Name: Non-survival 응용 프로그램을 위한 쥐의 기관절개술을 통한 기관내 삽관 및 후속 흉곽절개술 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-15T15:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 43 s
Description: 학습하세요 쥐의 기관절개술을 통한 기관내 삽관 및 흉곽절개술 방법으로 흉부 장기의 정밀 평가를 수행하는 기술입니다. 이 표준화된 절차는 비생존 실험에서 침습적 환기의 재현성과 정확성을 향상시킵니다.

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여기에 설명된 모든 동물 활동은 독일 카를스루에에 있는 바덴-뷔르템베르크 지역 위원회의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(IACUC)의 승인을 받았습니다. 실험 동물은 제도적 기준과 동물 사용 및 관리에 대한 독일 법률, 유럽 공동체 이사회(2010/63/EU)의 지침 및 ARRIVE 지침에 따라 관리되었으며 공인된 시설에서 수행되었습니다. 주문 중량이 400g인 Janvier Labs의 수컷 Spraque Dawley 쥐가 사용되었습니다.
1. 시술 준비(그림 1)
<ol>
	<li>캐뉼러를 팁까지 1cm에서 135° 각도로 접고, Luer-lock을 통해 플라스틱 관류 튜브에 연결하고, 수술용 모기 클램프를 사용하여 장력을 가하여 수술 준비 후크를 준비합니다(그림 1A, B).</li>
	<li>설치류 수술 노출 장치를 준비하십시오. 참고: 상용 플랫폼의 가용성 외에도 이 연구에서와 같이 비용 효율적으로 쉽게 자체 구축할 수 있습니다.<ol>
		<li>이를 위해 40mm 두께의 50cm x 4cm 강판을 사용하십시오. 후속 장력 점을 위해 원하는 위치에 강철 드릴을 사용하여 여러 개의 8mm 구멍을 만듭니다. 이 위치에 Y자형 고정 막대를 놓습니다.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>열 지지를 제공하기 위해 수술 노출 장치의 강판 위에 가열 패드를 놓습니다.</li>
	<li>플라스틱 튜브와 수술용 모기 클램프가 부착된 수술 준비 고리를 준비하여 나중에 수술 노출을 위해 조직에 장력을 가합니다.</li>
	<li>수 Luer-lock 끝이 있는 10mL 플라스틱 주사기의 플러그를 제거하고 주사기의 근위 끝을 잘라냅니다. 그림과 같이 말단 부분을 환기 백에 삽입하고 열수축 튜브로 덮고 실험실 토치를 사용하여 약한 열을 가하여 밀폐합니다(그림 1D-F).</li>
	<li>다양한 크기의 정맥 내 카테터를 줄이고 베벨로 절단하고, 팁의 유연한 와이어 끝이 있는 동맥 리더 카테터 세트의 가이드 와이어를 삽관 중 후속 Seldinger 기술22,23을 위해 해당 동물 크기(아마도 14G)에 가장 적합한 카테터 크기에 삽입합니다(그림 1G, H).</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66684/66684fig01v2.jpg"> 
그림 1: 실험 설정.(A) 수술 준비 고리로 사용되는 관류 튜브에 연결된 접힌 캐뉼라. (B) 금속 고정 막대에 클램프가 위치한 준비 후크. (C) 개입 전에 동물을 진정시켰습니다. (D) 신생아학의 환기 백. (E-F) 열수축 튜브를 사용하여 Luer-lock 주사기를 환기 백에 밀폐 장착합니다. (G) Seldinger 기술을 위한 동맥 리더-카테터 세트의 가이드 와이어를 사용하여 다양한 크기의 정맥 카테터를 단축 및 비스듬하게 만들었습니다. (H) 최종 맞춤형 건축. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66684/66684fig01largev2.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
2. 마취 및 진통
<ol>
	<li>선택한 약물로 쥐를 마취하십시오. 참고: 여기에서는 케타민 10%(100mg/mL), 자일라진 2%(20mg/mL), 카프로펜 50mg/mL 및 이소플루란을 사용하여 마취 및 진통제를 확립했습니다. 자일라진(xylazine)과 카프로펜(carprofen)의 1:10 희석액이 적용을 위한 원액으로 사용되었습니다.<ol>
		<li>기화기를 사용하여 5L/min의 유입 속도로 100% 산소가 주입된 유도 상자에 동물을 넣고 4%(v)의 이소플루란으로 마취를 유도합니다.</li>
		<li>의식을 잃은 후, 유도 상자에서 동물을 꺼내 100mg/kg 체중 케타민과 4mg/kg 체중 자일라진을 주입(ip)합니다. 참고: 이는 400mg 동물의 경우 케타민 40mg(원래 용액 0.4mL) 및 자일라진 1.6mg(원래 용액 0.08mL 또는 1:10 용액 0.8mL)에 해당합니다.</li>
		<li>i.p. 주입 효과가 나타날 때까지 동물을 이소플루란 주입 상자에 다시 넣습니다.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>단단한 발가락 꼬집음에 대한 쥐의 반응 부족을 테스트하여 적절한 마취 깊이를 보장합니다.</li>
	<li>눈에 안과 연고를 바르십시오.</li>
	<li>수술 중 마취의 깊이를 평가하고 유지합니다.<ol>
		<li>시간이 지남에 따라(약 1시간마다) 마약 효과가 감소하는 것 같으면 동물에게 체중 케타민 50mg과 체중 1kg의 자일라진을 추가로 주사합니다. 이는 400mg 동물의 경우 20mg의 케타민(원래 용액의 0.2mL)과 0.4mg의 자일라진(0.2mL의 1:10 용액)에 해당합니다.</li>
		<li>개흉술 전에 체중 5mg/kg 카프로펜의 SC 주사로 추가 진통제를 제공합니다. 이는 400mg 동물의 경우 2mg의 카프로펜(원래 용액의 0.04mL 또는 1:10 용액의 0.4mL)에 해당합니다.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. 수술 준비(그림 2)
