Name: 마모셋의 난소 주기의 단계를 결정하기 위한 혈액 샘플링 및 호르몬 측정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-05T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 17 s
Description: 학습하세요 마모셋 난소 주기 단계 결정을 위한 혈액 샘플링 및 호르몬 측정 방법을. 프로게스테론, 에스트라디올, 융모성 성선자극호르몬 수치 측정으로 배란 시점을 정확히 예측하여 유전자 변형 마모셋 생성 효율성을 높입니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>혈액 수집 및 호르몬 분석을 통한 마모셋의 난소 주기 평가

<ol><li>Kholkute, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+progesterone+levels+throughout+the+ovarian+cycle+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Primates%22%5BJournal%5D)">Plasma progesterone levels throughout the ovarian cycle of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> Primates. 25 (1), 123-126 (1984).</li>
<li>Harding, R. D., Hulme, M. J., Lunn, S. F., Henderson, C., Aitken, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+progesterone+levels+throughout+the+ovarian+cycle+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Plasma progesterone levels throughout the ovarian cycle of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> J Med Primatol. 11 (1), 43-51 (1982).</li>
<li>Gilchrist, R. B., Wicherek, M., Heistermann, M., Nayudu, P. L., Hodges, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+follicle-stimulating+hormone+and+follicle+populations+during+the+ovarian+cycle+of+the+common+marmoset%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Changes in follicle-stimulating hormone and follicle populations during the ovarian cycle of the common marmoset.</a> Biol Reprod. 64 (1), 127-135 (2001).</li>
<li>Gromoll, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+subclass+of+the+luteinizing+hormone%2Fchorionic+gonadotropin+receptor+lacking+exon+10+messenger+RNA+in+the+New+World+monkey+%28Platyrrhini%29+lineage%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">A new subclass of the luteinizing hormone/chorionic gonadotropin receptor lacking exon 10 messenger RNA in the New World monkey (Platyrrhini) lineage.</a> Biol Reprod. 69 (1), 75-80 (2003).</li>
<li>Müller, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chorionic+gonadotrophin+beta+subunit+mRNA+but+not+luteinising+hormone+beta+subunit+mRNA+is+expressed+in+the+pituitary+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Chorionic gonadotrophin beta subunit mRNA but not luteinising hormone beta subunit mRNA is expressed in the pituitary of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> J Mol Endocrinol. 32 (1), 115-128 (2004).</li>
<li>Pacchiarotti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+stimulation+protocol+in+IVF%3A+an+up-to-date+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Pharm+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Ovarian stimulation protocol in IVF: an up-to-date review of the literature.</a> Curr Pharm Biotechnol. 17 (4), 303-315 (2016).</li>
<li>Ezcurra, D., Humaidan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+luteinising+hormone+and+human+chorionic+gonadotropin+when+used+in+assisted+reproductive+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Biol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">A review of luteinising hormone and human chorionic gonadotropin when used in assisted reproductive technology.</a> Reprod Biol Endocrinol. 12, 95(2014).</li>
<li>Lopez-Gatius, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+response+to+prostaglandin+F%282alpha%29+in+lactating+dairy+cows%3A+A+clinical+update%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Dev%22%5BJournal%5D)">Ovarian response to prostaglandin F(2alpha) in lactating dairy cows: A clinical update.</a> J Reprod Dev. 68 (2), 104-109 (2022).</li>
<li>Marini, R. P., Wachtman, L. M., Tardif, S. D., Mansfield, K., Fox, J. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMarini%2C+RP+%22The+Common+Marmoset+in+Captivity+and+Biomedical+Research%22">The Common Marmoset in Captivity and Biomedical Research</a>. , Elsevier Science. (2018).</li>
<li>Schultz-Darken, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sample+collection+and+restraint+techniques+used+for+common+marmosets+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Sample collection and restraint techniques used for common marmosets (Callithrix jacchus).</a> Comp Med. 53 (4), 360-363 (2003).</li>
<li>Hopper, J. Common marmosets. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHopper%2C+J+%22Handbook+of+Exotic+Pet%22">Handbook of Exotic Pet</a>. Kubik, M. , 27-42 (2020).</li>
