Name: 의식이 있는 쥐의 쇄골하 정맥 혈액 샘플링 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-11-03T13:50:00.000+00:00
Duration: 3 min 52 s
Description: 학습하세요 의식이 있는 쥐의 쇄골하 정맥을 이용한 무마취 혈액 샘플링 방법을. 고정 기법과 정맥 천자를 결합하여 신속하고 안전하게 고품질 혈액을 채취하는 효율적인 동물 실험 프로토콜입니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

이 연구는 란저우 대학 제2병원의 Cuiying Plan Project(Grant No. PR0121015) 및 간쑤성 비뇨기계 질환 연구 핵심 연구소(보조금 번호 0412D2).

이 연구는 Guide for the Care and Use of Laboratory Animals13의 8판에 요약된 지침을 준수했습니다. 이 연구는 란저우 대학 제2병원 윤리위원회의 승인을 받았으며 ARRIVE 지침 2.014를 준수하여 문서화되었습니다. 생후 12-16주 된 건강한 위스타 쥐 12마리(수컷 290-330g, 암컷 6마리)를 실제 실험 전 3일 동안 란저우 대학의 GLP 동물 실험실에 수용했습니다. 사용된 쥐 케이지는 545mm x 395mm x 200mm 크기의 R5 유형이었고 오토클레이브 침구 재료가 장착되었습니다. 모든 쥐는 음식과 물을 제한 없이 이용할 수 있었다. 실험실은 평균 습도 25%, 평균 온도 24°C, 낮과 밤이 번갈아 가며 빛의 주기(오전 7:00/오후 7:00)를 유지했습니다. 연구가 끝날 무렵, 모든 동물은 이소플루란을 과다 투여하여 인도적으로 안락사시켰다. 이 연구에 사용된 재료 및 도구에 대한 포괄적인 정보는 재료 표를 참조하십시오.
1. 표본 크기 계산 및 동물 선택
<ol><li>방정식 (1)을 사용하여 동물 표본 크기를 추정하려면 자원 방정식 방법15를 선택합니다. E = 총 동물 수 − 총 그룹 수 (1) 여기서 E 는 분산 분석의 자유도(ANOVA)이며 범위는 10에서 20 사이입니다. 참고: 이 연구에서는 12마리의 동물을 A 와 B 의 두 그룹(그룹당 수컷 3마리, 암컷 3마리)으로 나눴습니다.</li>
	<li>이 연구의 주요 결과를 한 개인이 반복한 혈액 샘플링의 성공률과 시간 소비로 정의합니다.</li>
	<li>2차 결과 측정을 쥐의 체중, 음식 및 물 섭취량의 변화와 부작용(예: 쇄골 골절, 피하 혈종, 기흉 및 사망률)의 발생률로 정의합니다.</li>
	<li>성공적인 혈액 채취를 다음 기준을 충족하는 것으로 정의하십시오: i) 단일 혈액 채취에 대해 3회 미만의 천자; ii) 총 시간(쥐 억제에서 채혈 완료까지)이 5분을 초과하지 않아야 합니다. iii) 맑은 혈장을 얻으면서 목표 혈액량을 달성합니다. 이러한 기준에서 벗어나면 샘플링 실패로 간주합니다.</li>
</ol>2. 동물 구속 및 채혈
참고: A 군과 B 군 쥐의 혈액 샘플은 두 명의 숙련된 연구원에 의해 수집되었으며, 둘 다 최소 100개의 혈액 샘플을 채취했습니다. 혈액 샘플은 4일 동안 총 96회 두 그룹의 쥐로부터 수집되었습니다. 이 채혈 방법은 쥐에 대한 마취나 추가 구속 장치가 필요하지 않습니다. 그러나 능숙한 처리 기술이 필요합니다.
<ol><li>혈액 샘플링 전날(8일차) 오전 00:1에 각 쥐를 개별 케이지에 할당하고 음식과 물의 무게를 잰다. 그런 다음 측정에 눈이 먼 다른 연구원에게 쥐의 체중, 음식 섭취량 및 물 섭취량을 8일차부터 매일 오전 00시에 기록하도록 합니다.</li>
	<li>이 프로토콜을 따르려면 먼저 오전 10:00에 혈액을 채취한 다음 매일 오후 10:00에 양쪽 쇄골하 정맥에서 교대로 0.15mL의 혈액을 수집합니다. 참고: 수집할 혈액의 양은 가장 체중이 가장 적은 쥐가 일주일 이내에 견딜 수 있는 최대 양에 따라 결정되었습니다.</li>
	<li>주사기에 나트륨 헤파린(25U/mL)을 넣고 주사 부위를 알코올로 소독합니다.</li>
	<li>쥐의 뒷 피부를 부드럽게 쓰다듬고 목을 반복해서 꼬집어 쥐가 긴장을 풀 수 있도록 도와줍니다(비디오 1).</li>
