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쥐 쇄골 상갈색 지방 조직의 해부, 조직학적 처리 및 유전자 발현 분석
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JoVE Journal Biology
Dissection, Histological Processing, and Gene Expression Analysis of Murine Supraclavicular Brown Adipose Tissue

쥐 쇄골 상갈색 지방 조직의 해부, 조직학적 처리 및 유전자 발현 분석

Full Text
3,245 Views
06:50 min
March 29, 2024

DOI: 10.3791/66475-v

Mark G Waterstraat1,2, ZiYi Wang1, Mari Kogiso1, Rommel Caballero-Juarez1,2, Miao-Hsueh Chen1

1Children's Nutrition Research Center, Department of Pediatrics,Baylor College of Medicine, 2Department of BioSciences,Rice University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study provides a detailed protocol for the dissection of supraclavicular brown adipose tissue (scBAT) from mice, which is deemed a valuable model for analyzing brown fat due to its anatomical similarities to human brown adipose tissue. The focus is on improving accessibility to scBAT research through precise dissection and subsequent histological and gene expression analyses.

Key Study Components

Research Area

  • Supraclavicular brown adipose tissue (scBAT)
  • Gene expression analysis
  • Histological techniques

Background

  • scBAT is recognized for its potential importance in metabolic research.
  • The anatomical proximity to major veins poses challenges in dissection.
  • A need for accessible and accurate extraction methods has been identified.

Methods Used

  • Dissection using a microscope for precision.
  • Gene expression analysis following tissue homogenization.
  • Hematoxylin and eosin staining for histological assessment.

Main Results

  • The protocol described improves extraction efficiency and the quality of gene expression data.
  • scBAT displays characteristic tissue structures found in brown adipose tissue.
  • The study lays groundwork for understanding scBAT's genetic lineage and physiological roles.

Conclusions

  • This protocol enables more effective research into the roles of scBAT in metabolism.
  • The findings contribute to the broader field of adipose tissue biology.

Frequently Asked Questions

What is supraclavicular brown adipose tissue (scBAT)?
scBAT is a specific type of brown fat located near the clavicles, significant for its metabolic functions.
Why is scBAT important for research?
Due to its anatomical similarities to human brown adipose tissue, scBAT serves as an excellent model for studying metabolic processes.
What challenges exist when dissecting scBAT?
The small size and its location near major veins can complicate the dissection process.
How does the protocol increase extraction efficiency?
It employs a dissecting microscope for enhanced precision and utilizes tissue homogenization to improve RNA yield.
What are the key techniques used in the study?
The study uses dissection, histological staining, and gene expression analysis techniques.
What are the main findings regarding scBAT's cellular structure?
Hematoxylin and eosin staining confirmed the presence of typical brown adipose tissue characteristics in scBAT samples.
What future research directions does this study suggest?
The study suggests defining the genetic lineage and physiological functions of scBAT, as well as developing ex-vivo models for further research.

여기에서는 쥐 쇄골 상부 갈색 지방 조직의 조직학적 및 유전자 발현 분석을 해부하고 수행하기 위한 실용적인 절차를 제공합니다.

1 우리 연구실은인간의 갈색 지방 조직과의 해부학적 유사성5으로 인해 2 쇄골상상 갈색 지방 조직3 또는 SCBAT4를 갈색 지방 분석을 위한 귀중한 저장소4로 확립하는 데 중점을 두고 있습니다. 6 이 프로토콜은 접근성을 높이는 것을 목표로 합니다. 7 SCBAT 연구의 7. 8 이 디포는 크기가 작고9 목의 큰 정맥에 근접해 있기 때문에 위협적일 수 있습니다. 10 따라서 11에 SCBAT를 추출하고 처리하는 간단한 방법을 제공하는 것이 필수적입니다.

12 우리의 방법론은SCBAT를 추출할 때 13 첫째로 해부 현미경(14)을 사용하여 두드러집니다. 15 이것은 정밀도(16)와 추출 효율(17)을 증가시키는데, 이 두 가지 모두 이러한 작은 조직 저장소(tissue depot)18로 작업할 때 매우 중요하다. 19 둘째, 유전자 발현 분석(21)을 수행하기 전에 냉동 SCBAT 샘플(20)을 균질화하여 RNA 수율을 증가시켜 22의 사용 가능한 조직 수가 적다는 것을 보상했습니다.

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