Name: 업데이트된 멀티플렉스 LN34 Real-Time 역전사-중합효소 연쇄 반응 분석을 통한 동물 광견병의 사후 진단 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-02T12:35:00.000+00:00
Duration: 9 min 54 s
Description: 배우세요 업데이트된 멀티플렉스 LN34 실시간 RT-PCR 분석을 통한 동물 광견병 사후 진단 방법입니다. 뇌 조직 채취부터 RNA 추출, 결과 해석까지 단계별 프로토콜을 확인하세요.

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<ol><li>Meechan, P. J., Potts, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMeechan%2C+PJ+%22Biosafety+in+Microbiological+and+Biomedical+Laboratories%22">Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories</a>. , Centers for Disease Control and Prevention. (2020).</li>
<li>Terrestrial Manual 2023. , World Organization for Animal Health. At
 <a target="_blank" href="https://www.woah.org/en/what-we-do/standards/codes-and-manuals">https://www.woah.org/en/what-we-do/standards/codes-and-manuals</a> (2023).</li>
<li>Laboratory Techniques in Rabies. Volume 1, World Health Organization. At
 <a target="_blank" href="https://iris.who.int/handle/10665/310836">https://iris.who.int/handle/10665/310836</a> (2018).</li>
<li>Laboratory Techniques in Rabies. Volume 2, World Health Organization. At
 <a target="_blank" href="https://iris.who.int/bitstream/handle/10665/310837/9789241515306-eng.pdf?ua=1">https://iris.who.int/bitstream/handle/10665/310837/9789241515306-eng.pdf?ua=1</a> (2019).</li>
<li>Genevie, R., et al. Protocol for postmortem diagnosis of rabies in animals by direct fluorescent antibody testing: A minimum standard for rabies diagnosis in the United States. , At
 <a target="_blank" href="https://www.cdc.gov/rabies/pdf/RabiesDFASPv2.pdf">https://www.cdc.gov/rabies/pdf/RabiesDFASPv2.pdf</a> (2003).</li>
<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22WHO+Expert+Consultation+on+Rabies%3A+Third+Report%22">WHO Expert Consultation on Rabies: Third Report</a>. , World Health Organization. Geneva. (2018).</li>
<li>Gigante, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-site+evaluation+of+the+LN34+pan-lyssavirus+real-time+RT-PCR+assay+for+postmortem+rabies+diagnostics%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Multi-site evaluation of the LN34 pan-lyssavirus real-time RT-PCR assay for postmortem rabies diagnostics.</a> PLoS One. 13 (5), e0197074(2018).</li>
<li>Wadhwa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Pan-Lyssavirus+Taqman+Real-Time+RT-PCR+assay+for+the+detection+of+highly+variable+rabies+virus+and+other+lyssaviruses%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Negl+Trop+Dis%22%5BJournal%5D)">A Pan-Lyssavirus Taqman Real-Time RT-PCR assay for the detection of highly variable rabies virus and other lyssaviruses.</a> PLoS Negl Trop Dis. 11 (1), e0005258(2017).</li>
