2024년 6월 21일
이 프로토콜은 장내 미생물 대사 산물의 생산 및 흡수를 평가하기 위해 마우스의 문맥 및 하대정맥에서 혈액을 순차적으로 수집하는 방법을 보여줍니다.
우리 연구실의 연구 범위는 장내 마이크로바이옴과 폐 조직 간의 통신을 이해하고, 장내 마이크로바이옴의 구성 요소가 폐 면역 및 염증 반응에 어떻게 직접적인 영향을 미칠 수 있는지 이해하는 것입니다. 우리는 특정 대사 산물, 즉 단쇄 지방산의 효과에 초점을 맞춥니다. 아세테이트(acetate), 프로피오네이트(propionate) 및 부티레이트(butyrate)와 같은 단쇄 지방산은 실험용 마우스의 다양한 질병 과정에 영향을 미치는 역할을 하는 것으로 알려져 있습니다.
여기에는 제2형 당뇨병의 지질 대사, 다발성 연골염, 병리학적 골 손실, 알레르기 천식 및 혈액-뇌 장벽 투과성이 포함됩니다. 단쇄 지방산 농도의 측정은 마우스에서 배출된 분변 펠릿에서 가장 편리합니다. 그러나 이러한 분변 단쇄 지방산 수치는 생체 내, 결장에 존재하는 것, 그리고 더 중요하게는 숙주 순환계로 전달되는 것과 신뢰성 있게 일치하지 않습니다.
우리는 문맥 혈액 내에서 측정된 단쇄 지방산 및 기타 대사 산물의 수준이 대변 샘플에서 측정된 것과 비교하여 생체 내 농도의 정상 상태를 더 정확하게 반영할 것이라고 믿습니다. 간맥 근처의 문맥을 결찰하면 문맥의 크기가 확장될 수 있으며, 이에 따라 성공률이 크게 향상될 뿐만 아니라 채취할 수 있는 최대 혈액량을 증가시킬 수 있습니다.
본 프로토콜은 마우스의 문맥과 하대정맥에서 혈액을 순차적으로 채취하는 방법을 설명합니다. 본 실험의 목적은 장내 미생물 대사산물, 특히 단쇄 지방산의 생성 및 흡수를 평가하는 것입니다.
전신 및 문맥 순환계 내 장내 미생물 대사산물을 정확하게 정량화하는 것은 원격 장기 시스템과 질병 경로에 미치는 기전적 영향을 이해하는 데 매우 중요합니다. 이 순차적 혈액 수집 방법은 주요 순환 변곡점에서 단쇄 지방산(SCFAs)을 직접 측정할 수 있게 하여, 타겟 검증 및 중개 연구의 예측 신뢰도를 높여줍니다. 이러한 접근 방식은 전임상 모델에서 장 유래 대사산물의 생물학적 관련성을 명확히 함으로써 포트폴리오 의사결정 능력을 향상시킵니다.
이 순차적 혈액 수집 프로토콜은 발견부터 전임상 단계까지의 연속 과정에 통합되어, 가설 검증 및 메커니즘 위험 제거를 위한 장 유래 대사물질의 직접적인 측정을 가능하게 합니다.