<ol>
	<li>경비강 신생아 마스크를 통해 100% 산소를 흡입하여 동물의 순환을 산소로 포화시킵니다(그림 2A).</li>
	<li>5분 후, 위에서 설명한 대로 경비강 신생아 마스크에서 남성용 플라스틱 주사기 Luer-lock 팁이 있는 신생아 환기 백으로 전환하고 주사기 팁이 동물 비강 끝에 가깝게 오버플로 산소를 공급합니다(그림 2B).</li>
	<li>원하는 길이에 걸쳐 흉경부 정중 피부 절개를 수행하고 수술 준비 고리를 사용하여 수술 부위를 노출시킵니다(그림 2C, D).</li>
	<li>경추 근막을 통해 미세한 가위로 둔기를 해부하여 준비를 진행하십시오. 흉쇄유돌근 및 하부근을 노출시키고 좌측 측막 절제 후 정중 하부근을 오른쪽으로 측방화합니다(그림 2E-G).</li>
	<li>오버홀트 클램프를 사용하여 기관을 향해 무딘 해부를 수행하고 기관을 터널링합니다(그림 2H-I).</li>
	<li>실리콘 혈관 고리를 사용하여 기관을 슬링하고 나중에 기관내 캐뉼라 고정을 위해 폴리필라멘트 봉합사를 사용하여 원위 기관을 이중 슬링합니다(그림 2J-N).</li>
</ol>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66684/66684fig02.jpg"> 
그림 2: 기관 준비. (A) 마스크를 통한 산소 흡입. (B) 산소 적용을 위해 마스크에서 남성용 Luer-lock 주사기로 전환합니다. (C) 흉강경추 피부 절개. (D) 경추 근막을 통한 준비. (E) 흉쇄유돌근(sternocleidomastoid muscle) 및 하부근(infrahyoidal muscle)의 노출. (F) 정중 하저근(infrahyoidal muscle)의 측방화(Lateralization). (G) 기관 쪽으로 둔탁한 해부. (H) 오버홀트 클램프를 사용한 기관 터널링. (I) 실리콘 용기 고리를 사용하여 기관을 슬링하는 행위. (제이-엔) 나중에 기관내 캐뉼라 고정을 위해 폴리 필라멘트 봉합사를 사용하여 기관을 이중 슬링합니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66684/66684fig02large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
4. 삽관 절차(그림 3)
<ol>
	<li>비외상성 플라이어를 사용하여 기관을 꼬리로 늘립니다(그림 3A, B).</li>
	<li>가위를 사용하여 둘레 180°의 기관을 부분적으로 절개합니다(그림 3C-F).</li>
	<li>유연한 끝이 있는 Seldinger 가이드 와이어를 기관에 삽입하고(그림 3G-H) 이후에 적절한 둘레의 수정된 정맥 카테터를 Seldinger 와이어에 의해 안내되는 기관에 삽입합니다(그림 3I-N).</li>
	<li>Seldinger 와이어를 제거하고(그림 3O), 기관 카테터의 Luer-lock 팁을 수정된 환기 백에 연결하고 고주파 및 낮은 일회량으로 부드러운 폐 보호 수동 환기를 시작합니다(그림 3P). 정중 개흉술이 시행되지 않았고 폐가 잘 보이지 않는 한 수동 인공호흡을 수행합니다.</li>
	<li>공중 누출 및 우발적인 카테터 제거를 방지하기 위해 이전에 배치된 잠금 봉합사를 슬라이딩 매듭으로 묶습니다(그림 3Q-T).</li>
</ol>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66684/66684fig03.jpg"> 
그림 3: 기관절개술을 통한 기관내 삽관.(A) 준비 후 초기 상황. (B) 비외상성 플라이어를 사용한 기관의 꼬리 연장. (씨-에프) 둘레 180°의 기관 부분 절개. (G,H) 기관에 Seldinger 가이드 와이어 도입. (나-엠) Seldinger 와이어에 의해 안내되는 기관에 변형된 정맥 주사 카테터를 도입합니다. (해당 없음) Seldinger 와이어 제거. (P) 기관 카테터와 변형된 환기 백의 루어락 연결. (큐-T) 우발적인 카테터 제거를 방지하기 위해 이전에 배치된 잠금 봉합사를 묶습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66684/66684fig03large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
5. 수동 인공호흡 및 정중 개흉술(그림 4)
<ol>
	<li>뭉툭하고 안정적인 재료 가위(그림 4A, B)를 사용하여 xipoid에서 중앙 개흉술을 시작하고 흉골을 통해 두개골로 계속합니다. 가위를 아래로 전진할 때와 절단할 때는 폐에 대한 외상을 피하기 위해 항상 몇 초 동안 인공호흡을 일시 중지하십시오(그림 4C-E).</li>
	<li>수술용 후크를 사용하여 흉부에 노출시키고 종격동 장막을 제거합니다(그림 4F-H).</li>
	<li>원하는 빈도와 일회량으로 수동 인공호흡을 계속하고 모니터링을 확대합니다(예: 동맥 내 혈압 측정 확립, 목적 또는 해당 연구 질문에 따라 중심 정맥 또는 폐 동맥 카테터 설치)(그림 4I-L).</li>
</ol>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66684/66684fig04.jpg"> 
그림 4: 수동 인공호흡 및 정중 개흉술.(A) 삽관 후 초기 상황. (B-E) xiphoid에서 시작하는 중앙 개흉술. (F-I) 수술 준비 후크를 사용한 흉부 노출. (J) 환기 중 최종 설정. (K-L) 수동 환기 과정. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66684/66684fig04large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
6. 안락사
<ol>
	<li>심하게 마취된 동물에게 가위를 사용하여 갑작스럽고 날카로운 심장 절제술을 통해 안락사를 달성하십시오.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>Non-survival Rat 모델을 위한 기관절개술 기반 기관내 삽관 프로토콜

