쥐의 척수강내 카테터 삽입을 위한 수정된 방법

척수강내 카테터 삽입은 동물 실험, 특히 신경병증성 통증에 대한 실험에 널리 적용되어 왔습니다. 그러나 전통적인 방법에는 여전히 몇 가지 제한 사항이 있습니다. 일부 연구자들이 전통적인 방법을 개선하려고 시도했지만 사용 가능한 방법은 여전히 수정해야 합니다.

여기에서, 우리는 약물의 반복적인 척수강내 투여를 위한 간단하고 편리하며 신뢰할 수 있는 접근법을 대표하는 쥐의 척수강내 카테터 삽입을 위한 수정된 방법을 소개합니다. 15cm 길이의 PE10 튜브를 준비합니다. 두 개의 광택 끝이 있는 20cm 길이의 스테인리스강 와이어를 PE10 튜브에 지지대로 삽입하고 튜브를 한쪽 끝에서 2cm 표시합니다.

22G 바늘의 날카로운 끝을 자르고 한 쌍의 집게로 말단 끝을 밀봉합니다. 경막외 카테터를 1cm 조각으로 자릅니다. 그런 다음 이 조각을 날카로운 22G 바늘에 삽입하고 한 쌍의 가열된 직선 집게로 말단 끝을 밀봉합니다.

이 장치는 튜브 밀봉 캡이라고 불렸습니다. 0.3cm x 0.5cm 항알레르기 밴드를 가위로 준비합니다. 수술 전에 멸균된 척수강내 카테터 삽입을 위한 기구를 준비합니다.

톱니가 있는 집게, 가위, 가위 장치, 메스 손잡이 및 번호 10 칼날이 포함되었습니다. PE10 튜브와 가이드 와이어를 약 2시간 동안 에탄올로 멸균합니다. 분당 3리터의 유속으로 3%isoflurane으로 쥐를 마취합니다.

수술대에 쥐를 올려놓고 뒷발을 집게로 잘랐다. 자극에 대한 반응으로 뒷극의 움직임이 없는 것으로 보아 성공적인 마취가 확인되었습니다. 적절하고 진통제는 척수강내 카테터 삽입 전에 킬로그램당 1mg의 멜록시캠에 대해 근육 주사로 투여하였다.

면도기로 등의 요추 부위와 양쪽 귀 사이의 털을 제거합니다. 허리고관절 접합부에서 쥐의 복부 아래에 원심분리기 튜브를 놓습니다. 포비도네요딘 용액과 에탄올 용액으로 수술 부위를 3회 살균합니다.

쥐를 무균 드레싱으로 덮고 수술 부위를 노출시킵니다. 그런 다음 수술 전에 생리 식염수로 씻으십시오. L5와 L6 사이의 추간 공간의 위치를 결정하고, L6의 척추 돌기를 좌측과 우측 양측 장골능선 사이의 중간 지점에 위치시킵니다.

수술자의 왼손 엄지와 검지로 피부를 고정한 다음 L4와 S1 사이의 가시돌기 바로 위에 3-4cm 길이의 정중선을 절개합니다. 가위로 피하 조직을 뭉툭하게 분리합니다. L5와 L6 사이의 추간 공간을 다시 찾습니다. 한 쌍의 톱니가 있는 집게로 L5 등쪽 돌기를 클램프 앤 리프트하여 추간 공간을 확장합니다.

그런 다음 가위로 척추 몸 주위의 근육을 뭉툭하게 분리하여 L6 등쪽 돌기의 상단으로 완전히 노출되었습니다. 한 쌍의 톱니가 있는 겸자로 L5 등쪽 돌기를 들어 올리고 다른 한 쌍의 겸자에 의해 추간 공간을 확장할 때 거꾸로 된 V 영역이 완전히 노출될 때까지 면봉으로 L5에서 6개의 추간 공간을 청소합니다. L23 등쪽 돌기의 상단 바로 아래에 있는 역V 영역에서 6G 바늘로 척추를 뚫습니다.

스테인리스강 와이어가 포함된 PE10 튜브를 꼬리 쪽으로 30도 기울어진 천자 부위의 척추관에 조심스럽게 삽입합니다. PE10 튜브가 저항 없이 성공적으로 삽입될 수 있을 때까지 삽입 각도를 조정했습니다. PE10 튜브의 표시된 영역이 후방근에 도달하면 카테터 삽입이 중단됩니다.