<li>Harlow, C. R., Hearn, J. P., Hodges, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovulation+in+the+marmoset+monkey%3A+endocrinology%2C+prediction+and+detection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Ovulation in the marmoset monkey: endocrinology, prediction and detection.</a> J Endocrinol. 103 (1), 17-24 (1984).</li>
<li>Ludlage, E., Mansfield, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+care+and+diseases+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Clinical care and diseases of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> Comp Med. 53 (4), 369-382 (2003).</li>
<li>Summers, P. M., Wennink, C. J., Hodges, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cloprostenol-induced+luteolysis+in+the+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">Cloprostenol-induced luteolysis in the marmoset monkey (Callithrix jacchus).</a> J Reprod Fertil. 73 (1), 133-138 (1985).</li>
<li>Takahashi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Birth+of+healthy+offspring+following+ICSI+in+in+vitro-matured+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Birth of healthy offspring following ICSI in in vitro-matured common marmoset (Callithrix jacchus) oocytes.</a> PLoS One. 9 (4), e95560(2014).</li>
<li>Tomioka, I., Takahashi, T., Shimada, A., Yoshioka, K., Sasaki, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Birth+of+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29+offspring+derived+from+in+vitro-matured+oocytes+in+chemically+defined+medium%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Birth of common marmoset (Callithrix jacchus) offspring derived from in vitro-matured oocytes in chemically defined medium.</a> Theriogenology. 78 (7), 1487-1493 (2012).</li>
<li>Abe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+marmoset+genome+engineering+by+autologous+embryo+transfer+and+CRISPR%2FCas9+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Efficient marmoset genome engineering by autologous embryo transfer and CRISPR/Cas9 technology.</a> Sci Rep. 11 (1), 20234(2021).</li>
<li>Summers, P. M., Shephard, A. M., Taylor, C. T., Hearn, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+cryopreservation+and+transfer+on+embryonic+development+in+the+common+marmoset+monkey%2C+Callithrix+jacchus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">The effects of cryopreservation and transfer on embryonic development in the common marmoset monkey, Callithrix jacchus.</a> J Reprod Fertil. 79 (1), 241-250 (1987).</li>
<li>Thomson, J. A., Kalishman, J., Hearn, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsurgical+uterine+stage+preimplantation+embryo+collection+from+the+common+marmoset%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Nonsurgical uterine stage preimplantation embryo collection from the common marmoset.</a> J Med Primatol. 23 (6), 333-336 (1994).</li>
<li>Hanazawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+transabdominal+collection+of+preimplantation+embryos+from+the+common+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive transabdominal collection of preimplantation embryos from the common marmoset monkey (Callithrix jacchus).</a> Theriogenology. 78 (4), 811-816 (2012).</li>
<li>Ishibashi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+embryo+transfer+in+the+common+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29+with+a+reduced+transfer+volume%3A+a+non-surgical+approach+with+cryopreserved+late-stage+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Efficient embryo transfer in the common marmoset monkey (Callithrix jacchus) with a reduced transfer volume: a non-surgical approach with cryopreserved late-stage embryos.</a> Biol Reprod. 88 (5), 115(2013).</li>
<li>Kishimoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+novel+common+marmoset+embryonic+stem+cell+lines+under+various+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Establishment of novel common marmoset embryonic stem cell lines under various conditions.</a> Stem Cell Res. 53, 102252(2021).</li>
<li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood%2C+including+routes+and+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Toxicol%22%5BJournal%5D)">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).</li>