	<li>자주 사용하지 않는 손의 엄지와 검지를 사용하여 쥐의 목 피부를 단단히 잡고 들어 올립니다(그림 1A 및 비디오 1).</li>
	<li>주로 사용하는 손의 협응으로 사용하지 않는 손의 나머지 세 손가락과 손바닥을 사용하여 쥐의 뒷 피부를 고정하고 앞다리를 고정합니다(그림 1B, C 및 비디오 2). 알림: 쥐가 저항하거나 몸부림치면 이 절차를 여러 번 반복하여 쥐가 취급에 익숙해지도록 도울 수 있습니다. 다음 단계는 성공적인 혈액 채취의 핵심입니다.</li>
	<li>주로 사용하지 않는 손의 검지 손가락을 사용하여 쥐의 머리 피부를 부드럽게 누르고 다른 손가락은 손바닥과 함께 어깨 관절을 바깥쪽으로 회전시키는 데 도움을 줍니다. 이 과정에서 주로 사용하는 손을 사용하여 쥐의 어깨 관절을 완전히 펼칩니다(그림 1D-F 및 비디오 2).</li>
	<li>주로 사용하지 않는 손으로 쥐를 단단히 잡고 쥐의 머리와 몸을 일직선으로 정렬합니다(그림 1G,H). 그런 다음 주로 사용하는 손을 사용하여 쇄골의 위치를 찾고 천자 부위를 확인합니다(그림 1I, 비디오 2 및 비디오 3). 알림: 쥐를 면도할 필요는 없습니다. 그림 1에서 면도는 쇄골과 펑크 위치를 더 많이 보여주기 위해서만 수행되었습니다. 쥐, 특히 쥐>350g)를 제지할 때 쥐가 단단한 표면에 발을 올려놓으면 체중을 지탱하는 데 도움이 됩니다. 또한 구속 장치는 혈액을 채취하는 동안 각 쥐의 호흡수를 모니터링하여 구속이 너무 꽉 조여져 호흡 곤란을 유발할 수 있는지 확인해야 합니다.</li>
	<li>주사기를 쥐의 몸과 평행하게 잡고 바늘 끝이 위쪽을 향하고 주사기 눈금이 실험자를 향하도록 하여 쥐 몸의 정중선과 약 15° 각도를 유지합니다. 쇄골 노치 아래 0.5cm(쇄골과 흉골의 근위 3분의 1이 만나는 지점)에 바늘을 삽입하여 바늘이 쥐의 몸과 평행을 유지하도록 합니다(그림 1J 및 비디오 3). 알림: 혈관을 뚫거나 인접 혈관에 부주의한 손상을 입히지 않도록 바늘 삽입의 각도와 깊이에 특별한 주의를 기울여야 합니다.</li>
	<li>주사기를 약간 당겨 음압을 생성하며, 종종 혈관에 들어갈 때 뚜렷한 돌파감을 동반합니다(특히 초기 채혈 중에 뚜렷함). 이 자세를 유지하고 필요에 따라 일정한 속도로 0.1-1.0mL의 혈액을 수집합니다(주당 약 4-5.3mL/kg의 혈액에 대한 IACUC 지침1에 따름)(그림 1K 및 비디오 3).</li>
	<li>찔렀을 때 피가 나오지 않으면 바늘의 각도와 깊이를 부드럽게 조정하거나 주사기를 부드럽게 돌려 보십시오(비디오 3). 같은 쪽에서 세 번 연속으로 시도해도 실패하면 모든 출혈을 멈춘 다음 반대쪽으로 전환하여 구멍을 뚫습니다. 알림: 쥐가 불편함으로 인해 고군분투하는 것을 방지하기 위해 피부를 통해 빠르게 구멍을 뚫는 것이 좋습니다.</li>
	<li>지혈을 위해 면봉을 바르고 쥐를 우리로 되돌립니다(비디오 4).</li>
	<li>실험 요구 사항에 따라 혈액 샘플을 처리합니다.</li>
</ol>3. 혈액 샘플 처리
<ol><li>주사기 바늘을 날카로운 물건 용기에 버리십시오. 수집된 혈액을 이전에 헤파린으로 헹군 1.5mL 미세 원심분리기 튜브로 옮깁니다. 튜브를 원심분리기에 넣고 4°C 및 1,200 x g으로 설정하고 10분 동안 원심분리하여 혈장을 분리합니다. 1.0mL 파스퇴르 피펫을 사용하여 혈청을 깨끗한 마이크로 원심분리기 튜브에 옮기고 -80°C에서 보관합니다. 알림: 압력으로 인한 용혈을 방지하려면 필요한 경우 바늘 끝을 제거하십시오. 혈장 흡인 중에는 튜브 바닥에서 혈액 세포를 뽑지 마십시오. 때때로 주사기 표면에 쥐 털이 모일 수 있습니다. 응고를 유발할 수 있으므로 털이 튜브에 들어가지 않도록 주의하십시오.</li>
</ol>4. 통계 분석
<ol><li>모든 데이터를 평균 ± 표준편차로 표시하고 분산의 균질성을 검정합니다.</li>
	<li>Fisher의 정확 검정을 사용하여 그룹 간의 성공률을 비교합니다.</li>
	<li>2표본 독립 t-검정을 사용하여 두 그룹 간의 전체 평균을 비교합니다.</li>
	<li>혈액 샘플링 시간, 체중, 음식 섭취 및 물 소비량과 같은 연속 측정을 위해 분산 분석(ANOVA)을 사용합니다. P < 0.05를 통계적으로 유의하다고 가정하겠습니다.</li>
</ol>

