Analysis of Protein Complex Formation at Micromolar Concentrations by Coupling Microfluidics with Mass Photometry

Myndert Claasen; Zornitsa Kofinova; Matteo Contino; Weston B. Struwe

doi:10.3791/65772

Microfluidics와 질량 광도계를 결합하여 Micromolar 농도에서 단백질 복합체 형성 분석

JoVE Journal
Biochemistry

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JoVE Journal Biochemistry

Analysis of Protein Complex Formation at Micromolar Concentrations by Coupling Microfluidics with Mass Photometry

Microfluidics와 질량 광도계를 결합하여 Micromolar 농도에서 단백질 복합체 형성 분석

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06:39 min

January 26, 2024

DOI: 10.3791/65772-v

Myndert Claasen¹, Zornitsa Kofinova¹, Matteo Contino², Weston B. Struwe^3,4

¹Refeyn Ltd., ²Adaptix Ltd., ³Physical and Theoretical Chemistry Laboratory, Department of Chemistry,University of Oxford, ⁴The Kavli Institute for Nanoscience Discovery,University of Oxford

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 프로토콜은 질량 측광법과 새로운 미세유체역학 시스템을 결합하여 저친화성 단백질-단백질 상호 작용을 조사합니다. 이 접근법은 용액에서 고도로 농축된 복합체의 빠른 희석을 기반으로 하며, 이를 통해 저친화성 측정이 가능하고 질량 측광법의 적용 가능성이 넓어집니다.

이 프로토콜은 친화성이 낮은 단백질 복합체를 분석하는 완전히 새로운 방법을 보여줍니다. 이를 통해 연구자들은 이전에는 일반적으로 매우 어렵거나 불가능했던 특정 단백질 상호 작용이 약하거나 일시적인 경우에도 감지하고 특성화할 수 있습니다. 단백질 상호 작용은 세포 기능에 매우 중요하지만 이를 검출하고 측정하는 것은 어려울 수 있습니다.

질량 측광법은 단백질 복합체 형성을 정량화하기 위한 훌륭한 도구이지만 희석된 샘플에는 한계가 있습니다. 우리는 MassFluidix를 통해 이 문제를 해결하고 있습니다. 우리가 다루고 있는 연구 격차는 과학자들이 용액 내 단백질 간의 낮은 친화성 상호 작용을 신뢰성 있게 특성화할 수 있는 방법입니다.

우리 접근법의 장점은 라벨이나 고정화가 필요 없이 용액에서 약한 단백질 상호 작용을 찾을 수 있다는 것입니다. 따라서 연구자들은 관심 있는 단백질과 그들이 어떻게 상호 작용하는지 관찰할 수 있으며, 그들이 보고 있는 시스템을 방해하고 있다는 걱정 없이 관찰할 수 있습니다.

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