<ol><li>Czigany, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limb+remote+ischemic+conditioning+of+the+recipient+protects+the+liver+in+a+rat+model+of+arterialized+orthotopic+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Limb remote ischemic conditioning of the recipient protects the liver in a rat model of arterialized orthotopic liver transplantation.</a> PLoS One. 13 (4), e0195507(2018).</li>
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<li>Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+procedures+for+a+rat+model+of+partial+orthotopic+liver+transplantation+with+hepatic+arterial+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction.</a> J Vis Exp. 73, e4376(2013).</li>
<li>Jahshan, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+rat+model+for+assessment+of+laryngotracheal+injury+following+transoral+intubation%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pediatr+Otorhinolaryngol%22%5BJournal%5D)">A novel rat model for assessment of laryngotracheal injury following transoral intubation.</a> Int J Pediatr Otorhinolaryngol. 113, 4-10 (2018).</li>
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<li>Ghali, M. G. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microsurgical+technique+for+tracheostomy+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22MethodsX%22%5BJournal%5D)">Microsurgical technique for tracheostomy in the rat.</a> MethodsX. 5, 61-67 (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Ambu Spur II 신생아용 일회용 환기 가방</td><td>Meier Medizintechnik</td><td>335 102 000</td><td>환기 가방</td></tr><tr><td>BD Microlance 3 캐뉼라 20 G</td><td>BD (Beckton, Dickinson)</td><td>301300</td><td>캐뉼라</td></tr><tr><td>BD Microlance Discardit II 20 mL 주사기</td><td>BD (Beckton, Dickinson)</td><td>300296</td><td>플라스틱 주사기</td></tr><tr><td>고정 막대</td><td>Legefirm</td><td>&lrm; 500343896</td><td>y 자형 금속 고정 막대로 사용되는 소리굽쇠</td></tr><tr><td>열 수축 튜브</td><td>Sekesoer</td><td>RSG-400</td><td>열 수축 튜브</td></tr><tr><td>정맥 카테터</td><td>BD (Beckton, Dickinson)</td> <td>393230</td><td>BD Venflon Pro 안전 정맥 카테터 14 G; 가위를 사용하여 단축, 대안적으로 16 G 또는 18 G를 사용할 수 있습니다</td></tr><tr><td>플라스틱 향기 튜브</td><td>M. Schilling GmbH</td><td>S702NC150</td><td>연결 튜브 COEX 150 cm</td></tr><tr><td>폴리 필라멘트 봉합사</td><td>COVIDIEN</td><td>CL331</td><td>폴리 필라멘트 수술 봉합사는 1-2의 강도로 권장됩니다. 바늘을 제거 할 수 있습니다</td></tr><tr><td>Royal Gardineer 가열 패드 크기 S, 20 와트</td><td>Royal Gardineer</td><td>IP67</td><td>가열 패드</td></tr><tr><td>Seldinger 가이드 와이어</td><td>VYGON</td><td>115.798</td> 동맥 리더 세트 실리콘 혈관 루프 넥타이 SERAG <td>WIESSNER</td></tr><tr><td></td><td></td><td>의 금속 가이드 와이어SL26</td><td>실리콘 용기 루프 넥타이 2.5mm 빨간색</td></tr><tr><td>Spraque Dawley 쥐</td><td>Janvier Labs</td><td></td><td>무게 400g 무게의 수컷 쥐</td></tr><tr><td></td><td>강판 Maschinenbau Feld GmbH</td><td>C010206</td><td>아연 도금 시트 플레이트, 40 x 50cm, 두께 4.0mm</td></tr></tbody></table>