의식이 있는 쥐에서 반복적인 혈액 수집을 위한 쇄골하 정맥 천자 방법

<ol><li>UCSF Office of Research Institutional Animal Care and Use Program. Blood collection: The rat IACUC Guideline. , https://iacuc.ucsf.edu/sites/g/files/tkssra751/f/wysiwyg/GUIDELINE%20-%20Blood%20Collection%20-%20Rat.pdf (2022).</li>
<li>Hattori, N., Takumi, A., Saito, K., Saito, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+serial+cervical+or+tail+blood+sampling+on+toxicity+and+toxicokinetic+evaluation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Toxicological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Effects of serial cervical or tail blood sampling on toxicity and toxicokinetic evaluation in rats.</a> The Journal of Toxicological Sciences. 45 (10), 599-609 (2020).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+blood+collection+from+tail+veins+of+non-anesthetized+mice+with+a+vacuum+blood+collection+system+and+eyeglass+magnifier%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Modified blood collection from tail veins of non-anesthetized mice with a vacuum blood collection system and eyeglass magnifier.</a> Journal of Visualized Experiments. (144), e65513(2019).</li>
<li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeated+blood+collection+from+tail+vein+of+non-anesthetized+rats+with+a+vacuum+blood+collection+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Repeated blood collection from tail vein of non-anesthetized rats with a vacuum blood collection system.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), e55852(2017).</li>
<li>Charlès, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+tail+vein+and+penile+vein+puncture+for+blood+sampling+in+the+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Modified tail vein and penile vein puncture for blood sampling in the rat model.</a> Journal of Visualized Experiments. (196), e65513(2023).</li>
<li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repetitive+blood+sampling+from+the+subclavian+vein+of+conscious+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Repetitive blood sampling from the subclavian vein of conscious rat.</a> Journal of Visualized Experiments. (180), e63439(2022).</li>
<li>Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subclavian+vein+puncture+as+an+alternative+method+of+blood+sample+collection+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Subclavian vein puncture as an alternative method of blood sample collection in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (141), e58499(2018).</li>
<li>Tochitani, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+microsampling+on+toxicity+assessment+of+hematotoxic+compounds+in+a+general+toxicity+study+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Toxicological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Effects of microsampling on toxicity assessment of hematotoxic compounds in a general toxicity study in rats.</a> The Journal of Toxicological Sciences. 47 (7), 269-276 (2022).</li>
<li>Harikrishnan, V. S., Hansen, A. K., Abelson, K. S., Sørensen, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+various+methods+of+blood+sampling+in+mice+and+rats%3A+Effects+on+animal+welfare%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">A comparison of various methods of blood sampling in mice and rats: Effects on animal welfare.</a> Laboratory Animals. 52 (3), 253-264 (2018).</li>
<li>Yokoyama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+toxicological+influences+by+microsampling+%2850+%C2%B5L%29+from+jugular+vein+of+rats+in+a+collaborative+28-day+study%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Toxicological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Lack of toxicological influences by microsampling (50 µL) from jugular vein of rats in a collaborative 28-day study.</a> The Journal of Toxicological Sciences. 45 (6), 319-325 (2020).</li>