<li>Gigante, C. M., Wicker, V., Wilkins, K., Seiders, M., Zhao, H., Patel, P., Orciari, L., Condori, R. E., Dettinger, L., Yager, P., Xia, D., Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+pan-lyssavirus+LN34+assay+for+streamlined+rabies+diagnostics+by+real-time+RT-PCR%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Virological+Methods%22%5BJournal%5D)">Optimization of pan-lyssavirus LN34 assay for streamlined rabies diagnostics by real-time RT-PCR.</a> Journal Virological Methods. , In press (2024).</li>
<li>Rao, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+modified+preexposure+prophylaxis+vaccination+schedule+to+prevent+human+rabies%3A+recommendations+of+the+advisory+committee+on+immunization+practices-United+States%2C+2022%5BTitle%5D)+AND+%22Morbidity+and+Mortality+Weekly+Report%22%5BJournal%5D)">Use of a modified preexposure prophylaxis vaccination schedule to prevent human rabies: recommendations of the advisory committee on immunization practices-United States, 2022.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report. 71 (18), 619(2022).</li>
<li>Condori, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+the+LN34+Pan-Lyssavirus+Real-Time+RT-PCR+assay+for+rabies+diagnosis+and+rapid+genetic+typing+from+formalin-fixed+human+brain+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Using the LN34 Pan-Lyssavirus Real-Time RT-PCR assay for rabies diagnosis and rapid genetic typing from formalin-fixed human brain tissue.</a> Viruses. 12 (1), 120(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>7500 패스트</td><td>응용 생명 시스템</td><td>해당 없음</td><td>검증 없이 대체하지 마세요</td></tr><tr><td>7500 빠른 진단 &nbsp;</td><td>응용 생명 시스템</td><td>해당 없음</td><td>검증 없이 대체하지 마세요</td></tr><tr><td>ABI VIIA 7</td><td>응용 생명 시스템</td><td>해당 없음</td><td>검증 없이 대체하지 마세요</td></tr><tr><td>AgPath-ID 원스텝 RT-PCR 키트 &nbsp;</td><td>서모피셔 사이언티픽 &nbsp;</td><td>AM1005</td><td>검증 없이 대체하지 마세요</td></tr><tr><td>비드버그6</td><td>벤치마크 사이언티픽</td><td>D1036</td><td></td></tr><tr><td>직접 조르 RNA 미니프렙 키트 &nbsp;</td><td>자이모 리서치</td><td>R2052</td><td></td></tr><tr><td>MagNA 라이저 그린 비즈 &nbsp;</td><td>로슈</td><td>3358941001</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 원심분리기</td><td>에펜도르프와 nbsp;</td><td>5425 R</td><td></td></tr><tr><td>광학 96웰 반응판</td><td>서모피셔 사이언티픽 &nbsp;</td><td>4346907</td><td></td></tr><tr><td>광학 접착 커버</td><td>서모피셔 사이언티픽 &nbsp;</td><td>4311971</td><td>대안: 캡</td></tr><tr><td>폴리에스터 섬유 팁 어플리케이터 면봉 &nbsp;</td><td>BD BBL 폴리에스터 섬유 팁 적용 스왑</td><td>220690</td><td></td></tr><tr><td>퀀트스튜디오 6Flex</td><td>응용 생명 시스템</td><td>4485691</td><td>검증 없이 대체하지 마세요</td></tr><tr><td>4차 암모늄 소독제 (1:256)</td><td>라이솔</td><td>WBB56939</td><td>검증 없이 대체하지 마세요</td></tr><tr><td>RNase 제거</td><td>서모피셔 사이언티픽 &nbsp;</td><td>7002PK</td><td></td></tr><tr><td>RNaseZap</td><td>서모피셔 사이언티픽 &nbsp;</td><td>AM9780</td><td></td></tr><tr><td>일회용 메스, 안전 장치가 있는 메스;</td><td>인테그라 밀텍스&nbsp;</td><td>4-510</td><td></td></tr><tr><td>멸균 폴리프로필렌 마이크로 원심분리관(1.5 mL), 뉴클레아제 없음</td><td>사르스테트</td><td>72.692.405</td><td></td></tr><tr><td>멸균 폴리프로필렌 마이크로 원심분리기 튜브(2 mL), 뉴클레아제 없음</td><td>사르스테트</td><td>72.694.600</td><td></td></tr><tr><td>트리졸 시약</td><td>서모피셔 사이언티픽 &nbsp;</td><td>15596026</td><td>검증 없이 대체하지 마세요</td></tr></tbody></table>

