Organoids에서 Bioluminescence Reporter를 사용한 Circadian Oscillations 모니터링

대부분의 유기체에 존재하는 일주기 리듬은 생물학적 과정의 시간적 조직을 조절합니다. 3D 오가노이드는 최근 생리학적으로 유의미한 in vitro 모델로 부상했습니다. 이 프로토콜은 생물 발광 리포터를 사용하여 오가노이드의 일주기 리듬을 관찰하는 방법을 설명하며, 이를 통해 다세포 시스템의 일주기 리듬에 대한 체외 조사를 가능하게 합니다.

우리의 현재 연구 범위는 장 상피 세포 증식 및 분화에서 일주기 리듬의 역할을 조사하는 것입니다. 우리는 생체 시계가 세포 증식과 장 줄기 세포로부터의 분화를 조절하는지 여부를 확인하려고 합니다. 이 프로토콜은 생물 발광 분석을 사용하여 3차원 오가노이드의 일주기 연구를 위한 실시간 모니터링 방법을 제시합니다.

기존의 2차원 세포 배양에서 생물 발광 분석을 수행하는 것과 달리, 이 접근 방식을 사용하면 생리학적으로 더 관련성이 높은 오가노이드 모델에서 일주기 리듬과 그 기능을 조사할 수 있습니다. 우리의 발견은 줄기 세포가 풍부한 조건에서 방해받은 일주기 리듬을 보여주는 동시에 분화된 인간 장 오가노이드에서 강력한 일주기 진동을 보여주며, 이는 줄기 세포에서 분화된 세포로 생체 시계 기계의 리모델링을 시사합니다. 환자 유래 오가노이드를 일주기 생물 발광 리포터와 함께 사용하면 말초 장기 및 다양한 질병 상태의 일주기 리듬에 대한 이해를 높이는 데 도움이 될 것입니다.