<li>Korfmacher, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utility+of+capillary+microsampling+for+rat+pharmacokinetic+studies%3A+Comparison+of+tail-vein+bleed+to+jugular+vein+cannula+sampling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">Utility of capillary microsampling for rat pharmacokinetic studies: Comparison of tail-vein bleed to jugular vein cannula sampling.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 76, 7-14 (2015).</li>
<li>Lu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microsurgical+skills+of+establishing+permanent+jugular+vein+cannulation+in+rats+for+serial+blood+sampling+of+orally+administered+drug%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Microsurgical skills of establishing permanent jugular vein cannulation in rats for serial blood sampling of orally administered drug.</a> Journal of Visualized Experiments. (178), e63167(2021).</li>
<li>National Research Council of the National Academies, Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+Care+and+Use+of+Laboratory+Animals%22">Guide for the Care and Use of Laboratory Animals</a>. , 8th edition, National Research Council, Washington D.C., USA. https://grants.nih.gov/grants/olaw/guide-for-the-care-and-use-of-laboratory-animals.pdf (2011).</li>
<li>Perciedu Sert, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ARRIVE+guidelines+2.0%3A+updated+guidelines+for+reporting+animal+research%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">The ARRIVE guidelines 2.0: updated guidelines for reporting animal research.</a> The Journal of Physiology. 598 (18), 3793-3801 (2020).</li>
<li>Charan, J., Kantharia, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+calculate+sample+size+in+animal+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+%26+Pharmacotherapeutics%22%5BJournal%5D)">How to calculate sample size in animal studies.</a> Journal of Pharmacology & Pharmacotherapeutics. 4 (4), 303-306 (2013).</li>
<li>Turner, P. V., Pang, D. S., Lofgren, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+pain+assessment+methods+in+laboratory+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Medicine%22%5BJournal%5D)">A review of pain assessment methods in laboratory rodents.</a> Comparative Medicine. 69 (6), 451-467 (2019).</li>
<li>Kurata, M., Misawa, K., Noguchi, N., Kasuga, Y., Matsumoto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+blood+collection+imitating+toxicokinetic+study+on+rat+hematological+parameters%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Toxicological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Effect of blood collection imitating toxicokinetic study on rat hematological parameters.</a> The Journal of Toxicological Sciences. 22 (3), 231-238 (1997).</li>
<li>Zeller, W., Weber, H., Panoussis, B., Bürge, T., Bergmann, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refinement+of+blood+sampling+from+the+sublingual+vein+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Refinement of blood sampling from the sublingual vein of rats.</a> Laboratory Animals. 32 (4), 369-376 (1998).</li>
</ol>

저자는 공개할 관련 재정적 또는 비재정적 이해관계가 없습니다.

꼬리 정맥 채혈은 쥐의 반복 혈액 채취를 위한 가장 일반적인 방법이지만, 마취제의 영향을 받을 수 있으며, 꼬리 정맥의 크기가 작기 때문에 한 번에 채취할 수 있는 혈액의 양이 제한되어 채혈 시간이 길어진다 4,5. 쥐 꼬리 정맥의 모세관 마이크로샘플링(CMS)과 결합된 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)-탠덤 질량분석법(MS/MS) 시스템은 쥐에서 사용되는 혈액의 양을 줄일 수 있지만11, 모든 기관이 이 고가의 장비를 갖추고 있는 것은 아니다. 후구신경총/부비동에서 채취한 혈액 채취는 종종 쥐에게 불안과 통증을 유발하며, 부적절한 수술은 쥐의 시력과 건강을 손상시킬 수도 있습니다. 따라서 이 방법은 쥐의 혈액 채취에는 권장되지 않는다9.
쇄골하 정맥은 쥐의 대흉근과 삼각근 사이에 위치하...