<li>Daskalaki, M., Drummer, C., Behr, R., Heistermann, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+alfaxalone+for+short-term+anesthesia+can+confound+serum+progesterone+measurements+in+the+common+marmoset%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Primate+Biol%22%5BJournal%5D)">The use of alfaxalone for short-term anesthesia can confound serum progesterone measurements in the common marmoset: a case report.</a> Primate Biol. 9 (2), 23-28 (2022).</li>
<li>Hodges, J. K., Cottingham, P. G., Summers, P. M., Liang, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+ovulation+in+the+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29+with+human+chorionic+gonadotropin+following+prostaglandin-induced+luteal+regression%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Controlled ovulation in the marmoset monkey (Callithrix jacchus) with human chorionic gonadotropin following prostaglandin-induced luteal regression.</a> Fertil Steril. 48 (2), 299-305 (1987).</li>
<li>Barrett, J., Abbott, D. H., George, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extension+of+reproductive+suppression+by+pheromonal+cues+in+subordinate+female+marmoset+monkeys%2C+Callithrix+jacchus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">Extension of reproductive suppression by pheromonal cues in subordinate female marmoset monkeys, Callithrix jacchus.</a> J Reprod Fertil. 90 (2), 411-418 (1990).</li>
<li>Barrett, J., Abbott, D. H., George, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+cues+and+the+suppression+of+reproduction+in+subordinate+female+marmoset+monkeys%2C+Callithrix+jacchus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">Sensory cues and the suppression of reproduction in subordinate female marmoset monkeys, Callithrix jacchus.</a> J Reprod Fertil. 97 (1), 301-310 (1993).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>AIA-360</td><td>토소 0019945</td><td></td><td>호르몬 측정 (P4 / E2)</td></tr><tr><td>AIA 팩 희석 농축액</td><td>토소 0020956</td><td></td><td>호르몬 측정 (P4 / E2)</td></tr><tr><td>AIA 팩 기판 세트 II</td><td>토소 0020968</td><td></td><td>호르몬 측정 (P4 / E2)</td></tr><tr><td>AIA 팩 워시 농축</td>액 <td>토소</td><td>0020955</td><td>호르몬 측정 (P4 / E2) E2)</td></tr><tr><td>CMS-1</td><td>CLEA 일본</td><td></td><td>마모셋 식품</td></tr><tr><td>Estrumate</td><td>MSD 동물 건강</td><td></td><td>PGF2alpha 아날로그(클로프로스테놀)</td></tr><tr><td>Gonal-f 피하주사 150</td><td>Merck Biopharma Co., Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>근육 주사를 위한 FSH Gonatropin 1000</td><td>ASKA Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>872413</td><td>hCG</td></tr><tr><td>헤파린 나트륨 주입액 5,000개/5mL</td><td>모치다 제약 주식회사</td><td></td><td></td></tr><tr><td>224122458 Common Marmoset 융모막 성선 자극 호르몬 검출을 위한 채혈 면역크로마토그래피 테스트 키트(Dual Checker)</td><td>CLEA Japan, Inc.</td><td></td><td>CG 수준 결정</td></tr><tr><td>로우 프로파일 이중 암 현미경 조명 LPF-SD</td><td>SHIOKAZE GIKEN</td><td></td><td>혈액 채취용 탁상용 램프</td></tr><tr><td>마모셋 혈액 채취 억제 장치</td><td>JIC Japan</td><td>JM-1006</td><td>혈액 채취 http://www.jic-japan.jp/prd/marmoset/prd016.html 이메일: vi@jic-japan.jp</td></tr><tr><td>Metacam 0.05%</td><td>Boehringer Ingelheim Animal Health Japan Co., 주식 회사.</td><td></td><td>혈종 치료</td></tr><tr><td>샘플 컵, 3mL, PS, Tosoh 360 및 AIA-600 II, 1000/Bag Globe</td><td>Scientific</td><td>110913</td><td>호르몬 측정 (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK iE2</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0025224</td><td>호르몬 측정 (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK iE2 CALIBRATOR SET</td><td>Tosoh Corporation</td><td></td><td>0025324 호르몬 측정 (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK iE2 샘플 희석 용액</td><td>Tosoh Corporation</td><td></td><td>0025524 호르몬 측정 (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK PROGIII</td><td>토소 0025240</td><td></td><td>호르몬 측정 (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK PROGIII 캘리브레이터 세트</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0025340</td><td>호르몬 측정 (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK PROGIII 샘플 희석 용액</td><td>Tosoh Corporation</td><td>&nbsp; 0025540</td><td>호르몬 측정 (P4 / E2)</td></tr> <tr><td>주사기 25G (0.50 x 25 mm) 바늘</td><td>TERUMO</td><td>SS-01T2525</td><td>혈액 수집</td></tr><tr><td>Tensolvet 5.000 IE 젤.</td><td>Dechra Pharmaceuticals</td><td>14033492</td><td>혈종 치료</td></tr><tr><td>TOSOH MULTI-CONTROL SET</td><td>주식회사 Tosoh</td><td>0015965</td><td>호르몬 측정 (P4 / E2)</td></tr></tbody></table>