non-survival 응용 프로그램을 위한 쥐의 기관절개술을 통한 기관내 삽관 및 후속 흉곽절개술

Endotracheal Intubation via Tracheotomy and Subsequent Thoracotomy in Rats for Non-Survival Applications

기관절개술과 후속 개흉술을 통한 기관내 삽관은 비생존 적용을 위해 10마리의 수컷 쥐(평균 체중 405 ± 30g)에서 수행되었습니다. 이 수술은 외과 레지던트 2년차가 집도했습니다. 삽관 및 인공호흡 20분 이상 생존율로 정의되는 성공률은 100%였습니다. 피부 절개부터 삽관 튜브가 고정될 때까지 준비 및 삽관 절차의 평균 시간은 6분 55초 ± 0분 53초였습니다(표 1).
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>사용된 동물의 수</td>
			<td>10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>체중(평균 및 표준 편차)</td>
			<td>405 ± 30 그램</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>삽관 성공률</td>
			<td>100%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>시술 기간(평균 및 표준 편차)</td>
			<td>6분 55초 ± 0분 53초</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>평균 산소 포화도</td>
			<td>96%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>최소 산소 포화도</td>
			<td>92%</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
표 1: 대표적인 결과. 10마리의 동물을 대상으로 한 프로토콜의 대표 결과.
채도는 뒷다리의 일회용 자체 접착식 맥박 산소 측정 프로브를 통해 모니터링되었으며 92% 이하로 떨어지지 않았습니다. 횡격막이 절개될 때까지 자발적 환기가 억제되었습니다. 모든 쥐는 갑작스런 날카로운 심장 절제술을 통해 의도적으로 안락사될 때까지 실험 측정에 필요한 20분을 생존했습니다(그림 5).
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66684/66684fig05.jpg"> 
그림 5: 말초 산소 포화도. 이 절차의 전체 기간에 걸쳐 측정된 말초 산소 포화도. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66684/66684fig05large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

Non-survival 응용 프로그램을 위한 쥐의 기관절개술을 통한 기관내 삽관 및 후속 흉곽절개술

Endotracheal intubation and subsequent ventilation are often basic requirements for translational research in rat models for various interventions that ...

endotracheal-intubation-via-tracheotomy-subsequent-thoracotomy-rats

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

이 비디오에서는 토끼 모델에서 입을 통해 기관내관을 삽입하는 침습적 절차인 기관 삽관을 시연합니다. 이 절차는 폐의 기계적 환기를 가능하게 합니다.

기계적 환기를 위한 기관 삽관: 토끼 모델의 기관에 기관내관을 삽입하는 절차

우리는 2.0 mm 검경과 이경을 사용하여 직접 후두경을 통해 마우스에서 기관 내 삽관을위한 간단하고 신뢰할 수있는, 그리고 상대적으로 저렴한 방법을 개발했습니다. 이 기술은 atraumatic이고 만성 실험에서 반복 측정에 사용될 수있다. 우리는 우수한 기관 절개 또는 이전에 비수술 적 방법을보고 찾을 수 있습니다.