PE10 튜브에서 스테인리스 와이어를 천천히 제거한 다음 PE10 튜브를 주사기에 연결하여 20마이크로리터의 생리식염수를 주입합니다. 주사기를 제거한 후 식염수가 PE10 튜브 밖으로 계속 흘러나왔을 수 있으며, 이는 PE10 튜브가 지주막하 공간에 성공적으로 삽입되었음을 나타냅니다. PE10 two가 막히지 않은 것으로 확인되면 척추체 한쪽 근육을 4 zero 봉합사로 봉합하고 매듭을 만듭니다.

그런 다음 PE10 튜브 주위에 봉합사를 묶고 다른 매듭을 만듭니다. 봉합사와 반대쪽 근육을 절삭하지 마십시오. PE10 튜브 주위에 봉합사를 다시 묶습니다.

세 번째 매듭을 만들고 봉합사를 자릅니다. 귀 사이의 중간 지점 바로 아래 1cm를 0.5cm 길이로 절개합니다. 가위로 피하 조직을 뭉툭하게 분리합니다.

그리고 절개 부위를 통해 꼬리 쪽으로 금속 gavage tube를 삽입합니다. 요추 절개 부위에 팁이 보일 때까지. PE10 튜브가 개비지 튜브의 다른 쪽 끝을 빠져나갈 때까지 PE10 튜브의 말단 끝을 개비지 튜브에 삽입합니다.

그런 다음 부드럽게 gavage를 빼냅니다. PE10 튜브가 다시 막히지 않은 것으로 확인되면 요추 절개 부위의 나머지 근육을 4개의 제로 봉합사로 봉합합니다. PE10 튜브 주위에 봉합사를 묶고 다른 매듭을 만듭니다.

PE10 튜브를 다시 고정하십시오. PE10 튜브의 손상을 피하고 피부를 봉합한 다음 4개의 제로 봉합사로 목 피부를 봉합합니다. PE10 튜브 주위에 봉합사를 묶고 매듭을 만들어 PE10 튜브를 고정합니다.

PE10 튜브가 다시 막히지 않은 것으로 확인되면 PE10 튜브의 체외 끝을 밀봉 캡으로 밀봉합니다. PE10 튜브를 조직 조각으로 건조시키고 항알레르기 밴드를 PE10 튜브 주위에 여러 번 묶어 쥐가 움직일 때 PE10 튜브가 수축되는 것을 방지했습니다. 수술 후 쥐를 우리에 넣고 마취에서 회복하는 동안 의식을 회복할 때까지 면밀히 관찰했습니다.

쥐가 완전히 깨어난 후 밀봉 캡을 제거하고 Hamilton 주사기를 통해 초당 0.2마이크로리터의 속도로 PE10 튜브에 2% 리도카인 2마이크로리터를 주입한 다음 10마이크로리터의 생리식염수를 주입합니다. 밀봉 캡으로 PE10 튜브를 밀봉합니다. 테이블 위에 쥐를 놓고 주의 깊게 관찰하십시오.

리도카인의 척수강내 주사 후 하지의 마비는 성공적인 카테터 삽입을 나타냅니다. 뒷다리 마비는 보통 30분 정도 지속됩니다. 사지 기능이 완전히 회복될 때까지 회복 기간 동안 쥐를 면밀히 모니터링하십시오.

리도카인의 척수강내 명령 후 쥐의 양쪽 하지의 완전한 하반신 마비는 성공적인 카테터 삽입을 나타냈습니다. 수정된 방법과 이전에 보고된 방법 간의 성공적인 카테터 삽입률 비교. 수정된 방법에 대한 척수강내 카테터 삽입의 성공률은 95%였으며, 이는 Hou et al.이 보고한 방법으로 달성한 88%율보다 높았습니다.

수정된 방법과 이전에 보고된 방법 간의 장기 주입 카테터 속도 비교. 척수강내 카테터 삽입 후 2일째, 5일, 7일째에 장기간 머무는 카테터 비율은 각각 94%81%와 65%였다고 Storkson 등의 연구에서 밝혔습니다. 척수강내 카테터 삽입 후 2일, 5일, 7일에 장기간 머무는 카테터 비율은 우리 방법에서 각각 95%90%와 85%였습니다.

결론적으로, 수정된 척수강내 카테터 삽입법은 반복적인 척수강내 및 약물 투여에 유용한 도구가 될 수 있으며, 실험 기간을 단축할 수 있는 간단하고 편리하며 신뢰할 수 있는 방법이다.