마모셋의 난소 주기의 단계를 결정하기 위한 혈액 샘플링 및 호르몬 측정

Blood Sampling and Hormone Measurement for Determining the Stage in the Ovarian Cycle in Marmosets

본 연구에서 사용된 동물에 대한 자세한 내용은 표 1에 기재되어 있다.
대퇴 정맥의 해부학적 분석 대퇴 정맥의 해부학적 분석은 안락사를 받는 2세 수컷 커먼 마모셋(I 7713M)을 사용하여 수행되었습니다. 대퇴 정맥과 동맥은 대퇴 삼각형에 있습니다. 대퇴 삼각형은 복벽과 허벅지 근육 사이의 경계에 형성됩니다(그림 1B-D). 허벅지 기저부에는 큰 정맥이 역삼각형의 중심을 통과하고 동맥이 정맥 바깥쪽에 평행하게 뻗어 있습니다. 아래쪽 부위에서는 정맥과 동맥이 더 얇아지고 겹치며 동맥은 정맥 위에 위치합니다(그림 1D).
혈액 채취를 위해 정맥을 대상으로 해야 하는데, 동맥 손상은 대퇴 동맥 혈종을 유발할 수 있으며, 출혈이 심할 경우 심혈관 쇼크를 유발할 수 있기 때문에 정맥을 대상으로 해야 한다13. 혈액은 삼각형의 정맥과 원위 부위의 정맥 어느 부분에서나 채취할 수 있지만, 정맥의 크기가 크고 동맥과 거의 겹치지 않는 것처럼 보이기 때문에 대퇴 삼각형의 근위 부위에서 정맥 천자를 받는 것이 권장됩니다. 또한 근위 부위의 정맥은 표재성이므로 바늘을 사용하여 쉽게 위치를 찾을 수 있습니다. 대퇴 삼각형의 동맥은 맥박이 뛰기 때문에 때때로 시각적으로 또는 촉진으로 식별되며 정맥은 그 바로 내측을 따라 흐릅니다. 따라서 동맥 맥동을 관찰하면 정맥의 위치를 예측하는 데 도움이 됩니다.
또한, 정맥을 나타내는 파란색은 일반적으로 삼각형 상단의 피부 아래에서 관찰됩니다(그림 1B,C). 그러나 삼각형의 림프절은 정맥에 가깝게 위치하는 경우가 많고 짙은 파란색을 띠기 때문에 모양이 비슷합니다. 다행히도, 그들은 그들의 이동성에 의해 구별 될 수 있습니다 : 정맥은 고정되어 있고 림프절은 움직일 수 있습니다. 따라서 동맥의 맥박과 정맥의 푸른 색은 정맥을 찾는 데 사용되는 두 가지 주요 단서이지만 시각화하기 위해 머리카락을 면도해야 할 수도 있습니다.
난소 주기의 단계 결정 P4 및 E2 수치는 여포 및 황체기의 지속 기간을 조사하기 위해 6마리의 암컷 마모셋(1세에서 3세에 이르기까지)에서 모니터링되었습니다. 그 결과, 여포기와 황체기의 평균 지속 기간은 각각 11.58일(4개의 마모셋에서 n=6)과 16.8일(3개의 마모셋에서 n=5)로 나타났다(표 2). 다음에서는 6 개의 마모셋 중 하나 (I6751F, 3 세)의 P4 및 E2 역학에 대해 자세히 설명합니다. 이 동물에서 혈액 샘플링 및 호르몬 측정은 38일 동안 몇 일마다 수행되었습니다(표 3).
황체기(1-10일) 측정 시작일은 1일로 설정되었습니다. P4 수치(21ng/mL)에 근거하여, 이 동물은 황체기에 있었을 가능성이 높습니다. 1일에서 10일까지(≥21ng/mL) 높은 P4 수치가 관찰되었으며, 이는 황체기를 시사합니다. 12일째에는 4ng/mL로 급격히 떨어졌습니다. 이 현저한 감소는 황체기에서 난포기로의 전환을 나타냅니다. E2 수치가 10일째(241ng/mL)에서 12일(189ng/mL)로 감소한 것도 이러한 전환을 뒷받침했습니다.
난포기(12-22일) 난포기로 전환한 후 P4 수치는 19일까지 낮음(4-6ng/mL)을 유지하다가 19일째부터 24일째까지 약간 증가했습니다(19일째, 6ng/mL, 22일째, 8ng/mL, 24일째, 9ng/mL). 대조적으로, E2 수치는 19일째(94ng/mL)에서 22일(322ng/mL)로 유의하게 증가한 후 22일째(158ng/mL)로 감소했습니다. P4 증가와 E2 수치 감소를 바탕으로 배란은 난포기에서 황체기로 전환되는 22일에서 24일 사이에 발생한 것으로 예측되었습니다.