마우스의 기관 내 삽관<em&gt;를 통해</em이경 사용&gt; 직접 후두경

설치류 흉선 절제술은 면역학 연구에서 유용한 기술입니다.  여기에서는 수술 전후 이환율 및 폐사율을 최소화하기 위해 비침습적 삽관 및 양압 환기와 함께 미니 흉골 절개술을 사용하는 성인 쥐의 완전한 흉선 절제술 프로토콜에 대해 설명합니다.

비 침습적 기관 내 삽관 성인 쥐에서 전체 흉선

이 문서에서는 삽관을 통해 마우스 기관에 직접 블레오 마이신 관리를위한 신속하고 간단한 방법을 제공합니다. 이러한 방법의 주요 장점은 마스터 높은 재현성 쉽고, 특수 장비 나 긴 회복 시간을 요구하지 않는다는 점이다.

마우스의기도 신속 삽관 용 개선 된 방법

이 프로토콜은 인간에서 관찰되는 산성 폐렴의 발병 기전과 매우 유사한 마우스에서 급성 폐 손상을 유발합니다. 우리는 최대한의 급성 치명적이지 않은 낮은 pH 폐 손상을 생성하고 원주 압력 방출과 결합된 개방 기관절개술을 사용하여 설치류-인간 해부학적 호흡 구조의 차이를 설명합니다.

급성 폐 손상의 열기 기관 절개 위산 흡인 쥐 모델은 최대한 급성 치명적 폐 손상의 결과

설치류 왼쪽된 pneumonectomy 폐 고혈압 연구에 귀중 한 기술 이다. 여기, 선물이 쥐 pneumonectomy 절차와 최소한의 사망률 및 사망을 보장 하기 위해 수술 후 치료를 설명 하는 프로토콜.

쥐에 폐 고혈압의 모델로 Monocrotaline 또는 Sugen와 함께 왼쪽된 Pneumonectomy

이 문서의 목적은 실험실 마우스의 정교한 삽관 방법을 설명하는 것입니다. 이 방법은 비침습적이며, 따라서 호흡기 기능의 연속 모니터링 및 / 또는 폐로의 치료 의 주입을 필요로하는 연구에 이상적입니다.

마우스에서 반복된 Orotracheal 삽관

본 연구는 세 가지 다른 폐 기증 모델(뇌사 후 기증, 순환 후 사망 기증, 출혈 후 쇼크 기증)의 확립을 보여줍니다. 이러한 사건과 관련된 염증 과정과 병리학적 장애를 비교합니다.

폐이식을 위한 실험적 장기기증 모델 연구

우심부전(RHF)은 우측 심장 확장과 비대가 특징이며, 심실 및 심방 기능 부전을 유발합니다. RHF와 관련된 심폐 질환은 심장 부정맥의 위험 증가를 동반합니다. 이 논문은 향상된 심실 및 심방 부정맥 형성과 관련된 폐동맥 밴딩 유도 RHF의 표준화된 모델을 설명합니다.

폐동맥 밴딩을 이용한 우측 심장 리모델링 및 부정맥의 쥐 모델

이 연구는 기계적 환기(MV)의 쥐 모델에 맞춘 구조화된 발관 접근법을 제안합니다. 이 접근법은 MV에서 자발 호흡으로의 원활한 전환을 촉진하는 동시에 발관 관련 합병증을 최소화합니다. 이탈, 기도 관리 및 발관 후 관리의 표준화는 실험 연구의 신뢰성과 재현성을 향상시킵니다.

기계적으로 환기된 쥐의 발관에 대한 구조화된 접근 방식

이 프로토콜은 성체 쥐에서 이소플루란 마취 하에서 빠르고 시각적으로 유도된 삽관을 가능하게 하는 간단하고 저비용의 영상 보조 구강기관 삽관 방법을 설명합니다.

저비용 스마트폰 연결 이코경을 이용한 비디오 보조 쥐 귀 기관삽관

학습하세요 쥐의 기관절개술을 통한 기관내 삽관 및 흉곽절개술 방법으로 흉부 장기의 정밀 평가를 수행하는 기술입니다. 이 표준화된 절차는 비생존 실험에서 침습적 환기의 재현성과 정확성을 향상시킵니다.

Non-survival 응용 프로그램을 위한 쥐의 기관절개술을 통한 기관내 삽관 및 후속 흉곽절개술

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