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DOI: 10.3791/66797-v
Julieta S. Del Valle1,2, Azra Husetic*1, Dina Diek*1, Laurens F. Rutgers*1, Joyce D. Asseler3,4,5, Jeroen Metzemaekers6, Norah M. van Mello3,4,5, Susana M. Chuva de Sousa Lopes1,2,7
1Department of Anatomy and Embryology,Leiden University Medical Center, 2The Novo Nordisk Foundation Center for Stem Cell Medicine (reNEW),Leiden University Medical Center, 3Department of Obstetrics and Gynaecology,Amsterdam University Medical Center, 4Centre of Expertise on Gender Dysphoria,Amsterdam UMC, 5Amsterdam Reproduction and Development Research Institute, 6Department of Gynaecology,Leiden University Medical Center, 7Ghent-Fertility and Stem Cell Team (G-FAST), Department of Reproductive Medicine,Ghent University Hospital
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
이 프로토콜은 일차 인간 난소 표면 상피(hOSE) 세포에서 3차원(3D) 조직 오가노이드를 확립하는 방법을 설명합니다. 이 프로토콜에는 갓 채취한 난소에서 hOSE 분리, hOSE의 세포 확장, 동결 보존-해동 절차 및 오가노이드 유도가 포함됩니다. 면역형광(Immunofluorescence), 정량 분석(quantitative analysis) 및 스크리닝 플랫폼으로서의 유용성 입증(showcasing utility as a screening platform)이 포함되어 있습니다.
우리의 연구는 인간의 난소 기능을 이해하는 데 중점을 둡니다. 여성 생식 건강에 대한 지식 격차가 여전히 존재하고 불임 치료를 위한 새로운 기술에 대한 필요성이 증가함에 따라 우리는 새로운 임상 프로토콜의 개발을 촉진하기 위해 모낭 형성 또는 조직 재생과 같은 난소 과정을 연구하는 것을 목표로 합니다. 최근 몇 년 동안 우리는 3D 조직 배양 프로토콜의 큰 발전을 목격했습니다.
이러한 발전은 예를 들어, 모든 부위 전체 이미지의 성숙을 지원할 수 있는 난포와 같은 구조인 인공 난소의 형성을 가능하게 했습니다. 또한 장기 또는 조직의 축소된 버전인 오가노이드 또는 튜머로이드가 난소 생물학 및 질병에 대한 추가 연구를 위한 길을 닦는 방법도 보고 있습니다. 가임기 기증자로부터 채취한 난소 샘플에 접근하는 것은 여전히 큰 도전입니다.
또한 이 물질을 사용할 때 얻은 결과는 기증자의 연령, 대사 상태 및 내분비 기능의 차이와 같은 요인으로 인해 높은 기증자 간 생존력을 보여줍니다. 전체적으로 이러한 이질성은 결과를 재현하고 프로토콜을 클리닉으로 변환하는 것을 어렵게 만듭니다. 그럼에도 불구하고 난소는 신체 내에서 가장 역동적이고 변화하는 기관 중 하나로 두드러지지만 난소의 재생 메커니즘은 여전히 잘 알려져 있지 않습니다.
그리고 실제로, 지금까지 얻어진 대부분의 지식은 여전히 동물 모델에서 나온 것입니다. OSC 오가노이드 프로토콜을 통해 난소 조직 재생 및 상처 치유에서 인간 OSC 층의 역할을 연구할 수 있는 플랫폼을 제공합니다. 다른 프로토콜과 비교하여 당사의 프로토콜은 비병리학적 샘플의 사용을 기반으로 설계되었습니다.
이를 통해 인간의 난소 기능에 대한 근본적인 기계론적 질문에 대한 답을 찾으려는 발달 연구에 적용할 수 있습니다.
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