황체기(24-36일) 배란 후 P4 수치는 36일까지 높게 유지되다가 38일째에 3ng/mL로 떨어졌습니다. 따라서 황체기에서 난포기로의 전환은 36-38일 사이에 발생했을 가능성이 높습니다. 이러한 전환과 일관되게 이 기간 동안 E2 수치가 감소했습니다(36일, 2517ng/mL, 38일, 73ng/mL).
배란 시기의 예측 및 결정
소변 CG 수치와 배란일 사이의 관계를 조사하기 위해 7개의 마모셋(No. 1-7)을 준비했습니다. 배란 주기(0일)를 재설정하기 위해 클로프로스테놀을 주사했습니다. 그런 다음 7일째부터 혈액 P4/E2 수치와 소변 CG 수치를 모니터링했습니다. 점화 후 즉시 소변을 채취했습니다. 혈액 채취는 기본적으로 아침에 수행되었습니다. 배란은17일 보고된 바와 같이 전날에 비해 E2 수치가 크게 떨어졌을 때 발생하는 것으로 추정되었습니다. 그날 실제로 난소 표면에서 난포 파열이 관찰되었고, 난관에 접합체/난모세포가 존재함이 확인되었습니다(표 4).
CG는 7일째 내지 11일째(7일째, N=1일, N=2일, 9일째, N=1일, 10일째, N=2일, 11일째, N=1)에 처음으로 검출되었다(표 4). E2 수준(배란 표시)의 큰 감소는 첫 번째 CG 신호 후 0-3일 후에 관찰되었습니다. 첫 번째 CG 검출부터 E2 감소까지의 기간은 첫 번째 CG 검출이 더 일찍 이루어졌을 때 더 긴 것으로 보입니다(그림 3A). 예를 들어, 한 동물(No. 1)은 첫 번째 CG 검출 후 7일째에 E2 신호의 감소를 보여주었습니다(표 4). 대조적으로, 첫 번째 CG 검출과 E2 신호의 강하의 동시 발생은 10일째에 한 동물(2번)에서 관찰되었습니다. 따라서, 비록 첫 번째 CG 검출과 배란이 5마리의 동물 중 하나에서 같은 날에 관찰되었지만, 배란은 CG의 첫 번째 검출 후 몇 일 이내에 일어났다.
마모셋 CG용 면역크로마토그래피 테스트 키트는 검사에 소변을 사용하도록 설계되었습니다. CG 수치 검사는 일반적으로 혈장을 사용하여 P4/E2 수치를 측정하는 데 수반됩니다. CG 검사에는 소변 대신 혈장을 사용할 수 있다면 도움이 될 것입니다. 이를 시험하기 위해 위의 실험에서 P4/E2 수치 측정 후 남은 혈장을 검사하였다. 혈장 및 소변은 상기 실험의 어느 날이든 4마리의 동물로부터 수집하였다(검사 날짜는 표 4에서 이중 별표[**]로 표시하였다). 소변을 사용하여 4마리 중 2마리는 양성 결과(점수 5 및 3)를 보였고 다른 2마리는 음성 결과(점수 1)를 보였습니다. 혈장은 소변과 본질적으로 동일한 결과를 보여주었습니다(그림 3B). 더 강한 신호는 혈장을 사용하여 얻었습니다. 따라서 혈장을 사용할 때는 소변으로 설정된 10분 전에 판단을 내려야 합니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66691/66691fig01.jpg"> 그림 1: 마모셋의 혈액 채취. (A) 혈액 채취에는 억제제가 사용됩니다. (B) 마모셋 허벅지 위쪽. (C) 대퇴골 삼각형과 혈관. 삼각형의 대퇴 동맥은 종종 볼 수 있으며 맥동을 보여줍니다. 대퇴 정맥의 파란색은 때때로 삼각형의 근위 영역(정맥 절개 부위로 표시됨)에서 볼 수 있습니다. 림프절도 파란색을 띱니다. 그러나 림프절은 림프절이 피부에 붙어 있기 때문에 움직일 수 있습니다. (D) 안락사된 동물의 허벅지의 해부학적 모습. 동맥, 정맥 및 정맥 절개술 부위가 표시됩니다. B-D에도 같은 동물이 표시되어 있습니다. (E) 구속구를 사용한 채혈. 마모셋의 다리를 잡고 있는 자세와 피를 뽑는 모습이 보인다. (F) 마모셋에서 소변 채취. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691fig01large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66691/66691fig02.jpg"> 그림 2: 마모셋의 난소 주기 동안 P4, E2 및 CG 수준의 일반적인 패턴. FSH, hCG 및 PGF2α 주입 시점이 표시됩니다. 