<a href="https://app.jove.com/t/6595">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/66075">10.3791/66075</a>

An erratum was issued for: <a href="https://www.jove.com/t/66075">Subclavian Vein Blood Sampling in Conscious Rats</a>. The Discussion section was&#160;updated.

Erratum: Subclavian Vein Blood Sampling in Conscious Rats

쥐는 가장 흔한 실험 동물 중 하나이며 혈액 샘플을 얻는 방법에는 여러 가지가 있습니다. 최종 단계에서 단일 채혈을 포함하는 실험의 경우, 심장 천자 또는 복부 대동맥 채혈을 통해 충분한 양의 혈액을 얻을 수 있다1. 그러나 일부 연구에서는 일상적인 혈액 또는 생화학적 분석을 위해 쥐의 반복적인 혈액 채취가 필요하며,특히 약물의 흡수, 분포 및 대사를 결정하기 위해 반복적인 혈액 채취가 필요한 약동학 및 독성학 연구에서 2.
현재 꼬리 정맥 채혈이 쥐의 혈액 채취에 가장 일반적인 방법이지만 마취가 필요하지 않음에도 불구하고 이 방법은 반복적인 채혈이 어려울 수 있으며 채혈된 혈액의 양은 상대적으로 적습니다 3,4. 또한 복재정맥과 음경정맥에서 혈액을 채취할 수 있지만 채취하는 혈액의 양이 제한되어 있어 마취가 필요하다 1,5. 또한, 턱밑 정맥총과 설하정맥, 경정맥 및 쇄골하 정맥에서 채취한 혈액 샘플은 더 높은 품질의 샘플을 제공하지만, 일반적으로 마취 또는 여러 사람의 도움이 필요하다 1,6,7,8,9. 마지막으로, 후안와동/관내 채혈은 마취를 필요로 할 뿐만 아니라 잠재적으로 쥐에게 부상과 스트레스를 유발할 수 있다9.
일반적으로 주요 정맥에서 채취한 혈액 샘플의 품질은 일반적으로 최고 수준이다1. 현재, 일부 연구에서는 경정맥을 통한 연속 미세 샘플링이 쥐의 독성 연구에 매우 적합한 방법임이 밝혀졌지만, 이 방법은 일반적으로 경정맥 카테터 삽입을 필요로 한다 10,11,12. 따라서 외과적 개입 없이 동물 연구의 3R 원칙에 따라 고품질 혈액 샘플을 얻는 방법을 탐구할 가치가 있습니다. 이 연구의 목적은 쥐의 쇄골하 정맥에서 혈액을 효율적으로 추출하는 방법을 제시하는 것이었습니다. 이 기술을 사용하면 마취 없이 한 사람 절차를 통해 만족스러운 샘플을 신속하게 수집할 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>0.75% 생리식염수</td><td>Gansu Fuzheng Pharmaceutical Technology Co., Ltd.</td><td>&엠대시; &엠대시;</td><td>준비된 헤파린 나트륨 용액</td></tr><tr><td>1 mL 파스퇴르 피펫&nbsp;</td><td>Biosharp</td><td>BS-XG-01-NS</td><td>채혈</td></tr><tr><td>1mL 주사기(26G, 0.45mm x 12mm)</td><td>신바의료기기 주식회사</td><td>0.45*12RWLB</td><td>혈액 수집&nbsp;</td></tr><tr><td>1.5 mL Eppendorf tube</td><td>Biosharp</td><td>BS-15-M</td><td>혈액 저장 및 수집</td></tr><tr><td>75% 의료용 알코올</td><td>Shandong Lircon Medical Technology Co., Ltd.</td><td>&엠대시; &엠대시;</td><td>쥐의 혈액 채취 장소 소독</td></tr><tr><td>원심분리기 튜브 홀더</td><td>Biosharp</td><td>BS-05/15-SM60</td><td>&mdash; &엠대시;</td></tr><tr><td>전자 저울</td><td>Shanghai PUCHUN Measure Instrument Co., Ltd.</td><td>JE1002</td><td>무게</td></tr><tr><td>헤파린 나트륨 주입</td><td>Hebei Changshan Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>&엠대시; &엠대시;</td><td>주사기와 EP 튜브를 헹굽니다. 일반 식염수로 25 U/mL로 희석합니다.</td></tr><tr><td>저온 원심 분리기</td><td>HuNan Xiang Yi 원심 분리기 기기&nbsp; Co., Ltd.</td><td>&nbsp; H1750R</td><td>세럼 분리</td></tr></tbody></table>

