자궁내막종과 관련된 불임을 연구하기 위한 실험적 마우스 모델 수립

우리 연구의 범위는 자궁내막종 관련 불임의 기저에 있는 메커니즘을 이해하는 데 중점을 두고 있습니다. 우리는 자궁내막종을 시뮬레이션하는 마우스 모델을 개발하고 그것이 생식력에 미치는 영향을 조사함으로써 지식의 격차를 해소하는 것을 목표로 합니다. 자궁내막증 연구 분야에서 최근 발전에는 자궁내막증의 근본적인 분자 메커니즘 이해의 발전, 진단 및 치료를 위한 새로운 마커 식별, 자궁내막종과 같은 특정 하위 유형을 연구하기 위한 혁신적인 모델 개발이 포함됩니다. 이러한 발전은 자궁내막증에 대한 지식과 잠재적인 치료 전략을 향상시키는 데 기여합니다. 자궁내막종 연구의 현재 실험적 과제에는 신뢰할 수 있는 동물 모델의 부족, 병인 및 생식력 영향에 대한 제한된 이해, 재발 연구 및 진단 테스트의 필요성 등이 포함됩니다. 자궁내막종 마우스 모델과 연구 결과의 통합은 이러한 문제를 해결하고 이 분야를 발전시킵니다.

우리의 프로토콜은 다른 기술에 비해 뚜렷한 이점을 제공합니다. 특히 자궁내막종을 모방하는 데 중점을 두고 있지만 이 방법으로 다른 하위 유형은 확립되지 않았습니다. 높은 성공률로 유전자 변형이 가능하고 인간과 유사한 생식 특성을 복제하므로 자궁내막종 관련 불임을 연구하는 데 유용한 도구가 됩니다. 우리의 발견은 자궁내막증 연구의 새로운 시대를 위한 길을 열었습니다. 오랜 격차를 메움으로써 우리 모델은 혁신적인 통찰력을 약속하고 자궁내막종에 대한 이해, 치료 및 잠재적으로 예방에 혁명을 일으킵니다. 재발 및 진단 연구 결과를 통합함으로써 우리의 연구는 자궁내막증 연구 및 환자 치료의 더 넓은 맥락을 향상시킵니다.

[해설자] 수컷 페로몬이 함유된 침구를 채취한 후 암컷 쥐 케이지에 48시간 동안 도입합니다. 페트리 접시에 PBS 10밀리리터를 붓고 면봉의 한쪽 끝을 담가 액체를 흡수합니다. 케이지에서 쥐 한 마리를 부드럽게 꺼내 뚜껑 위에 올려 놓습니다. 적신 면봉을 질에 조심스럽게 삽입하고 면봉을 동물의 몸의 장축을 기준으로 45도 부드럽게 회전시킵니다. 질 발광벽에서 세포를 채취한 후 면봉을 조심스럽게 빼냅니다. 깨끗하고 미리 라벨이 붙은 유리 슬라이드에 면봉 끝을 부드럽게 굴려 수집된 세포를 옮깁니다. 발정기를 나타내는 각질화된 상피 세포의 존재에 대해 현미경으로 슬라이드를 검사합니다. 시작하려면 기증자가 안락사한 발정기 암컷 마우스의 복부 부위를 70% 에탄올로 소독합니다. 멸균 수술용 가위를 사용하여 복막 정중선을 따라 1cm 절개를 하여 근육층을 노출시킵니다. 그런 다음 다른 가위를 사용하여 근육층을 자르고 골반강을 드러냅니다. 집게의 끝을 닫고 뭉툭한 중앙 부분을 사용하여 장을 부드럽게 들어 올립니다. 자궁을 찾은 후 자궁 뿔 전체를 멸균 해부하여 양쪽 자궁 뿔을 제거합니다. 절제된 조직을 PBS가 들어 있는 페트리 접시에 넣고 과도한 지방 조직을 제거합니다. 멸균 메스를 사용하여 조직을 1mm 입방체 조각으로 세밀하게 해부합니다. 조직을 촉촉하게 유지하기 위해 주기적으로 PBS를 첨가하십시오. 마취된 수혜자 마우스를 멸균 수술 보드 위에 바로 누운 자세로 놓습니다. 뒷다리를 부드럽게 조작하여 피부 아래에 뼈가 돌출되어 있는 것을 느껴 수술 부위를 식별합니다. 70% 에탄올 면봉으로 수술 부위를 소독한 다음 베타딘으로 소독합니다. 선택한 부위에서 3mm에서 5mm 사이의 정확한 측면 절개를 합니다. 주로 사용하지 않는 손 겸자로 난소를 안정화하고 100마이크로리터의 PBS를 난소 활액낭에 주입하여 약간의 분리를 관찰합니다. 활액낭에 작은 슬릿을 만들고 마이크로 겸자를 사용하여 1mm 입방체의 자궁 조직 조각을 이식합니다. 수술 후 흡수성 봉합사로 근육층을 봉합하고 비흡수성 봉합사로 피부를 봉합합니다. 4주 후, 이식된 수혜자 마우스를 하우징 케이지에서 제거합니다. 안락사된 수혜자 마우스를 정중선 절개하고 장기 검사를 위해 복강을 노출시킵니다. 외부 자궁내막증 병변이 있는지 복강을 철저히 검사하십시오. 그런 다음 사진을 찍기 위해 눈에 보이는 병변이 있는 난소를 추출합니다. 병변이 있는 난소를 10% 중성 완충 포르말린으로 고정합니다. 조직 절편을 절편화하고 슬라이드에 장착한 후 슬라이드 자일렌 용액을 배치하여 파라핀을 제거합니다. 슬라이드를 일련의 감소하는 에탄올 농도에 배치하여 조직 절편을 재수화합니다. 조직 절편을 실온에서 5-10분 동안 1% 요오산으로 처리합니다. 그런 다음 슬라이드를 증류수로 철저히 헹구어 잔류 요오드산을 제거합니다. 이제 15분 동안 이동 용액으로 조직 절편을 염색합니다. 슬라이드를 뜨거운 수돗물로 헹구어 여분의 얼룩을 제거한 다음 증류수로 헹굽니다. Mayer의 헤마트톡실린으로 조직 절편을 2-3분 동안 대조염색합니다. 블루잉 시약을 30초 동안 바르기 전에 흐르는 수돗물로 슬라이드를 헹굽니다. 증류수로 슬라이드를 헹군 후 에탄올 농도를 증가시켜 절편을 탈수합니다. 섹션을 자일렌에 담그고 투명하게 만듭니다. 섹션에 장착 매체를 바르고 기포를 피하면서 덮개 슬립을 부드럽게 놓습니다. 건조 후 광택 현미경으로 슬라이드를 검사하여 난소의 자궁내막증을 확인하는 자궁내막선, 간질 및 출혈성 낭종의 존재 여부를 검사합니다. 가짜 대조군과 비교하여 자궁내막군에서 이식 후 4주 후에 난소 형태와 관련하여 이소성 자궁내막 낭성 성장이 관찰되었습니다. 추가 조직병리학적 조사를 통해 자궁내막군에서 이소성 자궁내막 조직의 성공적인 이식이 확인되었습니다.