점선은 PGF2α 주입 후 예상되는 호르몬 패턴을 보여줍니다. 약어: P4 = 프로게스테론; E2 = 에스트라디올; CG = 융모성 성선 자극 호르몬; FSH = 난포 자극 호르몬; hCG = 인간 융모성 성선 자극 호르몬; PGF2α = 프로스타글란딘 F2α. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691fig02large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66691/66691fig03.jpg"> 그림 3: 배란 발생을 예측하기 위한 CG 수치 측정. (A) CG 검출 첫날(점수 &gt; 1)과 배란까지의 기간(E2 드롭) 사이의 가능한 관계. (B) 혈장은 면역크로마토그래피 CG 검사에 사용할 수 있습니다. 각 점수의 대표 결과(상단). 점수는 샘플 로딩 10분 후에 결정되었습니다. 점수 2는 5분 이내에 밴드가 없지만 10분 이내에 밴드가 나타나는 것을 나타냅니다. 혈액 채취는 소변 채취 직후에 수행되었습니다. 4개의 마모셋( 표 S4의 1, 2, 3, 5번)을 검사하였다. 여기에 사용된 샘플은 표 4에 이중 별표로 표시되어 있습니다. 혈장을 E2 측정에 사용된 희석 완충액에 의해 50%로 희석하였다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691fig03large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
표 1: 본 연구에 사용된 동물. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_Table%201v2.xlsx" target="_blank">이 표를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>
표 2: 여포기 및 황체기의 기간. 상은 P4 수준(소낭선기 P4 ≤ 8, 황체기 P4 &gt; 8)에 기초하여 결정하였다. 측정 사이에 위상 변화가 관찰되었을 때, 측정 날짜 사이의 중간점이 변화점으로 결정되었습니다. 두 변화점 사이의 기간은 여포기 또는 황체기로 간주되었습니다. 단일 단계의 기간 측정을 보장하기 위해 두 단계에 걸친 경우를 포함하여 동일한 단계에서 긴(≥7일) 간격 또는 두 번 ≥6일 간격으로 데이터를 분석에 사용하지 않았습니다. 동일한 단계에서 두 번의 측정이 수행된 경우에만 데이터가 사용되었습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_240320_Table2_rev.zip" target="_blank">이 표를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>
표 3: 마모셋 1개에서 38일 동안의 P4 및 E2 측정 결과.<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_240320_Table3_rev.zip" target="_blank">이 표를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>
표 4: 배란일의 결정 및 예측. 배란의 흔적은 난소에서 출혈 부위나 파열 부위가 관찰되는 경우 존재하는 것으로 간주되었습니다. 난모세포/접합체는 E2 낙하 당일 난관에서 얻은 난모세포/접합체의 단계를 나타냅니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_Table%204_revv2.xlsx" target="_blank">이 표를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>