의식이 있는 쥐의 쇄골하 정맥 혈액 샘플링

Subclavian Vein Blood Sampling in Conscious Rats

쥐로부터 반복적인 혈액 샘플을 얻기 위한 몇 가지 확립된 방법이 있으며, 가장 일반적으로 사용되는 방법은 마취 없는 측면 꼬리 정맥 샘플링과 마취를 통한 경정맥 샘플링입니다. 그러나 이러한 방법의 대부분은 도움과 마취 장비가 필요하며 때로는 혈액 채취 또는 혈액 샘플의 품질이 좋지 않은 측면에서 어려움을 겪습니다. 또한 이러한 채혈 방법은 많은 수의 쥐에 대해 반복적인 혈액 샘플링이 필요할 때 상당한 시간과 인적 자원을 소비합니다. 이 연구는 숙련된 단일 개인이 마취되지 않은 쥐에서 반복적인 혈액 샘플링 기술을 제시합니다. 매우 만족스러운 혈액 샘플은 쇄골하 정맥에 구멍을 뚫어 얻을 수 있습니다. 이 방법은 쥐 억제에서 채혈 완료까지 평균 2분에 불과한 95%의 인상적인 전체 성공률을 보여주었습니다. 또한 지정된 범위 내에서 연속적인 채혈을 수행해도 쥐에게 해를 끼치 지 않습니다. 이 방법은 특히 대규모 약동학 연구에서 혈액 수집을 위해 홍보할 가치가 있습니다.

고품질 플라즈마 표본은 그림 2A와 같이 옅은 노란색 색조, 투명도 및 투명도를 나타내며 붉은 색조나 응고가 없습니다. 그림 2B 는 각각 부적절한 시술로 인한 용혈(왼쪽) 또는 응고(오른쪽)를 보여줍니다. 4일 이내에 96회의 채혈 세션 동안 그룹 A 와 B 의 평균 단일 채혈 시간은 각각 119.87초± 33.62초, 123.28초± 30.96초였습니다. 두 그룹 간의 채혈 시간은 매일 유의한 차이가 없었다(t =0.66, P =0.54, 표 1). 가장 짧은 개별 채혈 시간은 각각 78초와 89초였습니다.
성공적인 단일 혈액 채취에 필요한 평균 시도 횟수는 그룹 A와 B에서 각각 1.21...

여기에서는 마취 없이 쥐에서 빠르고 안전하며 반복적인 채혈을 가능하게 하는 효과적인 쥐 제한과 쇄골하 정맥 천자 방법의 조합을 제시합니다.

There are several established methods for obtaining repeated blood samples from rats, with the most commonly employed methods being lateral tail vein ...

우리 연구의 범위는 쥐의 혈액 샘플을 수집하기 위한 감염 방법론을 고안하는 데 중점을 둡니다. 우리의 목표는 최소한의 인력과 자원을 활용하여 우리의 원칙에 부합하는 신속하고 정해진 절차를 보장하는 것입니다. 현재 실험적 과제 중 하나는 최적의 혈액 수집을 위해 피부 표면에 근접하게 둘러싸인 쇄골하 정맥을 동시에 유지하는 방식으로 쥐를 효과적으로 고정시키는 것입니다.우리 프로토콜의 장점은 쥐를 마취하지 않고도 사람이 고품질 혈액 샘플을 신속하게 얻을 수 있다는 것입니다.

subclavian-vein-blood-sampling-in-conscious-rats

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

혈액 샘플은 생체 내 생리학적 상태나 질병의 바이오마커를 평가하는 데 유용합니다. 여기에서는 쥐의 측면 꼬리 정맥에서 혈액을 샘플링하는 방법론을 설명합니다. 이 방법은 최소한의 통증과 침습성으로 빠른 샘플을 제공합니다.

