01; 모든 실험 결과를 3회 반복하였다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig6large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig7.jpg"> 그림 7. DIO는 DAKIKI 세포에서 C1GALT1와 Cosmc의 단백질 발현에 영향을 미칩니다. (A) WB는 DIO에 의한 C1GALT1 및 Cosmc의 단백질 발현의 상향 조절을 검증했습니다. (B) C1GALT1 발현의 반정량 분석은 이미지 J를 사용하여 수행하였다. (C) 이미지 J를 이용하여 Cosmc 발현의 반정량 분석을 수행하였다. 데이터는 대조군과 비교하여 평균±SD.*P &lt; 0.05; 모델군과 비교하여, #P &lt; 0.05, ##P &lt; 0.01, 모든 실험 결과를 3회 반복하였다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig7large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
보충 그림 1. in vivo 모델에 대한 스키마입니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/Supplementary_Figure_1.pdf" target="_blank">이 그림을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>
보충 그림 2. 단백뇨의 변화. 데이터는 평균 ± SD로 표현되었습니다. n = 그룹당 6. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/Supplementary_Figure_2.jpg" target="_blank">이 그림을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>

Dioscin In Vivo에서 B 세포 활성화를 억제하고 In vitro에서 갈락토오스 결핍 IgA1 생산을 감소시켜 IgA 신병증 완화를 중재했습니다.

The increase of circulating galactose-deficient IgA1 (Gd-IgA1) is caused by excessive activation of IgA-positive secretory cells in the process of mucosal ...

dioscin-mediated-iga-nephropathy-alleviation-inhibiting-b-cell

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

여기서, 우리는 뮤린 이차 림프기관에서 사이토카인 인터페론 감마를 분비하는 세포의 내부 국소화를 가시화하는 간단한 공초점 이미징 방법을 기술한다. 이 프로토콜은 다양한 조직에서 다른 사이토카인의 시각화를 위해 확장될 수 있다.

리스테리아 단세포 유전자 감염 다음 마우스 비장에서 시투 인터페론 감마 생산의 이미징

이 프로토콜은 G6PI 혼합 펩티드를 사용하여 CD4+ T 세포 및 사이토카인에서 인간 류마티스 관절염에 가까운 류마티스 관절염 모델을 구성합니다. 고순도 불변 성 천연 킬러 T 세포 (주로 iNKT2) 특정 표현형 및 기능을 가진 채택 면역 요법에 대한 생체 내 유도 및 체외 정제에 의해 수득되었다.

포도당-6-인산염 이사머라제(G6PI)-유도 RA 마우스에서 iNKT 세포의 입양 면역 요법

여기에서 우리는 창자 호밍 조절 T 세포 유도의 생체 내 확대를 위한 프로토콜을 제시합니다. 이 프로토콜에서 수지상 세포는 활성 비타민 D (1,25-디하이드록시 비타민 D 또는 1,25 [OH]2D) 및 활성 비타민 A (레티노산 또는 RA) 드 노보의 고농도를 국부적으로 생산하도록 설계되었습니다.

내장 호밍 규제 T 세포 유도의 생체 내 확대

microRNA는 IgA 신병증의 발병기전에 관여합니다. 우리는 IgA 신병증 마우스 모델(HIGA 마우스)의 신장에서 microRNA 발현 수준을 검출하기 위한 신뢰할 수 있는 방법을 개발했습니다. 이 새로운 방법은 IgA 신병증에 대한 miRNA의 관여를 확인하는 것을 용이하게 할 것입니다.

면역글로불린 A 신병성 마우스의 신장에서 MicroRNA 발현 검출

안구 표면 염증은 안구 표면 조직에 해를 끼치고 눈의 중요한 기능을 손상시킵니다. 본 프로토콜은 마이보미안 샘 기능장애(MGD)의 마우스 모델에서 안구 염증을 유도하고 손상된 조직을 수집하는 방법을 기술한다.

안구 표면 염증의 유도 및 관련 조직의 수집

여기 우리는 세포의 반응 산소 종의 존재를 테스트하고 평가하는 간단한 방법을 제안합니다.

암의 생산 및 반응 산소 종의 감지 (ROS)

우리는 생체 표지 세포와 마우스 모델에서 MRI를 사용하여 생체 내 세포 추적을위한 일반적인 프로토콜을 설명합니다. 셀 라벨, 이미지 수집 처리 및 정량화를위한​​ 일반적인 프로토콜이 포함되어 있습니다.

세포 추적을위한 생체 19 F MRI에서

소장은 자주 혈액 흐름에 부정적인 영향을주고 영양분 흡수에 영향을 미칠 수있는 독소에 노출된다. , 화합물 또는 관심의 독소를 multimyograph 및 장간막 동맥을 사용하고 정맥 분리하는 vasoactivity에 대한 검사를 할 수 있습니다.

생물 검정으로 소 장간막 동맥과 정맥의 섹션을 분리하고 사용하면 소장에서 Vasoactivity을 테스트

이 원고는 임신 중 자궁 내 압력을 측정하기 위해 마우스에 텔레미터를 이식하는 프로토콜을 제공합니다.

자궁 원격 측정은 마우스 수축 압력을 측정하는<em&gt; 생체</em

미세 아교 세포의 활성화 및 microgliosis 만성 신경 퇴행의 핵심 반응이다. 여기, 우리는 생체 내, 공 초점 검안경으로 망막 CX3CR1-GFP + 미세 아교 세포의 장기 시각화를위한 방법을 제시하고, 임계 값 및 형태 계측 학적 대한 식별과 활성화를 정량화 분석한다. 우리는 연령과 관련된 녹내장의 초기 단계 소교 변경 사항을 모니터링 할 수 있습니다.

마우스 녹내장에 공 촛점 안저 이미징 및 세포 형태 계측 : 신경 퇴행 중 망막 미세 아교 활성화의 생체 역학

배우세요 Dioscin이 IgA 신병증 치료에서 B 세포 활성화를 억제하고 갈락토오스 결핍 IgA1 생산을 감소시키는 기전을 생쥐 모델과 DAKIKI 세포 실험을 통해 확인하는 방법입니다.

Dioscin In Vivo에서 B 세포 활성화를 억제하고 In vitro에서 갈락토오스 결핍 IgA1 생산을 감소시켜 IgA 신병증 완화를 중재했습니다.

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