제브라피시의 태아 알코올 스펙트럼 장애를 모델링하여 불리한 배아 환경이 성인의 사회적 행동에 미치는 영향을 특성화합니다.

우리 연구실의 범위는 유전자가 뇌 발달과 상호 작용하여 행동에 영향을 미치는 방법을 이해하는 것입니다. 우리 연구실에서는 제브라피쉬를 사용하여 발달 중 알코올 노출과 같은 환경 요인이 제브라피쉬의 유전자 변화로 이어져 뇌 발달에 영향을 미치고 행동 변화로 이어지는 방법을 이해합니다. 우리의 전반적인 목표는 개인의 유전적 프로필이 배아 알코올 노출의 영향을 받을 가능성을 더 많이 또는 덜 유발하는지 이해하는 것입니다. 그래서 우리 분야에서는 현재 처리량을 늘리는 자동 추적을 사용하고 있으며 CRISPR 기술과 같은 고급 유전자 편집을 사용하고 있습니다. 이 두 가지를 함께 결합하면 유전자-환경 상호 작용이 어떻게 행동 변화로 이어지는지 더 자세히 해독할 수 있습니다. 그래서 우리가 처음으로 보여줄 수 있었던 것은 제브라피쉬가 태아 알코올 스펙트럼 장애와 관련된 사회적 결함을 모델링하는 데 사용될 수 있다는 것입니다. 과거에는 제브라피쉬를 사용하여 태아기 알코올 노출의 더 심각한 결과를 모델링했습니다. 구체적으로 그것들이 사용된 것은 장기간 높은 알코올 복용량으로 인한 신체적 결함을 찾는 것이었습니다. 한 분야로서, 우리는 제브라피쉬가 태아 알코올 스펙트럼 장애와 관련된 사회적 결함을 모델링하는 데 사용될 수 있는지 여부를 알지 못했습니다. 우리는 매우 짧은 기간 동안 저용량의 알코올을 사용하면 성인 제브라피쉬의 사회적 결함으로 이어진다는 것을 처음으로 보여줄 수 있었습니다.

[강사] 시작하려면 1.4리터 탱크의 너비를 따라 37리터 탱크를 배치합니다. 37리터 탱크의 후면과 바닥을 흰색 골판지 플라스틱으로 덮어 실험 물고기와 배경의 대비를 강화합니다. 그런 다음 골판지 플라스틱을 1.4리터 탱크의 외벽에 배치하여 실험 물고기에 대한 사회적 자극의 대비를 향상시킵니다. 다음으로, 1.4리터와 37리터 수조 사이에 흰색 골판지 플라스틱을 삽입하여 물고기가 서식하는 동안 서로를 볼 수 없도록 합니다. 카메라를 적절한 거리에 배치하여 37리터 탱크의 길이와 1.4리터 탱크의 절반을 캡처합니다. 15와트 T8 전체 스펙트럼 램프가 장착된 수족관 후드 조명을 사용하여 37리터 탱크를 비춥니다. 행동 분석을 수행하기 전에 온라인 무작위 시퀀스 생성기를 사용하여 모든 시험을 무작위화합니다. 그런 다음 행동 분석을 위해 지정된 37리터 탱크에 하우징 랙과 일치하는 물을 채웁니다. 수온이 섭씨 2도 범위 내에서 하우징 랙과 일치하고 모든 탱크의 수위가 동일한지 확인하십시오. 상단과 하단의 37리터 탱크 길이를 따라 5cm 단위로 표시하여 50cm 테스트 탱크에 대해 각각 5cm에 걸쳐 10개의 구역을 만듭니다. 다음으로, 실험 물고기와 같은 코호트에서 수컷 2마리와 암컷 2마리를 선택하여 사회적 자극 역할을 합니다. 그물을 사용하여 하우징 탱크에서 16주 된 실험 물고기를 잡아 물고기 물이 담긴 용기에 넣습니다. 그런 다음 실험용 물고기를 테스트 경기장 중앙에 배치합니다. 20분 평가판을 시작하기 전에 감지 설정이 선택한 소프트웨어에 따라 사용자 기본 설정과 일치하는지 확인하십시오. 처음 10분 동안 37리터 탱크와 1.4리터 탱크 사이에 불투명한 장벽을 유지합니다. 그런 다음 불투명한 장벽을 조심스럽게 제거하여 실험 물고기가 사회적 자극을 볼 수 있도록 합니다. 배아 에탄올 노출은 이 물고기들이 떼에 가까이 이동하지 못했기 때문에 떼 반응을 둔화시켰습니다. 대조군 물고기는 1% 알코올에 노출된 물고기보다 살아있는 여울에 대해 훨씬 더 강한 반응을 보였습니다. 사회적 자극이 있는 상태에서 대조군 물고기는 에탄올 처리된 물고기에 비해 구역 1에서 더 많은 시간을 보냈습니다. 배아 에탄올 노출은 사회적 자극이 존재하지 않을 때 습관화하는 동안 구역 간 그룹 간에 차이가 없기 때문에 이동성을 손상시키지 않았습니다. 사회적 자극이 보이지 않을 때 물고기가 구역 1에서 보내는 시간에는 차이가 없습니다.