쥐의 측면 꼬리 정맥에서 혈액을 샘플링

여기, 비 취 쥐 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 간단한 꼬리 정 맥 혈액 샘플링 방법을 설명 합니다. 이 방법은 혈액에 직접 노출의 위험을 감소 하 고 단일 venipuncture에서 여러 샘플을 채 취하고 단순화 합니다.

진공 혈액 수집 시스템으로 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈액 컬렉션 반복

여기, 선물이 쥐 하 정 맥에서 혈액 샘플을 수집 하는 프로토콜.

쥐에서 혈액 샘플 컬렉션의 대체 방법으로 빵 꾸 하 정 맥

여기서, 우리는 마우스의 쇄 골 정 맥 으로부터 혈액 샘플을 채취 하는 프로토콜을 제시 한다.

생쥐의 쇄 골 정 맥 천자를 통한 혈액 채취

상세한 미세외과 기술은 동일한 동물에서 순차적 혈액 수집을 위한 장기 경정맥 캐뉼레이션 래트 모델을 확립하기 위해 입증된다. 생리학적 및 혈액학적 파라미터는 래트의 회복 단계 동안 모니터링되었다. 이 모델은 동물 스트레스를 유발하지 않고 경구 투여된 폴리페놀의 약동학 연구에 적용되었다.

경구 투여 약물의 연속 혈액 샘플링을 위해 쥐에서 영구적 인 경정맥 절개술을 확립하는 미세 외과 기술

본 프로토콜은 쥐의 쇄골 하 정맥으로부터 혈액을 수집하는 간단하고 효율적인 방법을 기술한다. 마취 없이 빠르고 시기적절하며 쉽게 식별할 수 있는 샘플링이 가능하며 반복적인 샘플 수집을 통해 고품질 혈액을 얻을 수 있습니다.

의식 쥐의 쇄골 하 정맥에서 반복적 인 혈액 샘플링

인슈린 과다 - euglycemic 클램프은 인슐린 작용의 평가에 대한 "황금 표준"입니다. 인슐린은 포도당의 이해를 자극 일정한 속도로 주입합니다. 이 드롭에 대응하기 위해 주입 외인성 포도당의 양은 인슐린 감도 나타내는 것입니다. 여기 절차는 의식, 억제 쥐에서 수행됩니다.

의식 랫에서 인슈린 과다 - Euglycemic 클램프

인슈린 과다 - euglycemic 클램프, 또는 인슐린 클램프는 인슐린 행동을 평가하기위한 황금...

의식 억제 마우스에 인슈린 과다 - euglycemic 클램프

쥐에서 혈관의 만성 catheterization는 종종 일정 기간 동안 또는 직접 의식 혈압 측정을위한 혈액 샘플을 얻을, 물질의 관리가 필요합니다. 의식이 동물에서 혈압의 쥐 및 해당 측정의 대퇴 동맥 catheterization을 증명합니다.

혈액 샘플링, 마약 관리 및 의식 검사 중 혈압과 심장 박동을 측정 대퇴 동맥혈과 정맥 Catheterization

Neointimal 증식이 arterialized 정맥의 협착의 주요 원인입니다. 우리는 오른쪽 바깥목 정맥은 Sprague Dawley 쥐 온목 동맥에 커프 기술을 사용하여 이식되어 상기 새로운 프로토콜을 제안합니다. 생존 속도는 희생의 시점에서 100 %이다.

쥐 온목 동맥에 개재 외부 경정맥 정맥 이식의 : 정교한 Microsurgical 기술을 교육

학습하세요 의식이 있는 쥐의 쇄골하 정맥을 이용한 무마취 혈액 샘플링 방법을. 고정 기법과 정맥 천자를 결합하여 신속하고 안전하게 고품질 혈액을 채취하는 효율적인 동물 실험 프로토콜입니다.

의식이 있는 쥐의 쇄골하 정맥 혈액 샘플링

더 많은 동영상 탐색