Common marmosets are small New World monkeys. Since many of their biological mechanisms are similar to those of humans, marmosets are potentially useful ...

blood-sampling-hormone-measurement-for-determining-stage-ovarian

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

여기, 우리는 간단한 비 침습적 수집 및 질을 뛰어 넘는 샘플 cytological 평가하여 손쥐 생식 (proestrus, 발정, metestrus, 또는 diestrus)의 단계를 확인하는 방법에 대해 설명합니다. 우리는 더 질 세포학은 손쥐 생식주기를 통해 전환을 하부 호르몬 수준을 순환 반영 방법에 대해 설명합니다.

마우스 Estrous 사이클 스테이징 확인을 위해 질 세척, 크리스탈 바이올렛의 착색 및 질 Cytological 평가를 수행

에스트로겐과 같은 생식선 호르몬은 공포, 소멸, 기억을 포함한 여러 실험 패러다임에서 기억 형성을 조절합니다. 이 프로토콜은 발정 주기 모니터링 및 외인성 에스트로겐 투여를 포함하여 자연적으로 순환하는 암컷에서 사멸 중 특히 생식선 호르몬의 영향을 조사하기 위한 일련의 방법을 설명합니다.

당연히 여성 쥐 사이클링에 에어컨 공포의 멸종 유학을위한 프로토콜

여기 억제 쥐에서 꼬리 팁 혈액 샘플링 프로토콜 자주 샘플 컬렉션에 대 한 선물이. 이 메서드는 타악기 황 호르몬 분 비의 사정 패턴에 대 한 유용 하 고 다른 순환 요인의 분석에 대 한 적응 될 수 있습니다.

타악기 황 호르몬 분 비의 평가 대 한 쥐에서 꼬리 팁 혈액 샘플링을 자주

우리는 PCOS와 이러한 PCOS 같은 댐에서 자손의 이상 공부 dihydrotestosterone 펠 릿 마른 PCOS 같은 마우스 모델의 개발을 설명 합니다.

Polycystic 난소 증후군 연구 Hyperandrogenic 마우스 모델

수륙 양용 생물학의 연구는 많은 분류학 그룹의 유기체를 구동 하는 생식, 생리, 배아 및 개발 프로세스에 대 한 귀중 한 정보를 제공 합니다. 여기에서, 우리는 양서류에 있는 난소 통제 그리고 감시를 공부하기 위하여 이용될 수 있는 다른 방법론에 포괄적인 가이드를 제출합니다.

양서류에서 난소 모니터링 및 제어를위한 생식 기술

이 연구는 암컷 쥐와 관련된 실험 설계에서 고려해야 할 중요한 요소를 자세히 설명합니다. 더 큰 의미에서 이러한 데이터는 낙인을 줄이고 더 포괄적 인 진단 및 개입 도구의 개발을 돕는 역할을합니다.

질 세척을 활용한 설치류 에스트로우스 사이클 모니터링 : 정상주기와 같은 것은 없습니다.

여기에서는 동물 인큐베이터에서 새끼 마모셋을 키우는 손 사육 방법을 설명합니다. 이 방법은 마모셋 유아의 생존율을 크게 증가시켜 다양한 출생 후 환경에서 자란 유사한 유전적 배경을 가진 마모셋 유아의 발달을 연구할 수 있는 기회를 제공합니다.

유아용 마모셋의 손 기르기 방법

황체 형성 호르몬(LH) 박동은 생식 기능의 특징입니다. 우리는 연속적인 자동 혈액 수집과 관련된 특정 신경 세포 집단의 원격 활성화를 위한 프로토콜을 설명합니다. 이 기술은 시간 제한 호르몬 조절, 다중화 및 의식이 있고 자유롭게 움직이며 방해받지 않는 동물의 LH 수준에 대한 조작 효과를 최소화할 수 있습니다.

생쥐의 순환 황체 형성 호르몬을 유도하고 측정하기 위한 자동 혈액 샘플링과 결합된 원격 신경 세포 활성화

여기에서는 마모셋 증후군(WMS, 염증성 장 질환(IBD) 유사 질환이라고도 함)을 트라넥삼산으로 소모하기 위한 수정된 치료 방법을 설명합니다. 또한 치료제를 경구, 피하, 정맥 주사로 투여하는 방법도 제시합니다.

Tranexamic Acid를 이용한 마모셋 증후군의 소모성 치료 방법 수정 및 지원 조치

배란 전 기간 동안 난소 혈류의 변화는 배란에 필수적입니다. 도플러 초음파 검사는 난소 혈류역학 및 관류를 평가하기 위해 인간과 대형 동물에서 사용되었습니다. 마우스의 배란 전 및 배란 전후 단계에서 난소 혈역학을 평가하기 위해 도플러 초음파를 적용하기 위한 프로토콜이 제시됩니다.

생쥐의 난소 혈관 기능의 실시간 이미징 및 정량화를 위한 도플러 초음파 검사

학습하세요 마모셋 난소 주기 단계 결정을 위한 혈액 샘플링 및 호르몬 측정 방법을. 프로게스테론, 에스트라디올, 융모성 성선자극호르몬 수치 측정으로 배란 시점을 정확히 예측하여 유전자 변형 마모셋 생성 효율성을 높입니다.

마모셋의 난소 주기의 단계를 결정하기 위한 혈액 샘플링 및 호르몬 측정

더 많은 동영상 탐색