업데이트된 멀티플렉스 ln34 real-time 역전사-중합효소 연쇄 반응 분석을 통한 동물 광견병의 사후 진단

Postmortem Diagnosis of Rabies in Animals by the Updated, Multiplexed LN34 Real-Time Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction Assay

업데이트된 멀티플렉스 LN34 Real-Time 역전사-중합효소 연쇄 반응 분석을 통한 동물 광견병의 사후 진단

Rabies is a fatal zoonotic disease caused by Lyssavirus rabies (RABV) and related negative strand RNA viruses from the Lyssavirus genus (family ...

postmortem-diagnosis-rabies-animals-updated-multiplexed-ln34-real

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

직접 급속 면역 조직 화학 검사 (DRIT)는 광견병 진단을위한 직접 형광 항체 (DFA) 테스트에 대한 인식 대안 동물 보건 및 세계 보건 기구 (OIE / WHO)에 대한 세계 기구를 제공합니다. 이 시험은 가벼운 현미경 검사법을 사용하여 두뇌 노출에 따라 대략 1 시간에서 수행 될 수있는 필드 기반 응용 프로그램을 허용합니다.

직접 신속한 면역 기능 화학 검사를 사용하여 향상된 광견병 감시

중첩 된 범-리스 사 바이러스는 역 전사 중 합 효소 연쇄 반응을 특이 적으로 알려진 모든 리즈 사 바이러스를 검출 하기 위해 개발 되었다. 다른 동물 종의 광견병 뇌 샘플을 이용한 검증은이 방법이 금 표준 형광 항 체 시험에 상응 하는 민감도 및 특이성을 가지 며, 일상적인 광견병 진단을 위해 사용 될 수 있음을 보여주었다.

Lyssaviruses 검출을 위한 보편적 중첩 역방향 전사 중 합 효소 연쇄 반응의 평가

이 프로토콜의 목표는 광견병 검사를 위한 만족스러운 조직 샘플을 얻기 위해 크고 작은 동물에서 안전한 부검 기술을 입증하는 것입니다.

크고 작은 동물의 광견병 부검 기법

dsDNA 인터칼레이팅 염료를 사용하는 이러한 실시간 RT-PCR은 리사바이러스 감염을 진단하는 데 적합합니다. 이 방법은 광견병에서 추출한 RNA로 시작하여 영양분 또는 사후 샘플로 의심되는 데, 마스터 믹스 준비, RNA 추가, 실시간 기계 설정 및 결과의 정확한 해석을 자세히 설명합니다.

광견병 진단을 위한 팬-리사바이러스 실시간 RT-PCR

우리는 뇌 생검 샘플링에서 최종 해석에 이르기까지 신속한 면역 크로마토그래피 진단 테스트 (RIDT)를 사용하여 필드 조건하에서 동물 광견병의 사후 진단을위한 완전한 프로토콜을 제시합니다. 우리는 또한 분자 분석 및 바이러스 성 지노티핑을 위한 장치를 사용하여 추가 응용을 설명합니다.

추가 분자 응용을 가진 자원 제한 적인 설정을 위한 필드 사후 광견병 급속한 면역학로토그래피 진단 시험

여기서, 우리는 조혈 고정 조직을 위한 대체 진단 시험으로서 광견병 바이러스 항원 검출을 위한 면역조직화학 시험 프로토콜을 제시한다.

포르말린 고정 조직에서 리사바이러스 항원 검출을 위한 면역조직화학 시험

이 프로토콜은 체외 전사를 사용하여 다양한 소 뇌 해부학 구조 내에서 광견병 바이러스 뉴클레오프로틴(N) 유전자 복사 수를 결정하기 위한 qRT-PCR 기반 접근법을 제시한다.

다양한 소 뇌 구조에서 광견병 바이러스의 양

솔라리스 qPCR 진 표현 Assays은 분석의 특이성과 견고을 희생하지 않고 qPCR 프로세스를 단순화하기위한 새로운 사전 설계 qPCR 뇌관 / 프로브 조합입니다.

써모 과학 솔라리스 qPCR 어세를 사용하여 정량 실시간 PCR

정량 실시간 PCR (qRT - PCR)은 다른 곤충의 조직 및 발달 단계에서 mRNA 수준을 진단하는 효과적인 도구입니다. 이 보고서에서 우리는 다른 애벌레 조직에서 확인할 mRNA 레벨 및 침입 곤충의 종, 에메랄드 애쉬 송곳의 발달 단계에 qRT - PCR의 사용을 보여줍니다.

에메랄드 애쉬 보러에서 유전자 발현 분석 ( Agrilus planipennis)를 사용하여 정량 리얼 타임 PCR

PCR은 많은 분자 생물학 연구소의 일반적인 기법으로 부상하고있다. 여러 기존의 PCR 프로토콜에 대한 안내서가 여기에 제공됩니다. 각 반응은 독특한 실험, 제품이 다양 생성하는 데 필요한 최적의 조건이기 때문에. 반응의 변수를 이해하는 것은 크게함으로써 원하는 결과를 얻을 수있는 기회를 증가 문제 해결 효율성을 향상시킬 것입니다.

중합 효소 사슬 반응 : 기본 프로토콜 플러스 문제 해결 및 최적화 전략

배우세요 업데이트된 멀티플렉스 LN34 실시간 RT-PCR 분석을 통한 동물 광견병 사후 진단 방법입니다. 뇌 조직 채취부터 RNA 추출, 결과 해석까지 단계별 프로토콜을 확인하세요.

업데이트된 멀티플렉스 LN34 Real-Time 역전사-중합효소 연쇄 반응 분석을 통한 동물 광견병의 사후 진단

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